illumina测序为什么要消化第二链

狮子只想被爱2022-10-04 11:39:542条回答

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asi197977 共回答了22个问题 | 采纳率86.4%
illumina测序现主要是两端测序,其测序策略为测DNA一条链的前100bp,然后再测两一条链的另一端的100bp,所以在illumina测时候是一条链一条链的测序的.这也是为什么后面要消化掉第二条链的原因.
1年前
开心孤行侠 共回答了2个问题 | 采纳率
只有单链的情况下,才能碱基互补配对,进行扩增延伸。
据我所知,到目前为止,所有的测序仪都是单链测序的。
1年前

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anniechu 共回答了16个问题 | 采纳率100%
你已经解释的很清楚了,mate pair测序的DNA文库是将很长的DNA进行环化,环化的接口处连接识别序列,然后打断,富集含有识别序列的DNA,再进行双向测序,那么双向测序的插入片段长度就会很长.
而pair end是直接在DNA两端假设接头进行双向测序,插入片段长度较短
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Quitty_777 共回答了22个问题 | 采纳率86.4%
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cjkg 共回答了22个问题 | 采纳率81.8%
BaseSpace is Illumina’s genomics cloud computing environment for next-generation sequencing (NGS) data analysis.Now biologists and informaticians can easily and securely analyze,archive,and share sequencing data.NGS data analysis is simplified and accelerated with push-button tools.Cumbersome and time-consuming data transfer steps are eliminated.Productivity is improved.摘自illumina官网.
BaseSpace就是云计算环境了.具体你去官网查查吧!竟然在百度问这么专业的问题,厉害!
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上面那段话中最后那句是什么意思?
是不是测序峰值的高低代表不同dNTP发出的荧光信号?
aokyb1年前1
我知我傻的可以 共回答了13个问题 | 采纳率100%
上面这段话是普通二代测序(454测序法)的原理,不同的荧光信号表示不同的碱基.
你说的没错,测序结果返还给客户的时候一般都有两个文件,一个是Seq,一个是ab1,其中ab1这个文件就是测序峰图,测序结果就是根据峰图确定的.你也可以自己尝试检查这个峰图,来确定有些检测是不是测出来了,但是转换错了.
有问题我们可以继续交流.
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你好,最近在看TCGA数据库,其中raw_count,scaled_estimate,normalized_count,没能看明白什么意思,分别代表什么,我想做转录水平基因表达差异分析,需要用到哪些数据.
laaa1231年前2
magical 共回答了22个问题 | 采纳率86.4%
aw_count应该是某个转录本/基因的测到的原始reads条数,normalized_count是经过标准化的数据量;
差异分析需要统计 raw_count,FPKM值,pvalue