工程菌是从自然界分离出来的,可作为基因工程中的受体细胞

（1）基因工程有三种工具：限制酶、DNA连接酶、运载体．运载体不是工具酶．因此重组质粒通常是在体外完成，必须用到的工具酶为限制酶和DNA连接酶．
（2）将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是 导入了普通质粒A或重组质粒，反之则没有．使用这种方法鉴别的原因是普通质粒和重组质粒均含有抗氨苄青霉素基因，其表达产物能分解青霉素．
（3）若把通过鉴定证明导入普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养，由于普通质粒上有抗四环素基因，重组质粒上的该基因由于目的基因的插入而被破坏，因此培养基中的细菌有的能生长，有的不能生长．
（4）导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是合成人的生长激素．
（5）基因工程的原理是基因重组．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶
（2）普通质粒和重组质粒均含有抗氨苄青霉素基因，其表达产物能分解青霉素
（3）有的能生长，有的不能生长 普通质粒上有抗四环素基因，重组质粒上的该基因由于目的基因的插入而被破坏
（4）合成人的生长激素
（5）基因重组

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题结合“工程菌”的制造过程，考查基因工程的应用，要求考生识记基因工程的基本操作步骤，能分析题图，明确目的基因插入质粒后会破坏质粒的四环素抗性基因，再对选项作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．

（1）利用逆转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子；根据蛋白质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成．
（2）PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件．
（3）目的基因和运载体结合，形成基因表达载体．
（4）在利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca²⁺处理，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子．
故答案为：
（1）逆转录； DNA聚合酶； 氨基酸； 脱氧核苷酸；
（2）引物； 模板（A基因）；
（3）基因表达载体；
（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子；

点评：
本题考点： 真题集萃；基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查了基因工程过程和应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．

（1）“pBR322”是一种质粒，其化学本质是DNA；在自然情况下，质粒可通过自我复制过程进行扩增．
（2）由图可知，过程①表示从生物体细胞中分离获得目的基因；过程②中DNA连接酶的作用是将目的基因与运载体结合形成重组DNA．过程③是将重组质粒导入受体细胞．
（3）图1中A、B培养基的目的是筛选含有重组质粒的大肠杆菌，属于选择培养基．在构建基因表达载体时，四环素抗性基因已经被破坏，但氨苄青霉素抗性基因完好，因此导入重组质粒的大肠杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素的培养基上生存，所以所需大肠杆菌的菌落位于B上．
（4）遗传信息表达过程为：．
故答案为：
（1）DNA自我复制
（2）从生物体细胞中分离将目的基因与运载体结合形成重组DNA将重组质粒导入受体细胞
（3）选择培养基B导入目的基因后四环素抗性基因被破坏，重组质粒中应该只含氨苄青霉素抗性基因，所以能在B存活但不能在A存活的说明含有重组质粒（合理即可）
（4）

点评：
本题考点： 基因工程的应用．

考点点评： 本题结合培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具和基本步骤，能准确判断图中各过程的名称；能提取图中有效信息答题解答第（3）题．

A、目的基因是B一珠蛋白基因，可以用反转录技术获得，即从小鼠特定细胞中提取mRNA作为模板，逆转录形成目的基因，A正确；
B、用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体，其中四环素作用标记基因，以便筛选重组质粒，B正确；
C、质粒中含有四环素抗性基因作为标记基因，则选用的大肠杆菌应不含有四环素抗性基因，C错误；
D、用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体，其中四环素作用标记基因，导入重组质粒的大肠杆菌能抗四环素，所以最后要用含有四环素的培养基筛选导人重组质粒的工程菌，D正确．
故选：C．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，属于中档题．

大肠杆菌能大量生产治疗糖尿病的药物胰岛素，运用的是转基因技术，把人胰岛素基因注入大肠杆菌体内，可以通过大肠杆菌生产胰岛素，之所以选择把细菌作为基因工程的受体细胞，原因有两个：首先细菌繁殖较快，基因简单，其次能够在较短时间内通过细菌的大量繁殖来获得所需要的产品．此方法属于转基因技术．
故选：A

点评：
本题考点： 转基因技术的应用．

考点点评： 掌握现代生物技术的范围和转基因技术的应用是解答此类题目的关键．

乙肝疫苗是指减毒或灭毒的乙肝病毒，利用基因工程生产乙肝疫苗时，应向酵母菌导入目的基因，即乙肝病毒的表面抗原的基因．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查工程菌的相关知识，意在考查学生从材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．

A、目的基因是B一珠蛋白基因，可以用反转录技术获得，即从小鼠特定细胞中提取mRNA作为模板，逆转录形成目的基因，A正确；
B、用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体，其中四环素作用标记基因，以便筛选重组质粒，B正确；
C、质粒中含有四环素抗性基因作为标记基因，则选用的大肠杆菌应不含有四环素抗性基因，C错误；
D、用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体，其中四环素作用标记基因，导入重组质粒的大肠杆菌能抗四环素，所以最后要用含有四环素的培养基筛选导人重组质粒的工程菌，D正确．
故选：C．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，属于中档题．

A、将基因表达载体导入细菌B之前，一般要先用Ca²⁺处理细胞，故A错误；
B、质粒A中含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，而重组质粒中含抗氨苄青霉素基因，则在含有氨苄青霉素的培养基能培养导入质粒A或重组质粒的细菌，而其他的则不能生长，故B错误；
C、质粒A含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，所以完成导入的细菌在含有四环素的培养基上生长，故C正确；
D、根据题干信息分析，目的基因（人的生长激素基因）成功表达的标志是受体细胞能产生出人的生长激素，故D错误．
故选：C．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，解题的关键是理解标记基因的功能．

利用生物（如动物）做“生产车间”，生产人类所需的某些物质，这就是生物反应器．美国科学家培育出了能产生治疗呼吸道疾病、血友病的奶水的羊，荷兰科学家培育出了能产生含人乳铁蛋白乳汁的牛，我国科学家培育出了能产生治疗血友病乳汁的羊．相信不远的将来，会有产生抗癌、抗艾滋病乳汁的牛或羊．
而最为理想的生物反应器是乳房生物反应器．转基因技术指的是：通过人工方式将外源基因整合到生物体基因组内，并使该转基因生物能稳定地将此基因遗传给后代的技术． 把从人身上克隆的某种干扰素基因导入大肠杆菌，可以通过大肠杆菌生产干扰素，之所以选择把细菌作为基因工程的受体细胞，原因有两个：首先细菌繁殖较快，基因简单，其次能够在较短时间内通过细菌的大量繁殖来获得所需要的产品．
故选：B．

点评：
本题考点： 转基因技术的应用．

考点点评： 解答此类题目的关键是熟知生物技术的应用和实例．

（1）PCR扩增技术是在模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物存在下，依赖于热稳定DNA聚合酶（Taq酶）促合成反应．
（2）将目的基因与质粒结合形成重组质粒的过程中，需要同一种限制酶切割目的基因和质粒，使他们露出相同的末端，在用DNA连接酶连接形成重组质粒．
（3）通过抗性基因可以检测目的基因是否导入．据图可知，重组质粒时抗氨苄青霉素基因被破坏，而抗四环素基因没有被破坏．因此可在培养细菌B的培养基中加入四环素，若在培养基上观察到大量的细菌B的菌落，表明目的基因已成功导入细菌B．所用的培养基属于筛选用的．
（4）通过显微镜直接统计菌落的数目，通过统计菌落的数目来推测活菌数目比实际的数目要少．当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落，不是很精确，所以要设计对照实验来确定统计数目的准确．
故答案为：
（1）耐高温的DNA聚合酶
（2）限制性核酸内切酶、DNA连接酶
（3）四环素 选择
（4）显微镜直接计数　　少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 对照组

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 做本题时要区分DNA连接酶和DNA聚合酶的生理功能，要正确分析抗性基因的生理作用．

A、“工程菌”是指利用基因工程技术将外源基因导入受体细胞的过程，所以与基因工程有关，A错误；
B、基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，所以与基因工程有关，B错误；
C、蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程，所以与基因工程有关，C错误；
D、杂交育种是利用基因重组的原理将具有不同优良性状的个体杂交，从子代杂合体中逐代自交选出能稳定遗传的符合生产要求的个体，属于常规育种，与基因工程无关，D正确．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术；杂交育种；蛋白质工程．

考点点评： 本题考查基因工程原理、技术及运用的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．

大肠杆菌能大量生产治疗糖尿病的药物胰岛素，运用的是转基因技术，把人胰岛素基因注入大肠杆菌体内，可以通过大肠杆菌生产胰岛素，之所以选择把细菌作为基因工程的受体细胞，原因有两个：首先细菌繁殖较快，基因简单，其次能够在较短时间内通过细菌的大量繁殖来获得所需要的产品．
故选：D．

点评：
本题考点： 转基因技术的应用．

考点点评： 掌握现代生物技术的范围和转基因技术的应用是解答此类题目的关键．

图中可以看出，由于生长激素基因基因插入质粒后，破坏了四环素抗性基因，导致工程菌不能在含四环素的培育基中生长繁殖；而抗氨苄青霉素基因没有被破坏，所以能在含氨苄青霉素的培养基上生长繁殖，但在含四环素的培育基不能生长繁殖．
故选：C．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力．

图中可以看出，由于生长激素基因基因插入质粒后，破坏了四环素抗性基因，导致工程菌不能在含四环素的培育基中生长繁殖；而抗氨苄青霉素基因没有被破坏，所以能在含氨苄青霉素的培养基上生长繁殖，但在含四环素的培育基不能生长繁殖．
故选：C．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力．