sevage法除蛋白需要的试剂仪器和步骤

qqw1232022-10-04 11:39:541条回答

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lch528 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%: Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点,将提取液与 Sevage试剂[氯仿：正丁醇=5：1（V/V）]5：1 混合,振荡,离心,变性后的蛋白质介于提取液与 Sevage 试剂交界处.此法的优点是条件温和,不会引起多糖的变性.
仪器主要就是离心管、离心机之类的了,试剂就氯仿、正丁醇.; 1年前

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正丁醇、氯仿混合溶液（正丁醇：氯仿=1：4或1：5）和样物提取液混合并且振荡,不需要加热
利用离心机离心,直到离液面交界处无白色混悬,也就是蛋白质介于提取液与试剂交界处.
上中下依次分为水层、蛋白层、有机层.

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盐浓度主要影响蛋白质的沉淀,对多糖的沉淀影响不大.
我觉得是你的醇浓度不够,所以没有形成多糖沉淀.用三倍95％的乙醇,这样形成的溶液纯度只有71％,有点低了.最好用无水乙醇去混合.而且要注意原始溶液浓度不能太低.

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