跑完双向电泳,找出蛋白差异点之后,接下去可以做什么?我做的是水稻低磷胁迫方面的,已提取RNA

aj77582582022-10-04 11:39:541条回答

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alicedavid 共回答了28个问题 | 采纳率92.9%: 抠出那些差异点,去打质谱,看看那些点是什么蛋白.
然后再克隆哪些基因,做lose function和gain function的实验,确定这些基因的作用.; 1年前

双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题 双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题 主要有2个问题： 第一：跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,不知道是蛋白没有分开还是怎么的.看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了,所以加了DNAse I和RNase A在最开始的蛋白里面,不过效果还是不好,依然有很多条带. 第二：把第一条strip放在成品胶（SDS-PAGE的那个胶）顶部,用琼脂（agarose）凝固了2个小时,然后再跑SDS-PAGE.跑前这块成品胶都好好的,但是跑完胶（2个小时）以后,成品胶就连同上面的strip一起被挤出了原来的槽子.有朋友说可能是跑胶的时候温度太高,让胶胀大了.我就把胶放在4度的冷冻室里面跑,但是成品胶还是被挤出来了,这样会影响从strip里面转到成品胶的蛋白量. 哭不过三1年前1: SarahPatty 共回答了21个问题 | 采纳率100%

1,提取蛋白的时候要充分超声粉碎,然后高速离心.吸取上清的时候不要触到沉淀.污染不一定是RNA和DNA,还有可能是胶里面有杂质.
2.遇热膨胀过度,你可以在电泳槽里面安放冰槽,电泳液预先降温,同时降低电泳时的电流.还有配琼脂也要用缓冲液,而不是水,不然不导电.接触不好也会引起条带变形

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双向电泳根据蛋白质分子的-?-和-?-特性实现分离 一只小牛1年前3: 驿路雨使共回答了15个问题 | 采纳率80%

等电点和分子量大小

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蛋白质样品纯度排序：PAGE一条带,SDS-PAGE一条带,双向电泳一个点,分子大小均一为什么? hqjokk1年前1: 绿色软件34 共回答了13个问题 | 采纳率92.3%

你得先弄懂,3个方法的用途和原理.
PAGE：是非变性胶,电泳时蛋白保持其自身空间结构,用于特定蛋白空间结构的分析,同一条带中的蛋白应该具有类似的空间结构和大小
SDS-PAGE：是变性胶,SDS的加入破坏了蛋白的空间结构,使得不同蛋白间只有分子量不同的差别,因此电泳后,同一条带的蛋白应该是具有相同/接近的分子量
双向电泳（2D)：可以根据蛋白的等电点和分子量进行2维电泳,一个点基本就是一个蛋白
因此,你的样品纯度排序：双向电泳一个点>PAGE一条带>SDS-PAGE一条带

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蛋白质双向电泳（2D SDS-PAGE)是根据蛋白质分子量大小和------的不同来分离的? dklsgnmkaafnkl1年前2: xiangfeipp 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%

蛋白质等电点

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进行双向电泳实验,如何提取大鼠骨骼肌蛋白样品? 进行双向电泳实验,如何提取大鼠骨骼肌蛋白样品? 我要进行双向电泳实验,骨骼肌组织已经取下来了,接下来要进行蛋白提取了,心里没底,最好给我一下具体步骤,和一些溶液的配方及配制的量, 广广xiang1年前1: 三亚饰品共回答了19个问题 | 采纳率94.7%

可以使用以下产品,上海生工有卖的
PL042 Extraction buffer VI: Urea ,Thiourea , NDSB201 powder, diluent: CHAPS

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蛋白质双向电泳的基本原理和主要用途.这是一道问答题, 出奔1年前1: qdwudalang 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

蛋白质2维电泳
1个方向是SDS-聚丙烯酰胺凝胶
主要是把蛋白质按照分子量分开
1个方向是等点聚焦
把蛋白质按照等电点的不同分开
这样就可以把不同的蛋白质尽可能的分开
有些蛋白分子量相近,但是等电点不同.而等电点相近的蛋白分子量不同.所以该方法可以把原来用一种方法无法分离的蛋白分开.接着可以做转膜.抗体识别（类似于western).或者切取斑点,做测序或MASS,鉴定蛋白.

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蛋白质双向电泳的基本原理及主要用途 weeklylotus1年前1: 完美行星共回答了25个问题 | 采纳率96%

蛋白质2维电泳
1个方向是SDS-聚丙烯酰胺凝胶
主要是把蛋白质按照分子量分开
1个方向是等点聚焦
把蛋白质按照等电点的不同分开
这样就可以把不同的蛋白质尽可能的分开
可以结合质谱对细胞进行蛋白质组的研究
例如我们研究癌细胞和癌旁细胞
利用这个方法就可以知道
两种细胞都有哪些蛋白质表达的不同

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