非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中,指示前沿溴酚蓝为什么不一直是直线呢

chengdongya2022-10-04 11:39:542条回答

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中,指示前沿溴酚蓝为什么不一直是直线呢
1.我今年九月份跑胶很顺利,12月份我做了重复实验,试剂、配方都是和以前一样的,但现在跑胶开始进入分离胶时先是一段直线在跑,跑的很好,但跑到三分之二处一部分就开始转为向上弯曲的弧线,弯曲部分溴酚蓝颜色也没有了.
2.板会漏也是一个头痛的问题,开始灌胶都没问题,但过一会漏,有办法控制么?
第一个问题我觉得是胶凝的不均匀,我有试过在恒温箱,空调房里配胶板,但结果还是这样,还有可能是什么原因?
我用的是聚丙烯酰胺凝胶，测酯酶同工酶，制胶版不需要冷却这个过程的

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风中漂浮共回答了10个问题 | 采纳率100%: 1 我觉得也是不均匀,重新配一下,换下缓冲液
2 凝胶溶化后冷却一下在倒胶,胶太热容易吧板子烫变性,我也遇到过这种情况
我们测同工酶的时候要在装好仪器之后用胶封住板的缝隙; 1年前

Shelf_1987 共回答了5个问题 | 采纳率: 1.溴酚蓝跑不成直线也不会影响你目的蛋白的检测，这个不用担心。
2.漏胶这个问题有很多种原因，解决的话有个小方法，就是在放玻璃板之前在垫子上加点蔗糖，不要很多，但要均匀，很好用，我自从用这个方法后再没漏过，而且不会影响你的实验。...; 1年前

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)应该注意哪些问题 fzuswear1年前1: 开过尚盈盈共回答了20个问题 | 采纳率95%

1.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中,蛋白质的迁移率不仅和蛋白质的等电点有关,还和蛋白质的分子量以及分子形状有关,其中蛋白质的等电点是最重要
的影响因子,要根据蛋白质的等电点来选择对应的电泳缓冲系统；
2.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中,要注意电压过高引起发热而导致蛋白质变性,所以最好在电泳槽外面放置冰块以降低温度；
3.蛋白质的分子量较大,则电泳时间可以适当延长,以使目的蛋白质有足够的迁移率和其它的蛋白质分开,反之亦然;
4.变性样品的离子强度不能太高（I

1年前查看全部

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中,指示前沿溴酚蓝为什么不一直是直线呢

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