Takara的NheI 和BamHI双酶切体系表中没有双酶切缓冲体系应该如何选用缓冲液呢?

PCR时人模板DNA的量加到5μg会不会有点多?用的是TaKaRa Taq,50ul的反应体系

PCR时人模板DNA的量加到5μg会不会有点多?用的是TaKaRa Taq,50ul的反应体系
我是问会不会太多，听人说模板太多了对PCR反应也会有影响

少费话1年前1

珊瑚的思念 共回答了21个问题 | 采纳率100%

5μg的确有点多,看来你的DNA原液的浓度很高,一般PCR需要的模板量是有一定范围的,也是根据你要做的分子实验所需的PCR情况而不同的,模板量太高也许会有拖带或变性不完全现象,50ul你可以试着DNA终模板量为1μg或做几个不同模板量的梯度PCR,看看哪种效果最好,得以优化DNA模板量!

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takara LA Taq 酶 ExTaq哪个更好

天佑我rr1年前2

liushi_jian 共回答了26个问题 | 采纳率84.6%

各有千秋,看你具体做什么了：ExTaq扩增效率更高,通用性强.LATaq延伸性好,GC含量高的也能扩增出来.

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买的是TAKARA的内切酶 Sal I BamH I ,但是最适合温度一个37一个30,BUFFER选的是1.5T,想问

买的是TAKARA的内切酶 Sal I BamH I ,但是最适合温度一个37一个30,BUFFER选的是1.5T,想问下温度怎么定

小华爷爷1年前1

sadrgrsth 共回答了14个问题 | 采纳率85.7%

建议使用37度,因为BamH I在37度活性也是很高的,只是不如30度稳定.你可以参见商品目录A-12页.

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Takara DNA聚合酶上标HS什么意思

nfifeeqgdn1年前1

黄文戈 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%

具体看你说的哪种产品,不过应该是Hot start的意思.

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求takara la酶的正确使用方法.我做2800bp的片段,但是用la时出来,时没有,

求takara la酶的正确使用方法.我做2800bp的片段,但是用la时出来,时没有,
以cDNA为模板,浓度为1000ng/ul左右,酶需要多少,对应多少的体系.20ul和50ul的各如何?求高手指教,说明书上的似乎不合适……

柴莎1年前1

小敏1985 共回答了20个问题 | 采纳率80%

25ul体系：LApremix 12.5ul
cDNA 1ug
上下游引物 各0.5ul
水 补至25ul
50ul体系以上各量均乘以2
我p的也是2800左右的片段,重复性还不错

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TaKaRa PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

TaKaRa PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Oligo dT Primer 的具体序列是什么啊,除了poly（T）还有额外的碱基么?在做3'RACE,不知道如何设计退火温度,5'端上游引物的Tm是60°

yaner15761年前1

qingyimanyuan 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

oligo dT primer 是商业化的啊,你做3'RACE怎么能用oligo dT呢,你应该有3‘的引物才对啊

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荧光定量pcr taqman探针设计 takara怎么样

mian31年前2

独在花下 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%

是个好办法

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反转录用的是TaKaRa 的oligo dt 18,工作液浓度配的是10umol/l.

反转录用的是TaKaRa 的oligo dt 18,工作液浓度配的是10umol/l.
但是单独买的mmlv说明上给的对应引物的参考是：每ug RNA 加0.5ug的 primer adaptor.那我加oligo dt ,该用多少?因为oligo dt 的说明书上只说 包装量是 14nmol ,建议了通常使用浓度.没有给?ng/ul这样的数据.所以我不知道mmlv说的加多少ug的量改怎么算体积?

wert21年前1

dswen 共回答了24个问题 | 采纳率83.3%

非定量,所以你大可不必什么都计算准确.建议参考文献上Oligo dT的使用量,如果RNA加得少,你就用2ulOligo dT,20ul体系.

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