逆转录PCR是一步完成的吗?还是先逆转录成cDNA,再加入Taq聚合酶进行PCR

xiaobendan0062022-10-04 11:39:542条回答

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8223035 共回答了11个问题 | 采纳率90.9%: 由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR.原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互补DNA.这里有个动画,不妨看看http://translate.google.com/translate?hl=zh-CN&sl=en&u=http://www.bio.davidson.edu/courses/immunology/Flash/RT_PCR.html&ei=hCOHTYrjIo-IvgPpw9niCA&sa=X&oi=translate&ct=result&resnum=1&ved=0CCIQ7gEwAA&prev=/search%3Fq%3DRT-PCR%26hl%3Dzh-CN%26biw%3D696%26bih%3D668%26prmd%3Divns; 1年前

针对mRNA上的某个基因设计逆转录PCR的引物,逆转录时得到的cDNA只是这个基因的cDNA吗? 针对mRNA上的某个基因设计逆转录PCR的引物,逆转录时得到的cDNA只是这个基因的cDNA吗? 如果不是,那还会包括它下游的所有基因的cDNA,还是包括它所在的操纵子的其他基因的cDNA? 一天真水1年前3: 靓街头帅哥共回答了20个问题 | 采纳率95%

只含有引物往前的一段序列
一条mRNA上只有一个基因所以不存在什么下游所有基因而且反转录是从mRNA的3‘到5’走的.

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逆转录PCR设计引物要靠近3‘端? 魏蜀吴01年前2: rrrq2 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%

因为PCR技术得沿着引物向5‘段延伸

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细菌提DNA后PCR和提RNA后逆转录PCR的区别 细菌提DNA后PCR和提RNA后逆转录PCR的区别 已知细菌无内含子,假设我需要PCR一个细菌的一个基因片段,直接提细菌DNA然后PCR和提细菌总RNA后逆转录成cDNA在PRC有什么区别?引物可以通用吗? qnro1年前1: 董若水共回答了23个问题 | 采纳率91.3%

原核生物许多基因串联,称操纵子；转录后剪切成单个基因；
逆转录成cDNA会含许多具有目的基因的不等长序列,造成污染；需要通过电泳筛选目的序列,然后PCR

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