银染中硼酸的作用聚丙烯凝胶电泳结束后,银染显色.经过固定液固定,0.1 % AgNO3染色后,用含甲醛的显色液显色.显色

潘安22022-10-04 11:39:541条回答

银染中硼酸的作用
聚丙烯凝胶电泳结束后,银染显色.经过固定液固定,0.1 % AgNO3染色后,用含甲醛的显色液显色.显色液是用NaOH和硼酸配的.请教NaOH和硼酸的作用是什么?固定液中的冰醋酸和酒精的作用又是什么?

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loyzve 共回答了26个问题 | 采纳率92.3%
NaOH和硼酸是缓冲液,也可以用碳酸钠.
冰醋酸和酒精用来固定蛋白,避免扩散.
1年前

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yyh762311年前3
独舞之叶 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后,回收的差异条带是单链吗?里面是一条单链,还是是双链解开了,两条链都有.变性只是让双链解开,以去除二级结构的影响 .
在实验室做聚丙烯酰胺凝胶电泳,用银染溶液,使胶上的DNA显示出来后,会得到一条带.这条带该怎么读?
在实验室做聚丙烯酰胺凝胶电泳,用银染溶液,使胶上的DNA显示出来后,会得到一条带.这条带该怎么读?
看见他们都是,先读分子量,再读什么0、1、10、01、11什么的.这些数字,都是怎么看出来的,有什么用啊?
依七1年前1
huanganwei88 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%
这统计条带,按marker上不同分子量大小区分条带 ,每条条带在不同样品有计为1,没有计做0,.然后用软件聚类分析.
聚丙烯凝胶银染之后不显色胶一点反应都没有,完全透明的!1 取出电泳后的凝胶,放入染色盒中用蒸馏水洗涤两次.2 将蒸馏水倒
聚丙烯凝胶银染之后不显色
胶一点反应都没有,完全透明的!
1 取出电泳后的凝胶,放入染色盒中用蒸馏水洗涤两次.
2 将蒸馏水倒出,加入25%的乙醇变性3mins.
3 回收乙醇,用蒸馏水洗涤凝胶一次,加入1%的硝酸溶液固定约3mins,待溴酚蓝的蓝色大部分褪尽,停止固定.
4 回收硝酸溶液,用蒸馏水洗涤凝胶一次,加入0.2%硝酸银染色约30mins.
.5 回收硝酸银溶液,用蒸馏水洗涤凝胶两次,加入含甲醛(0.2%)3%的碳酸钠溶液显色.待凝胶上显出清晰的DNA带型时,适时倒掉碳酸钠溶液,加入10%的乙酸终止显色反应.
6 将乙酸倒掉,用蒸馏水清洗两次,放入凝胶成像系统的暗箱中,扫描成像.
不知道是不是碳酸钠过期导致的?
wufeng0820111年前3
cjn882288 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
基本可以确定是你样品或试剂出问题了,不然不会一点颜色都没有,就算条带不清晰,至少加样槽里会有颜色出现.
提以下两个建议:
一:样品DNA浓度太低,或者电泳前就已经分解掉了.检查办法是,电泳前,用分光光度计测一下DNA含量,看是否符合电泳标准;
二:由于某种操作不当,加样时好好的,跑时DNA变性或分解成小片段,全跑胶外头了.我曾经有一次缓冲液没配好,电泳时温度超高,夹子夹的又紧,玻璃板都炸了.因此你还是要检查一下你电泳时有没有问题?尤其是缓冲液
最后郑重建议你检查一下所用的所有试剂,最简单办法就是统统换新的,一个一个找,麻烦的很.
另外,你要想确定是不是碳酸纳过期,可以把这个胶放EB里染色,看看有没条带~
聚丙烯酰胺凝胶电泳染色银染染什么的
黑白ff1年前1
lansono 共回答了20个问题 | 采纳率95%
可以染出DNA的条带出来,从而判断其序列