紫外分光计算吸光度时,光程要不算上容器壁厚度

吸光值出现负值原因有很多,当样品基体和空白不一样并吸光度低于空白时就会出现吸光度为负数;因为干扰的存在,便得样液在特定波长下吸光度低过空白.如果说你分析的样品对分析的元素有很大的干扰,分析的方法有致命错误,在用纯标准分析样品时经常会有你说的现象,即使没有”倒光头”的现象,被测元素真实的浓度与纯标准分析的结果大相径庭.解决的办法有：基体加入法 元素分离等等．．．．

紫外分光：
许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱,因此可用紫外分光光度法对有机物质进行定性鉴定,结构分析及定量测定．紫外分光光度法定量测定的依据是比耳定律.首先确定化合物的紫外吸收光谱,确定最大吸收波长.在选定的波长下,作出化合物溶液的工作曲线,根据在相同条件下测得待测液的吸光度值来确定待测液中化合物的含量.
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果.由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或 测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础.分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段.
紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律.即物质在一定浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比
凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定.
荧光分光：
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器.其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况.通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系.荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm.可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描.
简单来说,紫外分光主要用于对化学物质的鉴别、纯度检查及含量测定,荧光分光主要对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析.其实两者都可以对成分进行分析,但前者直接测物质对光的吸收峰,后者是检测经光源激发后产生的荧光.

紫外分光光度计是被测溶液对紫外线的吸收.光源是利用氢灯发出的紫外线.
原子吸收分光光度计是在高温激发态下的离子,对相应的空心阴极灯发出的特征光谱的吸收.如铜、铁、汞、铅、镉、锌等空心阴极灯,可对应测上述离子浓度.

就是检出限吧
比如说我们用的721,显示吸光度都是0.xxx,所以检出的最小吸光度就是0.001,然后代入朗伯比尔定律0.001=εbc,算出c就成了,因为不同物质ε不同,所以c也不同,还有一种可能,有的物质浓度低了A-c就不成线性了,那就在工作曲线上找到最低呈线性的浓度