DNA变性和复性的意义及应用

C

主要是温度,浓度.
DNA变性黏度降低是因为DNA变性是解链,
蛋白质变性黏度升高因为其一级以上结构被破坏,成为贝塔状多肽链.

DNA发生解链变性时DNA分子的超螺旋结构被破坏,从而导致电泳迁移速率降低
超螺旋结构的DNA分子在凝胶中的迁移速率是最快的

AT之间有两根氢键,GC之间有三根氢键.DNA变性就是解旋,氢键断裂,氢键多,需要的能量大,变性温度高.

会,因为DNA的本质是蛋白质,蛋白质在高温会失去生物活性.

DNA变性是指DNA分子中（氢键）的破坏.
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如果是磷酸二酯键被破坏,称之为降解.

就是要变性啊,DNA在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质.

DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区.在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性.然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记.如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分,旧能形成双链区.由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出.
DNA分子杂交的意义 ：分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多.例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小；不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段；人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DNA单链和小鼠DNA单链能形成杂交分子,而且只是部分碱基配对.但是,人与鼠之间的DNA 杂交分子的形成,比人与酵母之间DNA杂交分子的形成要容易.在生物进化过程中,DNA中的碱基序列也发生了变化.两种生物的DNA单链之间互补程度越高,通过分子杂交形成双螺旋片段的程度也就越高,二者的亲缘关系就越近；反之,亲缘关系就越远.所以,可以通过DNA分子杂交技术来鉴定物种之间亲缘关系的远近.

变性只一个宽泛的概念,本意是指性质的改变,是质的改变；
蛋白质变性主要是蛋白质物理、化学和生物活性的改变,生物活性的丧失,其一级结构不变.
DNA变性是破坏碱基堆积力和氢键的相互作用,实质是DNA双螺旋区的氢键的断裂,不涉及共价键的断裂,由双链变为单链.DNA变性需要达到一定温度,而降温到退火温度后会复性.

DNA变性指核酸双螺旋氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键的断裂.
DNA复性指变性的DNA在适当条件下,可使分开的两条双链重新缔合为双螺旋结构.
性质的改变主要有：260nm紫外吸收值增高,即增色效应；DNA粘度降低,浮力密度升高,生物活性部分或全部丧失.

A

等电点（pI,isoelectric point）
　　等电点：两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的pH值即其等电点。
　　导航：氨基酸 蛋白质 核酸氨基酸的性质两性与等电点
　　18.2.2 两性与等电点
　　氨基酸具有氨基和羧基的典型反应，例如氨基可以羟基化、酰基化，可与亚硝酸作用；羧基以成酯或酰氯或酰胺等。此外，...

变性作用就是将DNA放入高温条件下使其解旋,复性作用就是恢复原来的温度DNA的化学性质不变.变性后DNA中氢键断开,使两条双链断开.这个主要用于PCR技术

对称系数越大,相应的DNA或蛋白质分子黏度就越大.球状体分子的不对称系数可看为1,而像线状分子的不对称系数可看为无穷大,1到无穷之间分子有个渐变有圆变为直线.所以线性分子不对称系数最大,黏度最大,所以NDA、RNA这类分子黏度最大,当它变性时,是向着非线性变化的,不对称系数就相应变小,黏度也就变小了；而大部分蛋白质分子可看为近似球形（当然也有线状的蛋白质分子,纤维蛋白等这里为了好理解）,它变性的时候是向着线性这个方向变化的,所以黏度反而增大.

不同：1.两者的变性条件不同,DNA一般是高温解旋变型,PCR仪就是利用DNA的变性复性的温度控制的原理制作的,一般72℃变性；
2.蛋白质是有可逆变性和不可逆变性两种,有很多物理因素化学因素可以使其变性,辐射也会变性,一般大的蛋白质是很难复性的,因为蛋白质的三级四级空间结构复杂,所以要使蛋白质复性很多情况下需要辅助因子协助,而一般情况下只要温度允许加上其他例如DNA聚合酶等条件下一般的DNA是可以复性成功的.
相同：1.两者变性后原有的形态结构会发生改变,例如蛋白质原有的空间结构会改变,大多数没有复杂的空间构像,变得延展延伸,而DNA会解旋形成两条单链而没有了双螺旋结构
2.两者变性后其原有功能都会受到很大程度的影响,例如蛋白质构成的酶变性会失活,而DNA变性无法进行转录,翻译等过程.

DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变.变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变.凡能破坏双螺旋稳定性的因素,如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可引起核酸分子变性.

球状体分子的不对称系数可看为1,而像线状分子的不对称系数可看为无穷大,1到无穷之间分子有个渐变有圆变为直线.所以线性分子不对称系数最大,黏度最大,所以NDA、RNA这类分子黏度最大,当它变性时,是向着非线性变化的,不对称系数就相应变小,黏度也就变小了；而大部分蛋白质分子可看为近似球形（当然也有线状的蛋白质分子,纤维蛋白等这里为了好理解）,它变性的时候是向着线性这个方向变化的,所以黏度反而增大.推荐参看下生物化学 王镜岩主编 高教的.MMD,看不懂

1 在真核细胞的线粒体或细菌中,物质在体内氧化时释放的能量供给ADP与无机磷合成ATP的偶联反应.
2 DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变.
3 通过疏水物的疏水基与水相互排斥作用而发生的非极性分子在水相环境中具有避开水而相互聚集的倾向
4 由于蛋白质表面离子化侧链的存在,蛋白质带净电荷.对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点.英文缩写 pI
5 蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,这种现象称为蛋白质变性.
6 具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂.核酶又称核酸类酶、酶RNA、 核酶类酶RNA.
7 在生物体内,从代谢物脱下的氢及电子,通过一系列酶促反应与氧化合成水,并释放能量的过程.也指物质在生物体内的一系列氧化过程.主要为机体提供可利用的能量.
8 在氧气不足条件下,葡萄糖或糖原分解为乳酸的过程,此过程中伴有少量ATP的生成.
9 由非糖物质转变为葡萄糖和糖原的过程,称为糖原异生作用.在正常情况下,主要在肝脏内进行.
10 焦磷酸硫胺素（thiamine pyrophosphate）简称TPP,酶的辅因子,是维生素B1的辅酶形式,参与转醛基反应.作为丙酮酸脱氢酶和α酮戊二酸脱氢酶的辅因子,在α酮酸脱羧反应中起作用.