用ExonucleaseIII去除线性分子
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用ExonucleaseIII去除线性分子
前辈您好!体系中含有两种DNA分子:线性分子和线性分子首尾相连而成的环状分子.用ExonucleaseIII处理之(之后不用ExonucleaseI处理,因为样品量太少,以免损失).然后跑非变性聚丙烯酰胺电泳.这样能否除去线性分子唯独只见环状分子能?小妹设计实验方案急待指教,
前辈您好!体系中含有两种DNA分子:线性分子和线性分子首尾相连而成的环状分子.用ExonucleaseIII处理之(之后不用ExonucleaseI处理,因为样品量太少,以免损失).然后跑非变性聚丙烯酰胺电泳.这样能否除去线性分子唯独只见环状分子能?小妹设计实验方案急待指教,
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共1条回复
ma1hong2yu3 共回答了18个问题
|采纳率100%- 哦,这样啊 前边我猜错了.
如果是dsDNA的话,应该是可以区分的,因为线性和环状dsDNA的迁移率不同,跑得越远 差别越大.你便可通过切胶纯化了.
此外,可以用 ExonucleaseIII处理,因为该酶并不作用于环状dsDNA,因此不会造成损失. - 1年前
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|采纳率87%前者:不含核酸酶的水
后者:不含RNA酶的水
前者可以代替后者,后者不可以代替前者.
后者只是不含RNA酶,有可能含DNA酶.
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溶液的话时间短些,两三天应该也没问题
变性一般不会,但是比较容易降解,那样后续实验就没法进行了.
如果你是不小心放在常温担心不能做后续实验的话就先电泳检测一下,条带单一的话就没问题;如果是想常温运输的话,最好用生物冰袋保温1年前查看全部
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