酶反应缓冲液怎么配Tris-HCl 100mmol/L；MgCl2 20mmol/；KCl 150mmol/L；DTT

与温度,压力,酶的特性,底物的特性有关系

影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等.其变化规律有以下特点：
①酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够,其它条件固定的条件下,反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时,酶促反应的速度与酶浓度成正比,如下图所示.
②底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时,反应速度随底物浓度增加而加快,反应速度与底物浓度近乎：成正比,在底物浓度较高时,底物浓度增加,反应速度也随之加快,但不显著；当底物浓度很大且达到一定限度时,反应速度就达到一个最大值,此时即使再增加底物浓度,反应也几乎不再改变.如下图所示.
③pH对酶促反应的影响：每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活性,超过这个范围酶就会失去活性.其特点如下图中曲线变化所示.在一定条件下,每一种酶在某一定PH时活力最大,这个pH称为这种酶的最适pH.
④温度对酶促反应的影响：酶促反应在一定温度范围内反应速度随温度的升高而加快；但当温度升高到一定限度时,酶促反应速度不仅不再加快反而随着温度的升高而下降.在一定条件下,每一种酶在某一定温度时活力最大,这个温度称为这种酶的最适温度

有两个方面需要注意：
1.底物 如楼上说的,必须要保证要足够的底物,使酶能完全发挥其催化功能.
2.时间的控制 根据酶促反应曲线可以看出,最开始曲线斜率比较大,然后趋于平缓（这种原因可能是生成的产物促进逆反应或是酶失活）,由此,如果测定的时间选择不当的话,测的速度也不是初速度,所以在测定的时间必须掌握在曲线斜率比较大的那段时间内.
当然,除这些之外,需给酶提供最适温度、最适PH,保证没有抑制剂存在.

加入氢氧化钠终止反应 ,还有2,4二硝基苯肼中含Hcl,会使酶失活

不是的.
酶的特征性常数是米氏常数,即酶的Km值,它的数值等于酶促反应达到其最大速度Vm一半时的底物浓度〔S〕.可用来表示酶和底物亲和力的大小.米氏常数与底物浓度和酶浓度无关,而受温度和pH值的影响,竞争性抑制剂米氏常数增大,最大反应速度不变；非竞争性抑制剂米氏常数不变,最大反应速度减小；反竞争性抑制剂米氏常数减小,最大反应速度减小.

根据酶反应定理：任何酶催化反应,最多进行到平衡状态为止,酶可影响平衡调节,但并不改变平衡点,酶的活性基只能催化一个特定反应,具有效能专一性和方向专一性.也就是说,如果我们能够将酶激活,那么就会有效地调节生命的...

看酶如何结合
1竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物；b.抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同；c.抑制剂浓度越大,则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小；d.动力学参数：Km值增大,Vm值不变.
2非竞争性抑制作用：抑制剂不能与游离酶结合,但可与ES复合物结合并阻止产物生成,使酶的催化活性降低
特点为：a.抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合；b.必须有底物存在,抑制剂才能对酶产生抑制作用；c.动力学参数
3反竞争性抑制剂只与酶-底物复合物结合,而不与游离酶结合的一种酶促反应抑制作用.这种抑制作用使得Vmax,Km都变小,但Vmax/Km比值不变.

不是的.
一级反应指的是反应速率与反应物浓度的一次方成正比的反应.
当酶浓度较小、蛋白质浓度很大时,如果再增大蛋白质浓度,反应速率也不会增大.这还与酶的浓度有关.

唾液淀粉酶可以分解淀粉,这句话中的“分解”一词用得不恰当,正确的说法是：淀粉在唾液淀粉酶的作用下可以水解.

酶反应前后不会变
酶本身有“钝化”现象,即催化一段时间后会分解,再由氨基酸重新合成酶
可以,比如蛋白酶就能水解蛋白类的酶
对,唾液淀粉酶是蛋白质化学本质的酶,可以被胃蛋白酶和肠肽酶依次水解

这个曲线的纵坐标一般是生成物量或者是酶的反映速率,横坐标可以是时间,温度,PH,酶的浓度或底物浓度,曲线就是纵坐标随横坐标的变化而变化所绘制出来的

酶是一种活性蛋白质.因此,一切对蛋白质活性有影响的因素都影响酶的活性.酶与底物作用的活性,受温度、pH值、酶液浓度、底物浓度、酶的激活剂或抑制剂等许多因素的影响.
(一) 温 度
大曲和麸曲的酶活性,在低温干燥的条件下,可以得到良好的保存.酶的催化作用,只有在一定温度下才能表现出来.酶的作用速度与温度的关系为：当酶蛋白没有因受热而变性时,温度每升高10℃,反应速度增加一倍左右[13].通常酶的作用速度随温度升高而加速,但温度升高到一定限度后,酶的活性就要钝化,直至完全失活.在酿酒生产中,酶作用的最适温度,应根据生产日的不同而选择.例如,在制备米曲汁糖液时,要求尽快糖化,其最适温度可控制在55—60℃；如用于白酒发酵,发酵期可长达4—5天乃至数月.酿酒中为保持酶活性作用的持久,必须坚持低温入池,低温发酵醇.
(二) pH值
pH值可改变底物的带电状态,从而影响底物分子与酶的结合.各种酶的特异性表明,酶的活动中心只能结合带某种电荷的离子,包括正电、负电或两性电荷.例如,胃蛋白酶只作用蛋白质的正电离子；胰蛋白酶只作用蛋白质的负电离子；而木瓜蛋白酶只作用蛋白质的两性离子,所以,木瓜蛋白酶最适pH值和它的等电点相同,pH值为5—6.酶分子具有两性电解质的性质,同时pH值也改变了酶分子的带电状态,特别是改变了酶活力中心上有关基团的电离状态.当在某一pH时,酶分子的活动中心,既存在一个带正电的基团,又存在一个带负电的基团,这时,酶与底物结合最容易；当pH偏高或偏低时,其活动中心只带有一种电荷,就会使酶与底物的结合能力降低.例如,蔗糖酶当处于等电点时,才具有酶活性,而在等电点的偏酸或偏碱的一侧,酶活性则降低甚至完全丧失.又如,糖化酶作用的最适pH值在4.5左右,这个最适pH值即为该酶的等电点,高于或低于这个pH值,对糖化酶的作用都不利.酒醅是在酸性环境下糖化发酵的,当酒醅的pH值在4.5以下,糖化酶则钝化失活,如继续变酸,则逐渐成为不能糖化发酵的死醅；反之,当用石灰水中和酸度至pH4.5以上,甚至呈强碱性时,糖化酶也将发生钝化,直至完全失去活性.通常酒醅在发酵过程中是逐步生酸的,所以掌握酒醅的入池酸度应在pH4.5以上.在正常发酵生酸时,要逐步调整到pH4.5.由于各种有机酸的氢离子解离度不同,通常化验酒醅所测定的酸度,是以毫克当量／10克醅(以乙酸计)表示,而实际酒醅中的酸度来源是以乳酸为主,包括醋酸等多种有机酸的混合物.更确切地说,化验酒醅的入池pH值,比化验酒醅的入池酸度更为有利.酒化酶是酒精发酵一类酶系列的总称,酵母在进行酒精发酵时,同样存在一个最适pH值的问题,酸度常常表现为对酵母的生长和发酵有极大的抑制作用.在所有的挥发或不挥发的有机酸中,越是高级脂肪酸,对酵母的毒性越大.生产实践证明：酒醅或发酵醪的酸度越大,酒精发酵越不旺盛.
(三) 酶的浓度和底物浓度
酶与底物浓度的关系,一般来说,当酶的浓度较小,底物浓度大大高于酶,则酶的浓度与反应速度成正比；当底物浓度一定时,酶的浓度继续增加到一定值以后,其反应速度并不加快.由于上述关系,过大的增加用曲量是不能收到预期效果的.实践证明,曲大、酵母大,会使发酵前火猛,升温高,生酸快,糖化和发酵作用过早停止；如用曲量太小,则发酵迟缓,酒醅不容易发透,材料干硬,对生产也是不利的.因此,制造白酒使用曲和酵母,必须根据质量,酌情使用,不要贪多.
白酒酿造有淀粉浓度大、升温高、酸度大、发酵周期长等特点,因此要求所采用的糖化酶及酒化酶等,应具有耐温、耐酸、耐酒精、酶活性作用持久等特性.一般固态或液态发酵的入池淀粉浓度为14—18％,求战清杂清茶清茬发酵淀粉浓度高达30％以上,因此,在发酵过程中要求糖化酶和酒化酶等具有一定的热稳定性.糖化酶和酒化酶的热稳定性越好,醇活性越不容易受破坏,发酵作用也进行得越彻底.酒醅发酵要产生一定的酸度,而且酸度随温度升高而增加.为了保持酶活性在酸性环境下不致钝化失活,要求糖化酶及酒化酶等具有较大的耐酸特性.一般黑曲霉的糖化酶,比黄曲霉的糖化酶耐酸性更好.所以,近几年来,多以黑曲霉代替黄曲霉作糖化曲酿酒.另外,白酒发酵有较长的发酵周期,因此,要求酶的作用性质具有持久性.对糖化酶要求有前糖化力和后糖化力,即要求有较高的总糖化力.对酒化酶,要求发酵均衡持久,这样,发酵才能有后劲.

双链,或者双链上的单链缺口（相当于粘末端连接）,
其中T4 DNA连接酶还可以混合连接 dsDNA 与 dsRNA
ssDNA/RNA 由于空间结构的原因不能用这些连接酶连接.

取决于酶蛋白本身和反应底物

如果把抑制剂除去,反应还是可以顺利进行,则证明是可逆抑制.如果不能进行了,就是不可逆抑制