反转录PCR的引物也分为上游引物和下游引物吗.是不是和普通的PCR引物不一样啊.我有个很纠结的问题.刚才看了一个PCR

185468622022-10-04 11:39:541条回答

反转录PCR的引物也分为上游引物和下游引物吗.是不是和普通的PCR引物不一样啊.我有个很纠结的问题.刚才看了一个PCR 原理的视频顿时纠结了,视频上是双链DNA,上游引物和下游引物分别结合在两条链上.
那单链的cDNA要两个引物怎么结合啊.

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共1条回复
梅子之恋 共回答了23个问题 | 采纳率82.6%
单链的cDNA在和其中一个引物反应后,不就形成双链了吗?当然和天然的双链还是有区别的,就是在引物结合部位的上游还是单链.
所以反转录PCR的引物设计就是把cDNA当做双链一样进行的.
1年前

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zhui6866 共回答了12个问题 | 采纳率91.7%
通过反转录PCR,验证你转进去的基因有没有表达.
也就是RT-PCR可以验证转基因的XX(你研究的东西)中,这个转基因有没有起作用,用没有其功效
反转录PCR和荧光定量PCR很纠结的问题.我想做一个基因的表达量定量.之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量
反转录PCR和荧光定量PCR
很纠结的问题.
我想做一个基因的表达量定量.
之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量.
现在发现貌似反转录PCR也是可以做定量的,请问是不是这样?
这两个怎么都叫RT-PCR.我纠结死了.那要是做荧光定量的话是不是就不需要单独的做反转录PCR了.
不要贴这种段子行不。
xuna_momo1年前3
碧海微澜AAA 共回答了20个问题 | 采纳率90%
一个是RT-pcr,reverse transcription pcr的简写
一个是real-time,一般不会简化为“rt-pcr”,又称实时定量pcr,Q-pcr,应该就是你说得荧光定量
而你要测mRNA的量,就是先反转录成cDNA,再作定量pcr,就是前两者的合,常称为qRT-PCR
有很多real-time的试剂盒,你可以网上看下说明书
反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?
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cDNA不是只有一条链吗,是不是只需要一条引物?求详解.
不给钱1年前2
鼎玉铉 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%
不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.
有用过博陵科为的两步法荧光定量反转录PCR试剂盒 的吗?
cqk7ek2mtc1年前1
长剑归来 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
博凌科为的两步法荧光定量反转录试剂盒由 两个试剂盒组合而成.一 个是反转录第一链合成 试剂盒 TUREscript 1st Strand cDNASynthesis Kit(PC18),一个是 2 x SYBR Green qPCR Mix(PC33).首先由反转录第一链试剂盒合成 cDNA,然后以 cDNA 做模板用 2 x SYBR Green qPCR Mix 进行荧光定量 PCR 扩增.
我想问什么是反转录PCR?
黄二1年前1
海豚的伤悲 共回答了18个问题 | 采纳率83.3%
反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平
巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增.由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从而降低了扩增多个靶位点的可能性(因为与两套引物都互补的引物很少)增加了检测的敏感性;又有两对PCR引物与检测模板的配对,增加了检测的可靠性.
所以反转录-巢式PCR就是以cDNA为模板进行的巢式PCR,它和简单的反转录PCR一样是用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平,但是特异性更高,可靠性更强.
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