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普通光学显微镜的使用方法
使用方法：（一）显微镜的主要构造
普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分.
1.机械部分
（1）镜座：是显微镜的底座,用以支持整个镜体.
（2）镜柱：是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂.
（3）镜臂：一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位.
（4）镜筒：连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器.
（5）物镜转换器(旋转器)：接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3－4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通.
（6）镜台(载物台)：在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动.
（7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动.
①粗调节器(粗螺旋)：大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象.
②细调节器(细螺旋)：小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构.
2．照明部分
装在镜台下方,包括反光镜,集光器.
（1）反光镜：装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用.
（2）集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其作用是把光线集中到所要观察的标本上.
①聚光镜：由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱.
②光圈(虹彩光圈)：在聚光镜下方,由十几张金属薄片组成,其外侧伸出一柄,推动它可调节其开孔的大小,以调节光量.
3.光学部分
（1）目镜：装在镜筒的上端,通常备有2－3个,上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数,一般装的是10×的目镜.
（2）物镜：装在镜筒下端的旋转器上,一般有3－4个物镜,其中最短的刻有“10×”符号的为低倍镜,较长的刻有“40×”符号的为高倍镜,最长的刻有“100×”符号的为油镜,此外,在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线,以示区别.
在物镜上,还有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高,各物镜的镜口率如下表：
物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm)
10× 0.25 5.40
40× 0.65 0.39
100× 1.30 0.11
表中的工作距离是指显微镜处于工作状态(物象调节清楚)时物镜的下表面与盖玻片(盖玻片的厚度一般为0.17mm)上表面之间的距离,物镜的放大倍数愈大,它的工作距离愈小.
显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积,如物镜为10×,目镜为10×,其放大倍数就为10×10=100.
（二）显微镜的使用方法
1．低倍镜的使用方法
（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边1－2寸为宜,便于坐着操作.
（2）对光：用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心).打开光圈,上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止.
（3）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位调到通光孔的正中.
（4）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察.一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏.然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止.
如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的).如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台.
2．高倍镜的使用方法
（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察.
（2）转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作.
（3）调节焦距：转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)
如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本.
3．油镜的使用方法
（1）在使用油镜之前,必须先经低、高倍镜观察,然后将需进一步放大的部分移到视野的中心.
（2）将集光器上升到最高位置,光圈开到最大.
（3）转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜.
（4）用左眼观察目镜,并慢慢转动细调节器至物象清晰为止.
如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→油镜程序.在加油区内重找应按：低倍→油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头.
（5）油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去,然后再用干擦镜纸擦干净.
（三）显微镜使用的注意事项
1．持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方.
2．轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,以免碰翻落地.
3．保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,机械部分用布擦拭.
4．水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即擦净.
5．放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜.
6．要养成两眼同时睁开的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图.
7．不要随意取下目镜,以防止尘土落入物镜,也不要任意拆卸各种零件,以防损坏.
8．使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内,其步骤是：取下标本片,转动旋转器使镜头离开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内.最后填写使用登记表.(注：反光镜通常应垂直放,但有时因集光器没提至应有高度,镜台下降时会碰坏光圈,所以这里改为平放)
一、正确安装的问题
使用显微镜前,首先要把显微镜的目镜和物镜安装上去.目镜的安装较为简单,主要的问题在于物镜的安装,由于物镜镜头较贵重,万一安装时螺纹没合好,易摔到地上,造成镜头损坏,所以为了保险起见,强调操作者在安装物镜时要用左手食指和中指托住物镜,然后用右手将物镜装上去,这样即使没安装好,也不会摔到地上.
二、正确对光的问题
对光是使用显微镜时很重要的一步,有些操作者在对光时,随便转一个物镜对着通光孔,而不是按要求一定用低倍镜对光.转动反光镜时喜欢用一只手,往往将反光镜扳了下来.所一定要强调用低倍镜对光,当光线较强时用小光圈、平面镜,而光线较弱时则用大光圈、凹面镜,反光镜要用双手转动,当看到均匀光亮的圆形视野为止.光对好后不要再随便移动显微镜,以免光线不能准确地通过反光镜进入通光孔.
三、正确使用准焦螺旋的问题
使用准焦螺旋调节焦距,找到物象可以说是显微镜使用中最重要的一步,也是操作者感觉最为困难的一步.操作者在操作过程中极易出现以下错误：一是在高倍镜下直接调焦；二是不管镜筒上升或下降,眼睛始终在往目镜中看视野；三是不了解物距的临界值,物距调到2~3厘米时还在往上调,而且转动准焦螺旋的速度很快.前两种错误结果往往造成物镜镜头抵触到装片,损伤装片或镜头,而第三种错误则是操作者使用显微镜时最常见的一种现象.针对以上错误,操作者要注意,调节焦距一定要在低倍镜下调,先转动粗准焦螺旋,使镜筒慢慢下降,物镜靠近载玻片,但注意不要让物镜碰到载玻片,在这个过程中眼睛要从侧面看物镜,然后用左眼朝目镜内注视,并慢慢反向调节粗准焦螺旋,使镜筒徐徐上升,直当看到物像为止.一般显微镜的物距在1厘米左右,所以如果物距已远超过1厘米,但仍未看到物像,那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋速度过快,此时应调整装片位置,然后再重复上述步骤,当视野中出现模糊的物像时,就要换用细准焦螺旋调节,只有这样,才能缩小寻找范围,提高找到物像的速度.
四、物镜转换的问题
使用低倍镜后换用高倍镜,操作者往往喜欢用手指直接推转物镜,认为这样比较省力,但这样容易使物镜的光轴发生偏斜,原因是转换器的材料质地较软,精度较高,螺纹受力不均匀很容易松脱.一旦螺纹破坏,整个转换器就会报废.操作者应手握转换器的下层转动板转换物镜.
五、正确用眼的问题
用显微镜观察物体时,应双眼同时睁开,左眼往目镜内注视.但有不少操作者往往做不到这一点,喜欢用手捂住右眼或干脆闭上右眼,这是不符合实验的观察要求的,这种不良习惯会造成左眼疲劳,同时也不能做到边观察边画图.应该注意,左眼要尽量贴近目镜,右眼试图向视野内注视,如此反复训练,就会达到双目同时睁开观察的要求.或者也可以通过做以下练习：睁开双眼,用一张纸或手掌竖立在两眼之间,鼻子跟前,使左右眼不能互看对侧一边,然后有意识地先看左边,再看右边,如此3~5次,每天早晚各做一遍,不到一星期便可学会.

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