甲基化试剂有哪些?甲基化时都是什么反应条件?

酰化试剂 羧酸、羧酸酯、酸酐、酰氯
甲基化试剂 碘代甲烷、硫酸二甲酯、碳酸二甲酯

选B,未发生甲基化的胞嘧啶会被重亚硫酸盐托氨基变为尿嘧啶,而DNA分子不允许存在U,复制过程中会把U置换为T,因此为发生甲基化的C经处理后会变为T,故选B.

DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一,大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达.因此目前研究的热点主要是集中在DNA甲基化与EPIGENOMICS之间的关系,可以第一时间得到表观组学上的改变与DNA甲基化之间的关系,从而在一些GENE调控网络和信号通路上发现新的东西

细菌细胞内有限制性内切酶,但是它们自己的基因组上也有限制性内切酶的切割位点.为了不让自己的基因组被限制性内切酶降解,细胞便将自己的这些序列甲基化,即在某些碱基上甲基化,这样限制性内切酶就不能识别了.
同理,噬菌体的序列有甲基化,细菌内的限制性内切酶也不能识别.
（在做分子克隆实验的时候,尤其要注意这一点.）
（糖基化在细菌中少见,主要是甲基化）

D
假尿嘧啶核苷是碱基N1与戊糖C5连接的,而不是与C1连接的~

如果你把你的目标区告诉我,（从哪到哪）.我可以给你设计引物.或者你可以到 http://www.***.org/methprimer/index1.html
可以免费设计bisulfate conversion 之后的引物.

是氢氧化钠里的水份太高吧,反应后产品溶于水,等于产品糊化了.这么高的取代度我觉得用乙醇不合适.
别太相信文献,.很多东西根据文献上来做,基本上做不出来,你也知道,论文发表的目的,只是为了发表论文.而且很多不是真的,真的东西是不会写上去的.
论文参考的价值在于他研究的理论方向,具体内容最好不要参考

去阅微基因的官网查询,或者直接打电话打他们公司直接询问.

就是把一个集团或H变成甲基

你用O18标记的甲醇,然后做这个反应,看产物里有没有O18就知道了.

可能你说的是硫酸二甲酯.
硫酸二甲酯属于诱变剂,能与DNA中碱基发生化学变化,从而引起DNA复制时碱基配对的转换或颠换.
对DNA中鸟嘌呤的咪唑环N7位甲基化,修饰后甲基化G与核糖之间的糖苷键变得不稳定,在碱性条件下与哌啶作用,磷酸二酯键断裂,产生两个DNA片段.[8]该过程可用于测定碱基顺序,打断DNA链,等等.
此外,用硫酸二甲酯和酸处理DNA后,鸟嘌呤的N7与腺嘌呤的N3位都发生甲基化,处理后得到5’-DNA片段与核苷酸5’-羟基相连,3’-DNA片段与核苷酸3’-羟基相连的产物.这可看作对嘌呤碱基的特异反应.

在特异性表达某些基因的组织中,活化基因附近mCpG较非表达组织中明显降低至30％左右.同时,有Hl的压缩状态核小体中含有哺乳动物细胞核DNA中80％的甲基化CpG.因此认为基因表达与CG甲基化程度呈负相关.
C的甲基化可能加强阻遏蛋白或降低激活蛋白与DNA的结合,或因mCpG的甲基伸入DNA双螺旋结构的大沟,影响DNA与结合蛋白的相互作用；
也可能由于C的甲基化使DNA双螺旋大沟中过分拥挤从而改变了DNA不同构象间的平衡,更多地由B-DNA变为其他(如Z-DNA)构象以扩展大沟内的空间,影响了DNA结合蛋白对相应专一序列的结合.
由于Z-DNA结构收缩,螺旋加深,使许多蛋白质因子赖以结合的元件收缩入大沟而不利于基因转录的起始.
用序列相同但甲基化水平不同的DNA为材料进行实验,发现甲基的引入不利于模板与RNA聚合酶的结合,降低了其体外转录活性.
DNA甲基化对转录的抑制主要决定于甲基化CpG的密度和启动子强度两个因素：
启动子附近甲基化CpG的密度是阻遏作用的主要决定因素.
弱的启动子可被散布的甲基化CpG完全阻遏,若外加增强子使启动子强化,则在同样程度的甲基化影响下转录可以恢复；
如果甲基化CpG位点进一步增加,转录就会完全停止.
阻遏的严重程度与甲基化CpG区对MeCP1（methylCpG-bindingprotein1）的亲和力成正比.
可见在转录的充分激活和完全阻遏之间的调节开关决定于甲基化CpG密度和启动子强度的平衡.

硫酸二甲酯结构可以看作是磺酸甲酯,磺酸基也是一个比较好的离去基团,所以可以发生取代,而作为甲基化试剂

这个我正在做,对dna要求的纯度是比较高,尽量用试剂盒提取吧,有蛋白的话,紫外有吸收峰,影响结果,而且容易堵柱子啊.毕竟进样的时候都是几微克的东西,你稍微有点蛋白或者其他物质,就有可能影响5-甲基胞嘧啶的峰,结果就不准确了.

Second hydroxyethyl methacrylate ammonium for raw materials,DMF as the solvent,dimethyl sulfate-reagent,prepared by the alkylation of a new two methyl bromide quaternary ammonium dihydroxyethylamino ,The structure of the HNMR,IR and elements analysis.
Key words:dimethyl sulfate,2-hydroxyethyl ammonium,synthesis,analysis