DNA重组试验中,为什么先加400 uL 不含抗生素的LB液体培养45分钟,再涂含抗生素的平板,如省略该步骤结

tryagainst2022-10-04 11:39:542条回答

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向文波 共回答了12个问题 | 采纳率100%
不是为了长到一定浓度,那些量已经可以在平板上长出足够的菌落了.而且等od长到0.8也主要为了获得指数期的细胞,而不是为了菌的量.
原因是刚转化完的感受态虽然含有了抗性基因,但它还未表达,如果马上把他涂到抗性平板上或接到含抗生素的液体培养基中就长不出来了.必须先在无抗生素的液体培养基中摇上45分钟左右,等抗性基因表达了再涂板.
1年前
kill791226 共回答了37个问题 | 采纳率
要把菌养到一定浓度再涂板啊.
事实上规定的应该是吸光度,就是细菌生长到对数期对应的吸光度,但有经验的人就大概估计着摇了.
对数期细菌生长旺盛且状态好,适合做实验
1年前

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基因工程将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作.广义来说还包括目的基因在受体细胞内表达的过程,更倾向于工程学的范畴.但从狭义来说,基因工程就是体外DNA重组过程.
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如果是原核生物,比如细菌,是以质粒单独存在的;如果是真核生物,就需要整合到基因组中,也就是染色体.大部分的工程菌株都是细菌(比如大肠杆菌),所以这些目的基因单独存在于质粒中,并能快速复制与表达.
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arimawj 共回答了21个问题 | 采纳率90.5%
①外源基因的获得.如酶切法、反转录法人工合成法②载体的获得.质粒、噬菌体③获得重组体.④重组体导入受体细胞核.转化、转导、杂交、细胞融合、显微注射技术⑤对吸收重组dna 的细胞进行筛选鉴定.⑥对含有重组dna 细胞进行大量培养,检测外源基因是否表达
有关生物DNA重组中的英文翻译● the expression plasmid● the host cell● the
有关生物DNA重组中的英文翻译
● the expression plasmid
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Description of the starting strain
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Plasmid Copy Number怎么翻译
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yy产凌凌柒 共回答了25个问题 | 采纳率88%
● the expression plasmid 表达质粒
● the host cell 主细胞
● the derivation and cloning of the production cell line 细胞生产流程的推导和克隆
● the cell bank system 细胞库系
Description of the starting strain 出发菌株的描述
Preparation of the production strain 生产株的制备
Characterization of the seed bank 种子库的的表征
Cell bank System 细胞库系统
Verification of the genetic markers 遗传标记的验证
Plasmid Copy Number质粒拷贝数
质粒DNA重组的步骤是怎样的
婉约风1年前1
以前的丫子 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
1.作为载体质粒的分离
2.含有目的基因DNA序列的酶切
3.目的基因插入质粒
4.重组质粒经转化导入受体细胞
5.克隆韩目的基因的细胞
基因突变的结果是产生新的基因,利用基因工程使目的基因和受体细胞DNA重组,实际也是产生了新的基因,为什
Stone_wang1年前2
lwc1220 共回答了17个问题 | 采纳率100%
个人认为,你问的应该是这两种产生新的基因的的区别
基因突变是指基因的分子结构发生改变.这里的分子结构发生改变包括:DNA碱基对的增添缺失或碱基的改变,也就是构成基因的脱氧核苷酸的种类,数量和排列顺序发生了改变产生了新的基因.比如色盲、血友病、白化病等.基因突变是生物变异的主要来源,也是生物进化的主要因素之一.
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而基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术,操作对象是基因,操作环境位于生物体外,特点是定向改造生物遗传性状,原理是基因重组
生物染色体变异,DNA变异,染色体重组,DNA重组,DNA突变,有什么区别?
丸子妞妞1年前2
ccdl58 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
DNA是脱氧核糖核酸分子;
染色体是由DNA分子也即脱氧核糖核酸分子组成;
所以染色体变异与DNA变异本质都是一样的,就是脱氧核糖核酸分子发生变异,而变异和突变也是一个概念,
所以 生物染色体变异、DNA变异、DNA突变三者无本质区别.
染色体重组与DNA重组也是一样无本质区别.
所以现在只要区别DNA变异和重组了
变异是只DNA分子的组成成分、位置顺序发生变化,包括碱基的增减与顺序捣乱;
重组是指指DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程.包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型,广泛存在于各类生物.
(2008•汕尾模拟)基因敲除是一门新兴技术,主要应用DNA重组原理,用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段,达到
(2008•汕尾模拟)基因敲除是一门新兴技术,主要应用DNA重组原理,用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段,达到基因敲除的目的.其基本原理如图所示

请回答下列问题:
(1)在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前,应选择一个合适的______与之结合.
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞应该是______,基因导入该细胞时,可以用______等方法.
(3)上述途径获得的动物,其后代是否都含目的基因.为什么?______.
青蛙在守望未来1年前1
ffff000 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
解题思路:1.常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒.作为运载体必须具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存.②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入.③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择.④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来.
2、目的基因导入到受体细胞中,不同细胞方法不同,如植物细胞:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法.动物细胞:显微注射技术.微生物细胞:用Ca2+处理细胞.

(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心,其目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用.
(2)基因工程中最理想的受体细胞是受精卵.将目的基因导入动物细胞的方法是显微注射技术,操作程序:目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的子宫或输卵管内发育→新性状动物.
(3)利用上述途径获得的动物,其后代不是每个后代都含有目的基因的,因为在形成生殖细胞时,等位基因会发生分离,产生的生殖细胞中由部分没有其目的基因.
故答案为:
(1)运载体
(2)受精卵;显微注射法
(3)否,在形成生殖细胞时等位基因会发生分离.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题着重考查了基因工程等方面的知识,意在考查考生能识记并理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成一定知识网络的能力,并且具有一定的分析能力和理解能力.

什么叫做DNA重组
mansdream1年前1
lxw88881 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
.目的基因的获得.从细菌或动植物细胞中取出染色体的DNA,用内切酶将之切成若干片段,从中鉴定出目的基因.另一种方法是从细胞中分离到信使核糖核酸核(mRNA)用反转录酶的作用获得该基因的互补DNA(cDNA).如果预先知道某种蛋白质的氨基酸顺序,可以破译它的遗传密码,用DNA合成的方法获得基因.
2.运载体的选择.运载体一般为质粒,是细菌中染色体以外的DNA.但它不是正常的成分,即没有质粒也完全可以正常生长.质粒是环状的DNA,能自主复制,有若干内切酶切口和某些抗生素的抗药性基因.可以作为转基因的载体.
3.内切酶切割.将目的基因与质粒DNA如pBR322质粒,用相同的内切酶分别进行切割,结果它们都会形成相同的切口.
4.连接酶连接.DNA连接酶,常用的有T4.在三磷酸腺苷(ATP)及镁离子存在的条件下,T4连接酶能将切口相同的两种DNA连接起来,形成一个插入目的基因的质粒,叫重组质粒.
5.宿主菌.宿主菌如大肠杆菌作为受体菌,需要培养到旺盛生长阶段,叫感受态细胞.一般在液体培养基中,37℃振荡培养过夜即可.
6.重组DNA的转化.将插入目的基因的质粒加入呈感受态的大肠杆菌中,同时加入适当的钙盐(Ca+2),振荡培养.大肠杆菌将重组质粒吞入胞内.这个过程叫转化.
7.转化子的筛选.pBR322质粒的PstI酶切口处插入目的基因时,则会破坏了抗氨苄青霉素的基因.将转化后的大肠杆菌单个菌落,挑取菌体分别接种于含氨苄青霉素及链霉素的培养基中.如在链霉素培养基上生长而在氨苄青霉素培养基上不能生长的菌落即为转化子
为什么dna重组只筛选出白菌落
caihua1141年前2
104249 共回答了24个问题 | 采纳率87.5%
你是用蓝白斑筛选体系吗?
一般白斑表示有目的基因插入lacZ,破坏其功能,而不能正常合成酶降解底物,从而不出现蓝斑.因此重组的载体一般LacZ的活性已被破坏,产生白斑,但是有时你插入的目的基因短,使得LacZ基因没有完全破坏的话,可能会出现淡蓝的斑.
DNA重组和基因重组有什么区别?基因重组就是DNA重组么?
宁佳乐1年前2
laike300 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%
首先回答第一个问题.DNA是分子水平上的,而基因不是,基因只是DNA分子上的有效片段.所以DNA重组就是例如基因工程(高一必修2),而基因重组是说例如四分体的交叉互换(还是必修2),所以说有区别,水平不同.
第二个问题,回答是肯定的,基因重组就是DNA重组
染色体结构变异为何不属于DNA重组?
染色体结构变异为何不属于DNA重组?
因为我觉得DNA重组也就是多加上去了一段基因啊
twffcu21年前3
imac19662 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
首先介绍一下染色体结构变异:
人类的许多遗传病是由染色体结构改变引起的.
在自然条件或人为因素的影响下,染色体发生的结构变异主要有4种:
1.缺失 染色体中某一片段的缺失 例如,猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失引起的遗传病,因为患病儿童哭声轻,音调高,很像猫叫而得名.猫叫综合征患者的两眼距离较远,耳位低下,生长发育迟缓,而且存在严重的智力障碍.
2.重复 染色体增加了某一片段 果蝇的棒眼现象就是X染色体上的部分重复引起的
3.倒位 染色体某一片段的位置颠倒了180度,造成染色体内的重新排列 如女性习惯性流产(第9号染色体长臂倒置)
4.易位 染色体的某一片段移接到另一条非同源染色体上或同一条染色体上的不同区域 如惯性粒白血病(第14号与第22号染色体部分易位)
上述染色体结构的改变,都会使排列在染色体上的基因的数目和排列顺序发生改变,从而导致性状的变异.大多数染色体结构变异对生物体是不利的,有的甚至会导致物体死亡.更严重的是如果这些变异出现在配子中,将来形成的合子也就含有了变异的染色体,将变异遗传到后代.
染色体结构变异与染色体数目变异引起的疾病统称染色体病.现在可以通过适当手段产前诊断,有利于预防.
由上可知染色体结构变异中并不存在外源基因片段,那么接下来介绍一下DNA重组技术:
所谓DNA重组就是将不同来源的DNA片段连接起来,构造新的基因型的过程.
由此可知DNA重组技术引入了外源基因.
综上:染色体结构变异虽然可能涉及易位但是整个过程中并不存在外源基因的导入所以不属于DNA重组.