茚三酮法测定氨基酸时磷酸缓冲液的作用是什么?

阿星10082022-10-04 11:39:542条回答

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铠甲的心 共回答了15个问题 | 采纳率80%
没记错的话 反应需要在弱碱性条件下 缓冲液稳定PH
1年前
shlhren 共回答了24个问题 | 采纳率
调整PH值,防止氨基酸被OH-反应了,导致测定不出
1年前

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在酸性条件下茚三酮与20种氨基酸部能生成紫色物质.
在酸性条件下茚三酮与20种氨基酸部能生成紫色物质.
这样说正确吗?
可以说明一下原因吗
wangwendongwan1年前3
1思远0 共回答了14个问题 | 采纳率78.6%
氨基酸和茚三酮的水合物在弱酸性溶液中一起加热,引起氧化、脱氨反应.生成物呈蓝紫色,在570nm处有最大吸收;但脯氨酸和羟脯氨酸的生成物呈黄色,最大吸收波长是440nm.所以这种说法不对
氨基酸与茚三酮的显色原理?///
江深竹静1年前2
luckymao 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
氨基酸与茚三酮水合物在弱酸条件下共加热时,氨基酸被氧化脱氨、脱羧,而茚三酮水合物被还原,其还原物可与氨基酸加热分解产生的氨结合,再与另一分子茚三酮缩合成为蓝紫色化合物,称为罗曼紫(Ruhemann's purple).
茚三酮能否和蛋白质发生反应?我们知道茚三酮可以和氨基酸发生反应 反应原理是氨基酸前面的氨基或者某些氨基酸中是NH3+与茚
茚三酮能否和蛋白质发生反应?
我们知道茚三酮可以和氨基酸发生反应 反应原理是氨基酸前面的氨基或者某些氨基酸中是NH3+与茚三酮反应能出现红色或者紫色
那么茚三酮是否可以和蛋白质发生反应?蛋白质由氨基酸脱水缩合而成,每条肽链开始的氨基酸一般为甲硫氨酸 有氨基存在--
我想 是否只有肽链的前端与茚三酮反应了 也会变色?或者由于某些蛋白质的盘曲折叠导致氨基在蛋白质构型里面 而使茚三酮无法与肽链前端的氨基反应而变色?
如上情况是否发生--?
眼花烫破我的脸1年前2
dddd 共回答了15个问题 | 采纳率80%
你也提到盘曲折叠导致氨基不能参与反应.这是一点.
但更主要的是,仅有几个氨基,相对于整个反应体系来说,可以忽略不计,数量级相差太大.
反应之所以能显色,是因为氨基反应后影响茚三酮的一些环,导致光波经过这些环时产生色散.
就几个分子的量,在整个反应体系中,根本看不来.
所以不能做显色反应.
ph=5.4乙酸-乙酸钠缓冲液用茚三酮法测定氨基酸总量的时候先要配制乙酸-乙酸钠缓冲液,实验指导派介绍的是先称45.5克
ph=5.4乙酸-乙酸钠缓冲液
用茚三酮法测定氨基酸总量的时候先要配制乙酸-乙酸钠缓冲液,实验指导派介绍的是先称45.5克乙酸纳溶于100ml水中,加热溶解蒸发至60ml,冷却后加30ml乙酸,在用水定容于100ml容量瓶中.但我们在具体操作中却怎么也做不到,先是加热够冷却,但发现烧杯壁上附着厚厚一层药品,并且容量瓶里的溶液很快变成了糨糊,30ml乙酸和10ml的水根本冲不干净,误差太大.第二次干脆在还温着的时候就倒进容量瓶,但效果还是和第一次差不多.第三次是加热后趁热加乙酸进去,但还是那样.不知道别人做的时候有没有这种情况,是怎么解决的?``` >>>
胡乱取个名字1年前1
zxhyfx 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
你这个配方可能是错误的,有些方案是2M的,也就是16克多配成100ml.
在测定茶叶中氨基酸含量时(在PH8.04条件下与茚三酮共热),若以谷氨酸制作标准曲线进行样品分析,与茶氨酸相比,结果会有
在测定茶叶中氨基酸含量时(在PH8.04条件下与茚三酮共热),若以谷氨酸制作标准曲线进行样品分析,与茶氨酸相比,结果会有怎样的差异?
e7640c1年前2
vera301 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
以谷氨酸为标准物质检测出的结果要偏低,且相差幅度不大.同量的茶氨酸和谷氨酸在与茚三酮反应时,生成有色物质的量是不一样的.
为什么实验室都是用考马斯亮蓝测蛋白而不用茚三酮呢
baoxiangbao1年前1
melyan 共回答了15个问题 | 采纳率100%
考马斯亮蓝可以很好的与蛋白质结合,且结合牢固,检测方便.茚三酮是用来检测氨、一级胺、二级胺,尤其是氨基酸.所以也就是说考马斯亮蓝一般用来检测蛋白质,而茚三酮是用来检测氨基酸的.
用茚三酮检测氨基酸浓度一定要用缓冲溶液吗?
用茚三酮检测氨基酸浓度一定要用缓冲溶液吗?
我想测不同PH值之下的氨基酸浓度,
远处的风1年前1
zeroliujun 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
茚三酮对氨基酸的定量显色要求有一定的pH 环境.因为氨基酸本身在水中溶解度很大,所以正常情况下pH 值对氨基酸溶解量几乎没有影响.
下列说法正确的是 A.大部分糖类物质都符合C n (H 2 O) m 通式 B.有机物中是否含肽键可用茚三酮检验 C.氨
下列说法正确的是
A.大部分糖类物质都符合C n (H 2 O) m 通式
B.有机物中是否含肽键可用茚三酮检验
C.氨基酸中加双缩脲试剂会呈现紫玫瑰色
D.蛋白质的一级结构、二级结构都是依靠氢键实现的
半个人的痛苦1年前1
81997238 共回答了13个问题 | 采纳率92.3%
A


正确答案:A
A、正确;B、不正确,用茚三酮检测氨基酸;C、不正确,蛋白质和双缩脲试剂,呈紫色反应,用来检验蛋白质;D、蛋白质的一级结构就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序也是蛋白质最基本的结构,通过肽键连接起来,成为多肽链,故肽键是蛋白质结构中的主键。三级结构才有氢键作用。
茚三酮与氨基酸的反应机理
tyl00ii1年前1
gongzxing 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
在弱酸条件下(pH5-7),蛋白质或氨基酸与茚三酮共热,可生成蓝紫色缩合物.
此反应为一切蛋白质和α—氨基酸所共有(亚氨基酸如脯氨酸和羟脯氨酸产生黄色化合物).
含有氨基的其他化合物亦可发生此反应.
水合茚三酮与茚三酮有什么不同
zhenjieqeun1年前2
红杏飞出墙 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
茚三酮(ninhydrin)各种氨基酸和多肽和它在弱酸性溶液中加热,发生氨基酸氧化,脱氨,和脱羧反映,然后茚三酮与反映产物——氨和还原性茚三酮反映,最终生成蓝紫色化合物
还原性茚三酮就是连2个羟基的那个碳上其中一个羟基变成氢
茚三酮使氨基酸显色原理是什么?麻烦告诉我
ynkmtop1年前5
kk无处不芳草 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%
α氨基酸与茚三酮在弱酸性溶液中共热,反应后经失水脱羧生成氨基茚三酮,再与水合茚三酮反应生成紫红色,最终为蓝色物质.脯氨酸等仲胺氨基酸与茚三酮反应生成黄色物质.该反应可广泛用于各种氨基酸的定性或定量测定.
我用茚三酮法测蛋白的酶水解度,所用的酶为复合蛋白酶,条件参数为不同的酶/底物的比值,分别为1:1,1:2,1:3,1:4
我用茚三酮法测蛋白的酶水解度,所用的酶为复合蛋白酶,条件参数为不同的酶/底物的比值,分别为1:1,1:2,1:3,1:4,1:5,1:10,每个比例的水解反应试管中底物的总量都是一样的,浓度也一样,为1.25mg/ml,不同的只是酶的用量,可是最后在570nm下测出来的结果为:这6个管的吸光度基本一致,均在1.5左后.
这一现象的原因是什么呢?
是不是有这两种可能性:一种就是酶的活性太高,即使在酶/底物的比值为1:10的情况下,底物就已经被完全水解了,最后得到的游离氨基的量也就相同,故检测时表现的吸光度值也就一样;另一种就是,其实在酶解反应停止后,反应产物中的确存在不同浓度梯度的游离氨基,只不过由于氨基的浓度过高,已经无法在分光光度计上观测到颜色的变化.
心-甜1年前1
老油菜 共回答了21个问题 | 采纳率76.2%
1比1和1比10的结果不可能一样的我觉得是底物浓度太小了,所以1比1和1比10的结果没有太大区别,你看看提高底物用量或者减少溶液体积试试
氨基酸和茚三酮的显色反应 会有三种不同颜色的原因
氨基酸和茚三酮的显色反应 会有三种不同颜色的原因
显紫色 黄色 和棕色的氨基酸都有什么结构上的特点
chilly791年前2
daisylee2003 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
茚三酮反应分为两步,第一步是氨基酸被氧化形成 CO2、NH3 和醛,水合茚三酮被还原成还原型茚三酮;第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质.
大多数氨基酸反应形成蓝紫色产物,
谷氨酰胺和天冬酰胺与茚三酮反应则形成棕色产物.
而脯氨酸则与茚三酮反应则形成黄色产物
大多数氨基酸的α-氨基与茚三酮反应生成蓝紫色产物
而谷氨酰胺和天冬酰胺则因为另外含一个酰胺基可与茚三酮反应,生成棕色产物
最后脯氨酸则是因为脯氨酸与一般α-氨基酸不同,没有自由的α-氨基.,其α-氨基是亚氨基
茚三酮溶液与蛋白质反应为什么会变红?
茚三酮溶液与蛋白质反应为什么会变红?
一般按书上说,茚三酮溶液与蛋白质反应应为紫色,可为什么我的实验做出来是红色?还是比较鲜艳的那种红色?
哦来嘛1年前1
守侯温存 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
一切a-氨基酸生成蓝紫色物质,但亚氨基酸如脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应则生成黄色化合物,可能是里面含有亚氨基酸,两种色混合后变为红色,或是其他原因
氨基酸分离鉴定中显色剂为什么不能用茚三酮水溶液
cdcrw011年前2
里旮旯 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%
茚三酮根很多种氨基酸都显示紫色
没办法分离鉴定呀
求氨基酸标准曲线 茚三酮法
jiao241年前1
lovefkq 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
1 茚三酮配制:称0.6g茚三酮,加入15毫升正丙醇,溶解.再加入30毫升正丁醇,60毫升乙二醇,最后加入PH5.4的乙醇-乙酸钠缓冲液9毫升,混匀,4摄氏度棕色试剂瓶保存,可保存十天.
2 PH5.4的乙醇-乙酸钠缓冲液:54.4克乙酸钠加入100毫升无氨蒸馏水,加热至沸腾,使体积蒸发至60毫升左右.冷却,加入30毫升冰醋酸,用无氨蒸馏水定容至100毫升.
3 氨基酸标液:称80摄氏度烘干的亮氨酸46.8毫克,用10%异丙醇定容至100毫升,为1毫摩尔/升的标准氨基酸储备液,冰箱保存.从中取5毫升,蒸馏水定容至50毫升,为5微克/毫升氨基酸标准液.
4 氰化钠储备液:称取490毫克,溶于一升无氨蒸馏水,为0.01摩尔/升.
5 10%乙酸
6乙酸-氰酸盐缓冲液:0.01摩尔/升氰化钠20毫升,用乙醇-乙酸钠缓冲液定容至一升.
7标线
管号 1 2 3 4 5 6
氨基液标液(毫升)0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
无氨蒸馏水(毫升)2 1.8 1.6 1.4 1.2 1
茚三酮(毫升) 3 3 3 3 3 3
乙酸-氰酸盐缓冲液 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
每管游离氨基酸含量(微克)
0 1 2 3 4 5
加完试剂后,沸水中加热15分钟,取后后迅速冷却,并不时摇动,呈现蓝紫色时,用60%乙醇定容至20毫升.摇匀,570纳米测定吸光度.
计算:
含量(微克/100克)=C*VT*100/(VS*W)
C:从标线上查得的含量 微克
VT:样品总体积 毫升
VS:测定时取用的样品体积 毫升
W:样品鲜重 克
氨基酸的 R f值请问谁有氨基酸的标准Rf值?分别是 赖氨酸 组氨酸 谷氨酸 亮氨酸 甘氨酸 以茚三酮丙酮液为展层液
蓝雾1年前2
laiqiming 共回答了13个问题 | 采纳率92.3%
Rf是氨基酸的迁移率,取决于氨基酸的极性和疏水性,极性越大迁移率越小,疏水性越大迁移率越大
DL-缬氨酸、L-氨基丙酸、L-精氨酸、DL-赖氨酸、L-亮氨酸,Rf值依次为0.68、0.48、0.28、0.19和0.78.
茚三酮对什么化合物显色?
after261年前1
吹散碧云 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%
对氨基酸显色.
茚三酮反应(Kaiser鉴定)也可用来在固相接肽时检验脱保护基是否已经完成,鉴定和比色法分离氨基酸以及鉴定铵离子(呈紫色).
  茚三酮与氨基酸反应生成蓝紫色化合物,但pro,羟-pro反应时呈黄色.
可作为氨基酸的定量分析方法,法医学上这个反应被用于鉴定指纹.
甲醛滴定法和茚三酮法测定氨基氮含量的特点和差异
drivesboss1年前2
湘西布衣 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%
1、化学分析法——甲醛滴定法
甲醛滴定法用于氨基氮的测定,可以测出样品中总氨基酸的含量,其原理是在中性或弱碱性水溶液中,氨基酸的α—氨基与醛类反应生Schiff碱:α—氨基酸与甲醛反应生成亚甲基亚氨基衍生物
2、分光光度法——茚三酮法
茚三酮是一种能使氨基酸生成在可见光区有吸收的衍生试剂.该方法的基本原理是经阳离子交换柱分离出的氨基酸与茚三酮混合,经加热反应后,一级胺与之生成蓝紫色化合物,二级胺与之生成黄色化合物.两种衍生物使用双通道紫外检测器同步检测,检测波长分别为570nm 和436nm.
2%茚三酮溶液配制的方法是用水还是什么溶?
鱼老二1年前1
satanone 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%
将明胶准确称量50mg,20mL水40℃溶解,用蒸馏水稀释到总重量为50mL,取1mL样品溶液置于试管中,加入2mL茚三酮溶液,轻轻地摇动试管,盖紧试管,置沸水浴加热20分钟.冷却,加入5mL稀释液(乙醇:水=1:1).以空白溶液为对照,在570nm波长处测定吸光度.
茚三酮是否可用于氨基酸和蛋白质的定性鉴定?
茚三酮是否可用于氨基酸和蛋白质的定性鉴定?
定性鉴定主要指什么?麻烦说详细一点,说原因.
yanghaot91年前3
wangdongshabi 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
可以吧.茚三酮与氨基酸显色主要是由于氨基和羧基,而蛋白质只有末端有.
我觉得定性鉴定就相当于有和无的判断.具体也不是很了解啦……
0.5%茚三酮丙酮溶液 如何配置
macy5201年前1
四海一0 共回答了10个问题 | 采纳率90%
取茚三酮0.5g,加丙酮使溶解成100ml,即得.
用茚三酮法做氨基酸标准曲线时,茚三酮的浓度最好用多少的?
大临祥瑞1年前2
lsgwr 共回答了24个问题 | 采纳率91.7%
最好是0.5%的
水合和还原的茚三酮的区别
wanyawan1年前1
381986665 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
没什么区别啊,都是两个羟基联在C原子上,都有还原性的哦
茚三酮显色请问蛋白类的什么物质与茚三酮反应呈黄色那多肽之类的物质呢?
爱在路途上1年前1
zhuzhupi 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
脯氨酸等仲胺氨基酸与茚三酮反应生成黄色物质.该反应可广泛用于各种氨基酸的定性或定量测定.
为什么茚三酮可以使不同的氨基酸显色
贫道也想要1年前1
展望未来l 共回答了24个问题 | 采纳率87.5%
茚三酮水合物和与氨基酸的氨基反应,然后脱羧.转变为一个亚胺,水解后,得到氨基茚二酮,再和一分子茚三酮水合物失水,即得到紫色的化合物(与脯氨酸、羟基脯氨酸生成黄色)
茚三酮显色剂如何配置?
eling叮1年前1
蜕变残刀 共回答了11个问题 | 采纳率90.9%
(9)氨基酸及肽类①茚三酮
检出物:氨基酸、胺与氨基糖类.
溶液:本品O.2g溶于乙醇l00ml中.
方法:喷后于110oC加热.
结果:呈红紫色斑点.
如何操作这个化学反应?取XX滤液3ml,加茚三酮试液1ml,加热数分钟,溶液显蓝紫色.请问,“加热”数分钟,应该放在酒精
如何操作这个化学反应?
取XX滤液3ml,加茚三酮试液1ml,加热数分钟,溶液显蓝紫色.
请问,“加热”数分钟,应该放在酒精灯上加热?还是放在水浴锅面上加热?
在药品检验室里,取XX滤液3ml,加茚三酮试液1ml,加热数分钟,溶液显蓝紫色。
“加热”数分钟,应该放在酒精灯上加热?还是放在水浴锅面上加热?
chxi5251年前1
顾雪诗 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%
都可以的,本人在实验室工作,加热一般都在马弗炉上;国标上没有注明温度和加热时间的,对加热都没有具体限制.
如何配制显色剂0.2%的茚三酮溶液
黑色栀子花1年前1
leslie0 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
1g茚三酮 溶于35ml 热水,加氯化亚锡0.04g(防腐),过滤后于暗处放置24h,定容至100ml后使用.
茚三酮能在不加热条件下与氨基酸或蛋白质反映成紫色吗?
wxyzyc1年前1
我说怎么了 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
不能,要在加热到60°—70°,并维持5分钟左右才能变色.(实际经验)