求基因组dna电泳方法

PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?

PCR模板为基因组DNA,一引物两侧有30bp反向互补序列,如何调整PCR程序?
引物两侧指的是模板上是序列，不是引物本身。
模板退火时会不会形成发夹结构？我用两步法试了一下，还是P不出来。我现在只想把目的带P出来，有杂带可以接受。

可爱杨杨1年前3

kk看客2004 共回答了16个问题 | 采纳率100%

不在引物上,应该没啥问题.如果PCR产物特异性差,建议适当提高退火温度或者换用保真度高的酶.
如果非要认为模板特殊结构有影响的话,不妨试着调整一下PCR 缓冲液的成分,针对不同的结构有专用缓冲液.

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博凌科为细胞/组织基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型)提取基因组DNA的操作程序及特点是怎样的

zhenzy_kun1年前1

想化茧为蝶 共回答了20个问题 | 采纳率85%

博凌科为细胞/组织基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型)用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA.样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液,首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液.
试剂盒特点
◆ 不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂.
◆ 快速,简捷,组织样品操作整个过程可在1个小时内完成.
◆ 结果稳定,产量高（比离心柱型的产量高一倍以上）,纯度达1.1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建.

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在用离心柱从血液中提取基因组DNA最后一步WASH一般都是用乙醇,此步是否可用异丙醇代替?是否会对最后洗脱下的DNA产生

在用离心柱从血液中提取基因组DNA最后一步WASH一般都是用乙醇,此步是否可用异丙醇代替?是否会对最后洗脱下的DNA产生影响?哪个效果会好些?我只知道用乙醇可以溶解残存的盐成分,不知道用异丙醇代替会不会好些 ,希望高手回答,

lstar011年前2

ft31sohu 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

可以用异丙醇代替,两者效果差不多,用异丙醇时体积为1/3~1/2,而用乙醇一般为2倍,但是异丙醇较难挥发,通常先用异丙醇沉淀,然后再用乙醇洗涤.

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如何通过设计引物PCR,检测RNA提取中是否有基因组DNA污染

joy_5071年前3

pp1045 共回答了23个问题 | 采纳率87%

在两个外显子上设计上下游引物就可以

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如果没有静脉全血,提取基因组DNA可以用血清吗?

君羊20051年前1

涵与明 共回答了20个问题 | 采纳率100%

肯定不行,因为从血液中提取的DNA来源于白细胞,只有白细胞才有细胞核,所以血液成分中必须有白细胞,血清中不含血细胞,所以不行.

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为何在T4噬菌体中,各病毒粒子的基因组DNA序列不同?

99xyxy1年前1

3闲王 共回答了10个问题 | 采纳率100%

这是由于在基因组复制的时候,一开始是作为一个整体复制.但后来有发生首尾相接,形成多聚体.当噬菌体包装时,该多聚体被切割为等长的片段,但是切割位置不定.所以就造成cyclic permutation.也就是各个噬菌体的基因组不一样.

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请问不用蛋白酶K 能够提取基因组DNA

小雨鑫鑫1年前2

璐璐璐 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

可以,有人用胰蛋白酶也做出了同样的效果,还有某些实验室不用蛋白酶K,而单纯依靠酚抽提去除蛋白质,酚能使蛋白质变性,而且能将变性的蛋白质溶解在其中.氯仿也是一种有效的蛋白质变性剂,且能促进两相的分离.DNA上清液再加氯仿抽提后用乙醇沉淀分离纯化DNA.还有直接用煮沸法提取的!

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请从网上搜索大鼠3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH)的基因组DNA和mRNA序列

请从网上搜索大鼠3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH)的基因组DNA和mRNA序列
并设计一对跨外显子的RT-PCR引物（基因组DNA无扩增） 一窍不通,

aijiandany1年前1

荆州歌手 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%

兄弟,不好好听课,是不行滴~
今儿个俺粗略给你讲讲,细节你自己回去查.
咱用最简单的方法来做：
你上NCBI,查找gene--GAPDH,选择物种Rattus norvegicus （大鼠的种属名）,然后就有搜索结果了,你点进去,可以看到上面有DNA序列,下面有mRNA序列.
然后你就把两个序列拉下来,找到剪接的地方,前引物设计在上一个外显子处,后引物设计在下一个外显子处,设计条件符合RT要求就好.

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ISSR标记,总是扩增不出来,我做ISSR标记,下面是我提取基因组DNA的图片,我曾经用这些模板扩出来比较好的条带来,可

ISSR标记,总是扩增不出来,
我做ISSR标记,下面是我提取基因组DNA的图片,我曾经用这些模板扩出来比较好的条带来,可是等我把所有样品的DNA全提取完成,再去做PCR的时候,就发现问题严重了.有时候p出来,有时候p不出来,有时候p出来个别的有一次有全部p出来了,结果现在全部什么也不出来了.郁闷死了,我换了一次P时的所有药品可是结果一样失望!是我的DNA有问题吗,因为点样孔里总是白色的,我怎么抽提都会有的!有大虾给指点下!

nowanbound1年前1

shanshengsheng 共回答了19个问题 | 采纳率100%

博凌科为-为你我怎么感觉和我现在遇到的情况一模一样我做植物的 前几次提DNA条带很好,批量跑PCR的时候 弄得一塌糊涂,具体可以密我交流下

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RNA中有DNA污染是什么原因,CDNA做底物总是能扩出来基因组DNA的产物长度

RNA中有DNA污染是什么原因,CDNA做底物总是能扩出来基因组DNA的产物长度
我见有人讨论说要减少DNA污染，在加氯仿后要剧烈振荡，有的地方又说不能振荡太剧烈，这貌似是矛盾了，我做了旋涡振荡和手摇两种对照，结果RNA都是一样的，还是不太理想
还有什么具体措施可以减少RNA污染吗？
请问有高手可以设计荧光定量PCR的引物吗，

Homunculus1年前3

叶西 共回答了21个问题 | 采纳率85.7%

如果提RNA有基因组污染不是用不用剧烈震荡能解决问题的,得把提的RNA用DnaseI消化.
根据我的经验,DNA污染与Trizol的种类和你的材料性质有关,一般提的RNA都要经过DnaseI消化以确保除净DNA.
至于RT-PCR的引物你如果不会设就找个师兄师姐代设一下吧,没什么难度,主要注意点你可以上网查查.

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磁珠法提取基因组DNA的原理是什么?

lucky561年前2

45秒的胜利 共回答了22个问题 | 采纳率95.5%

(a)x05磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂,可使动植物的细胞裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离释放,磁球可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,再因洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA,得到纯度和浓度均很高的DNA,可用于PCR扩增、酶切、分子杂交等.
(b)x05生物磁珠是一种新型的功能化固体载体,其表面包被有活性基团,可以与多种生物活性物质发生偶联,兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点,在外磁场的作用下可以定向移动和集中,当撤去外磁场后,稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体中,从而使固液相的分离变的十分快捷方便,通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶向物质.
河南惠尔纳米科技生物DNA事业部

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基因组DNA和基因有什么区别?

hasephy1年前2

jslylzf 共回答了14个问题 | 采纳率85.7%

是整体和部分的关系,基因组DNA是单倍体基因组的全部,而基因是具遗传效应的DNA片段.

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基因组DNA和叶绿体DNA区别

执偏1年前2

知心伴侣 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%

基因组只是细胞核内染色体中DNA,应该不包含叶绿体DNA

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质粒DNA电泳图与基因组DNA电泳图有什么区别?

Jessiehe321年前1

lpipilu 共回答了20个问题 | 采纳率90%

正常质粒是闭合的双链DNA.在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形.这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带.闭环（超螺旋）,开环,线形的螺旋率依次降低

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磁珠法提取基因组DNA实验中如何除去RNA?

古恤1年前2

脑海中的橡皮檫 共回答了20个问题 | 采纳率90%

可在洗脱一步上加上适量RNA酶,37℃温浴1小时.这一般适合于现在大多数使用的试剂盒方法.

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磁珠法提取基因组DNA的一般步骤有哪些?

邓肯的侄女1年前1

藍橙 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

裂解、结合、洗脱、洗涤 河南惠尔纳米科技生物DNA事业部

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