凝胶层析所用的层析柱为什么较其他层析方法所用的层析柱要长?

突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处.对于高分子物质有很好的分离效果.

1.装柱时要注意凝胶的流速,不宜过快,同时要保证凝胶能充分的沉淀且分布的比较均匀.
2.凝胶溶胀所用的溶液应与洗脱用的溶液相同,否则由于更换溶剂,凝胶体积会发生变化而影响分离效果.
3.样品的浓度和加样量的多少.是影响分离效果的重要因素.样品浓度应适当大,但大分子物质的浓度大时,溶液的黏度也随之变大,会影响分离效果,要兼顾浓度与黏度两方面.加样量和加样体积越少分离效果越好,加样量一般为柱床体积的1%-2%,制备用量一般为柱床体积的20%-30%.

你要脱盐的物质是什么呀,我讲下蛋白的吧.
1.用透析法,不过这种方法只能用于少量蛋白的脱盐.
2.可以用丙酮沉淀蛋白除盐,因为这种方法是使蛋白变性沉淀下来而除盐,这种方法可能会使部分蛋白丢失或失去活性.
3.盐析,用硫酸铵,氯化钠等中性盐等沉淀蛋白而除盐

1 柱填充要均一,决不能出现气泡.在装柱时候要缓慢倒入凝胶,并轻轻敲打柱身赶走气泡.
2 柱上表面要平,平衡柱时间要长一些,让凝胶充分沉积为均一的柱床.
3 上样体积要少,因此最好浓缩样品.
4 柱床上表面不能干燥,要有1~2cm流动相覆盖.

不能.因为此蛋白可能是同源二聚体.在纯化后解聚成为单体.也可能是因为凝胶内排阻一致而得到一个单一峰.
两条链的话跑个SDS-PAGE看看.要判断肽链组成要打MS的.

免疫亲和层析
吸附物质与特异性配基配对到色谱基质上,且与配基间具有可逆的相互作用.
离子交换层析
吸附物质通过表面净电荷的差异,分别与带正负电荷的层析色谱结合.
疏水相互作用层析
根据吸附物质表面疏水性的不同,利用与疏水层析介质疏表面可逆的相互作用来实现分离.
凝胶过滤层析
根据分子通过凝胶填料大小不同对其进行分离.
反向层析
类似于疏水相互作用层析