原核表达载体可以分为哪几类?

要完成这个实验，首先需要克隆基因，然后连接到载体上，再转化进大肠杆菌中，摸索合适的条件使其基因产物表达，最好使其分泌到菌体后，这样才能方便检测。
首先在克隆基因时要设计合适的引物进行PCR，然后再将PCR产物纯化，PCR时也需要摸索条件。
然后是连接，要使用合适的载体，一般PCR产物可以直接使用T载体进行连接。
转化的时候要确定所制备的感受态细胞是可用的，最好用蓝白斑筛选。
最后可以用WESTERN去检验表达的产物，如果产物是蛋白质的话。

构建表达载体首先取决于你的实验目的,例如你的实验是否要求你的蛋白表达出来必须可溶性蛋白,载体上面的标签决定了你的纯化方法,当然也决定了实验成本,等等一系列需求.
拿带标签的载体为例,因为带标签后可以增加蛋白质的可溶性,也为纯化带来了方便,一般都会采用.标签一般都是在目的蛋白的N端,这样就需要考虑读码框的问题,一定要与前面的读码框保持一致.
利用酶切连接的方法连入目的载体这个应该都知道,或者用gateway系统,非常方便,我就经常用gateway载体,构建起来速度呼呼的.
基本就是这些了吧,主要就考虑选择什么标签和读码框别错了.
有什么问题可以直接发信给我

原核表达一般周期短,但蛋白的活性不能确定
真核表达经过糖基化,磷酸化,和目的蛋白相似性高,周期要长,往往有的还有养细胞

是从载体上的ATG开始的.
Your start codon would not work,since you do not have ribosome binding site upstream of your start codon.
Good luck!

1,能在受体细胞中稳定存在并自我复制
2.具有多个酶切位点
3具有标记基因,启动子,终止子

大体分为一下几步：
1.设计目的片段引物（含限制性酶切位点,要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）
2.PCR扩增片段
3.扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接,通过蓝白斑筛选,提质粒并酶切鉴定；将正确连接的克隆载体重组质粒酶切,回收目的片段
4.目的片段与表达载体连接
5.转化到DH5a等克隆菌株,通过抗生素筛选,鉴定表达重组质粒.
6.测序检测
7.正确的表达重组质粒再转到表达菌株
8.表达