3,5-二硝基水杨酸比色法测还原糖的问题

DNS法的原理是：
在碱性条件下,还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热,3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,而还原糖则被氧化成糖酸及其它产物.
在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系,在540nm波长下测定棕红色物质的消光值,查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量.
DNS法利用的是还原糖与3,5-二硝基水杨酸发生氧化还原反应显色.所以,DNS法就会先测出还原糖的含量.

　DNS试剂配制
　　（1）以称取3,5-二硝基水杨酸（C7H4N2O7）6.3 g,氢氧化钠 21.0 g充分溶解于500 ml蒸馏水中（水先煮沸10分钟后冷却）
　　（2）加入酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O）182.0g,苯酚（在50℃水中融化） 5.0g,偏重亚硫酸钠（NaS2O5）5.0g,搅拌至全溶,定容至1000 ml.
　　（3）充分溶解后盛于棕色瓶中,放置10天后便可使用.平时盛一小瓶放在外面使用,其它储于冰箱中.此溶液每月配制一次.
　　注意：DNS一定要在配制结束后立即转移到小棕色瓶中,同时,使用过程中尽量减少与空气接触.

总糖包含:葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖,麦芽糖

3,5----二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈现比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量.浓硫酸苯酚法：糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定其吸光度,并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量.还原糖测定常用有菲林试剂法,班氏试剂发,DNS法（3,5----二硝基水杨酸）