革兰染色过程中,应注意哪些步骤

一般设置一个对照
即取一株生长健壮,且已知其革兰氏染色反应的菌株,与待检测的菌株一同染色,染色时间、染液量一致.染色后一同做镜鉴.
一般G+选枯草芽孢杆菌,G-取大肠杆菌

应该是：革兰氏染色
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了复合物,革兰氏阳性菌呈紫色；革兰氏阴性菌呈红色.
革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系.

原因很多,包括制片时菌膜的厚度和细菌量是否太多、脱色时间是否适宜、稀释石炭酸复红的浓度及是否已有沉淀、加热固定时是否加热过度等.具体请款更需要具体分析.

分开细菌,真菌,病毒学习.对比革兰阴性和革兰阳性菌的区别,主要是细菌细胞壁的结构成分不同.对于疾病与细菌的关系,可以做一下分类归纳,再紧紧记住就行.而细菌的表面抗原多,则可以和引起疾病机理联系.

C革兰阴性杆菌,B革兰阳性球菌,这个应该是双选题吧,烧伤感染的主要致病菌主要是金黄葡萄球菌,溶血性链球菌,和绿脓杆菌

通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色.

革兰氏染色法一般包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、沙黄（番红）复染等四个步骤,具体操作方法是：
1）涂片固定.
2）草酸铵结晶紫染1分钟.
3）自来水冲洗.
4）加碘液覆盖涂面染约1分钟.
5）水洗,用吸水纸吸去水分.
6）加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.
7）蕃红梁色液（稀）染2分钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
染色结果
革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色.

最好还是先根据细菌形态进行初步的鉴定,然后按照革兰氏染色步骤操作.
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是：
1）涂片固定.
2）草酸铵结晶紫染1分钟.
3）自来水冲洗.
4）加碘液覆盖涂面染1分钟.
5）水洗,用吸水纸吸去水分.
6）加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分.
7）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色.

某发热病人的痰标本经革兰染色后镜下见有阳性双球菌,形为矛头状荚膜染色可见较宽的荚膜该病人感染的细菌是肺炎链球菌