我用的Taq酶的含量是1000u 浓度是5u/μl 请问这里的u是什么意思

[PCR,RT-PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为

[PCR,RT-PCR,质粒构建,求助]PCR的时候用普通Taq酶能P出的东西,为什么换了高保真酶之后,同样的循环条件为什么P不出条带?

崔伟1年前3

jinshan111 共回答了15个问题 | 采纳率100%

其实我在实验中也会经常遇到各种各样的问题,一次机会我结识了威斯腾生物,经常有问题我会向他们请教,虽然我没找他们做过,但是我提到的一些技术上的问题他们都能有效的解答,态度也挺好的.

1年前查看全部

用taq酶PCR时为什么会加上polyA,是每个循环都加或是最后总延伸时加?其具体机制是怎样的?

qingpg291年前2

jx0201 共回答了22个问题 | 采纳率90.9%

大部分Taq会在每次扩增的3‘端加1个A（是在扩增到末端的时候,已经读到模版链5’结尾）,不是polyA.因为这个多加的A和引物并不匹配,所以不会被进一步扩增,PCR产物只有3’的一个A.机制未知.
PCR产物类似这样：
5‘ ------------A 3'
3' A----------- 5'

1年前查看全部

PCR SuperMix中的Taq酶和Pfu酶有什么区别?

PCR SuperMix中的Taq酶和Pfu酶有什么区别?
它们分别有什么作用?

sq_end1年前1

zzxxcc0818 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%

两者都是DNA聚合酶,区别在于,pfu是高保真DNA聚合酶,即DNA合成时碱基错配率比taq酶低,一般情况,不太长的片段或序列准确度要求不是很严格的用taq酶,对于长片段或序列准确度要求高的用pfu酶.在实际使用中,往往鉴于pfu酶价格比taq酶高,出于节省的目的,两种酶混合使用也可达到提高保真度的效果.

1年前查看全部

PCR的15ul反应体系模板,上下引物,2*Taq酶混合物,双蒸水各是多少

12oclock1年前2

ty850218 共回答了13个问题 | 采纳率92.3%

模板DNA,10Xbuffer,dDNP(原液按照1:4稀释),上下游引物各1.5ul.Taq酶0.15ul.ddH2O 9ul

1年前查看全部

热稳定DNA聚合酶的本质是什么就是PCR技术用的酶 也称Taq酶不是RNA么？

叛逆者LJ1年前3

xing888cn 共回答了13个问题 | 采纳率100%

蛋白质

1年前查看全部

PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰

PCR为什么要在冰上操作?
做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.

dodo2111年前7

ahcl 共回答了21个问题 | 采纳率76.2%

这些个材料都容易变质,taq要失活,引物会降解,模板会断裂……所以要保持低温,而且用完要马上放回-20℃冰箱保存.

1年前查看全部

PCR反应中Taq酶最适温度为75度,为什么把仪器设为72度?

落梨雪么睡觉1年前1

ss佐奕 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%

其实虽然tap酶的最适温度在75度,但处于这个温度下酶失活的速度也较72度要快,而72度时,酶的活力与75度相比虽有下降,但对最终结果影响不大
而且温度高,不利于引物和模板的结合,也不利于合成出的dna链与模板结合.
个人理解,仅供参考.

1年前查看全部

最近做PCR扩增,用taq酶能扩出条带来,但是换成primerstar之后就一直出不了带,到底是什么原因?

最近做PCR扩增,用taq酶能扩出条带来,但是换成primerstar之后就一直出不了带,到底是什么原因?
师姐说从来没遇到过,一般都是primer能出,taq酶出不了,不知道为什么我遇到这么奇怪的现象

ESeraph1年前4

rofin_wang 共回答了18个问题 | 采纳率83.3%

做个对照,如果酶没有问题的话.那可以降低一下退火温度或者稍微提高一下模板量再试试.

1年前查看全部

三博远志Taq DNA polymerase-taq酶

lichenya1年前1

小尚的天堂 共回答了25个问题 | 采纳率84%

三博远志最新研制的GenAmp Taq Polyemerase系列,为各种困难PCR的扩增提供全面解决方案：对低模板浓度、GC-Rich、低扩增得率有特效.其特性为：
*高效扩增：扩增效率显著优于一般Taq酶,无需优化就能得到大量目的PCR产物.
*困难模板扩增：GenAmp Taq和GenAmp Taq Hot配合高效反应缓冲液,能应对大多数困难模板的扩增.GenAmp Taq Enhancer Kit和GenAmp Taq Enhancer Hot Kit专为困难模板扩增研发,极大提高对高GC模板和发卡结构的扩增效率.
*表现稳定：本制品是高纯制品,可长期稳定储存.严格的质量检测确保每一批酶都有稳定的表现.
Taq DNA polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经过柱纯化分离出来的一个约94 KD的重组蛋白.无外源核酸酶和细菌DNA污染,稳定性好,特异性强,适用于常规PCR扩增.
产品特点：
· 活性强
· 产量高、特异性好
· 扩增片断通常可达5 k

1年前查看全部

rTaq酶和Taq酶相比有什么特点?

rTaq酶和Taq酶相比有什么特点?
ExTaq呢？

56055501年前2

btusers 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%

taq酶就是Taq酶.
ExTaq实际上就是普通rTaq和Pfu DNA聚合酶(高保真酶) 的混合物!

1年前查看全部

在DNA的PCR扩增反应中加入过量的Taq酶会不会发生什么严重的后果?

我不迟钝1年前1

ZITA1021 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%

正常情况下如果酶量偏高则会出现很多非特异性扩增,比如引物二聚体、非目的片段等,跑胶的时候也会出现很多乱七八糟的条带,但是如果酶量非常的多,则会对反应产生抑制作用,就像可逆反应一样,酶量太多会抑制反应的正向进行,严重的时候甚至没有目的条带,加酶的时候尽量按照产品说明书去配,这样可以有效避免上述发生可能性.

1年前查看全部

PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑

PCR产物问题
如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000
而第二次是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体
这是为什么呢?
我用的引物都是一样的~2次PCR时间间隔不到一个星期.

安家蟹1年前2

skywwn 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%

模板是什么?基因组么?两次用的模板是一批做的么?时间长的话模板可能会降解

1年前查看全部

做ISSR 的PCR条件优化我想根据这几个做个正交试验 模板浓度,dNTP,引物浓度,taq酶,Mg离子浓度是不是太多了

做ISSR 的PCR条件优化
我想根据这几个做个正交试验 模板浓度,dNTP,引物浓度,taq酶,Mg离子浓度
是不是太多了……?
退火温度我用梯度PCR基本弄好了,总体积25μl,模板1μl,引物1μl,其它用的是mix跑的,
我想问下上面各条件大概范围,比如模板浓度在0.5μl-3μl之间,其它的呢?
另外我还想问下ISSR一般条带是多少?我看有的说平均条带在10多条左右,我试过13条引物了最多的才12条带左右
多1°C热爱
你说的引物浓度这么低啊？0.2μM/L

luanyue1年前1

ewtqwefdsa 共回答了20个问题 | 采纳率85%

我把我本科 的实验体系给你,你参考下.
（1） 最佳DNA模板量
在PCR扩增系统中DNA模板的纯度和数量都会对结果产生影响.模板DNA抽提纯化不彻底残留苯酚,乙醇等物质将无法准确的扩增出预期结果；模板DNA用量过低会使扩增过程不完整,出现产物少,条带弱的结果；模板DNA用量过高又会出现非特异条带增多,背景弥散状[106].本实验结果表明模板量在20ng-100ng间条带都比较清晰,差异不大.从节约最优原则考虑选择20ng模板量（图3-9-a）.
（2）最佳Mg2+浓度
Mg2+浓度为2.0mmol/L时,所扩增的条带数最多,而且比较清晰,综合考虑本实验最佳Mg2+浓度定位2.0mmol/L.
（3） 最佳Taq酶浓度
在25µl的反应体系中2UTaq酶用量最优.条带清晰,且数目较多.
（4） 最佳dNTP浓度
本实验设定的5个dNTP梯度扩增结果看200μmol/L时条带最清晰选为最佳浓度（图3-9-d）.
（5） 最佳引物浓度
本实验引物浓度选取0.2μmol/L（图3-9-e）.
（6） 最佳退火温度
本实验发现反应体系退火温度为52℃时,

1年前查看全部

pcr试剂盒 保存温度pcr试剂盒里面有：混合液一管（dntp、buffer等）、taq酶一管.不小心把试剂盒放在4度里

pcr试剂盒 保存温度
pcr试剂盒里面有：混合液一管（dntp、buffer等）、taq酶一管.
不小心把试剂盒放在4度里放了3天左右.
请问对实验会有影响吗?如果有的话,影响多大呢.

我是你的圈圈1年前1

joease 共回答了21个问题 | 采纳率100%

扩增效率下降.

1年前查看全部

普通PCR25微升体系TAQ酶 (5 U/μl)加入多少,终浓度应该多少比较合适?

橙米1年前3

湖海一刀 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%

5u/ul的加0.5ul即可.

1年前查看全部

三博远志taq酶的优势?

cyndi_03041年前1

花胤 共回答了20个问题 | 采纳率75%

三博远志最新研制的GenAmp Taq Polyemerase系列,为各种困难PCR的扩增提供全面解决方案：对低模板浓度、GC-Rich、低扩增得率有特效.其特性为：
*高效扩增：扩增效率显著优于一般Taq酶,无需优化就能得到大量目的PCR产物.
*困难模板扩增：GenAmp Taq和GenAmp Taq Hot配合高效反应缓冲液,能应对大多数困难模板的扩增.GenAmp Taq Enhancer Kit和GenAmp Taq Enhancer Hot Kit专为困难模板扩增研发,极大提高对高GC模板和发卡结构的扩增效率.
*表现稳定：本制品是高纯制品,可长期稳定储存.严格的质量检测确保每一批酶都有稳定的表现.

1年前查看全部

什么是第一代热启动Taq酶

陆晓溪1年前1

邀人 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%

第一代热启动Taq酶是一种DNA聚合酶.
第一代指的是直接从Taq（这是一种细菌）体内提取的天然聚合酶,没有进行化学修饰的,为了达到更好的聚合催化效果,往往需要经过酶工程处理,得到的聚合酶催化效率更高.
热启动是指这种酶的反应温度条件,该酶在90℃以上才能发挥很好的催化效果.

1年前查看全部

基因重组为什么需要DNA聚合taq酶?

基因重组为什么需要DNA聚合taq酶?
taq酶不是PCR里的吗,基因重组为什么需要?

wangxr121年前1

只爱空白 共回答了22个问题 | 采纳率100%

既然是重组就应该肯定有DNA聚合,那就需要DNA聚合酶,而Taq酶既具有热稳定性,其本身也是一种DNA聚合酶.

1年前查看全部

PCR技术中Taq酶的获取源 以及利用该酶进行DNA复制的方法和注意点.

1984821年前1

wan8009 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%

请问你是高中生吗
是的话 在书中就有,TAqDNA聚合酶是一种耐热微生物中分离出来的,1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶.
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度.理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增.

1年前查看全部

强酸强碱或高温使酶失活是对的吗?被老师给否认了,举得例子是Taq酶和有的酶是RNA 在高中范围内的

强酸强碱或高温使酶失活是对的吗?被老师给否认了,举得例子是Taq酶和有的酶是RNA 在高中范围内的
如果是在大学范围内也说下,

深邃的夜空11年前1

tao__zui 共回答了13个问题 | 采纳率76.9%

应该说酶都是有自己工作的最适pH和最适温度,如果偏离了,酶的活性就会降低,但降低到一定程度时,我们就认为它失活了,
而有些酶的最适pH或最适温度恰好就是强酸强碱或高温,也就是说在这种情况下它的工作状态是最好的,所以说强酸强碱或高温和酶的失活没有必然的联系,不能说在这种条件下酶就一定失活

1年前查看全部

Taq酶特有的特性

llzz15071年前2

神奇小邪 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%

热稳定性（耐高温）

1年前查看全部