miRNA靶标验证实验中,将预测靶标的3'UTR插入PGL3-control时怎样选择酶切位点

tian7112022-10-04 11:39:543条回答

miRNA靶标验证实验中,将预测靶标的3'UTR插入PGL3-control时怎样选择酶切位点
我在做miRNA的靶标验证实验,想把预测靶标的3'UTR构建至PGL3-control载体中,我发现在荧光素酶基因下游只有XbaI酶切位点,之后还有一个HpaI,但位于SV40 late poly(A) signal 中,那这个HpaI是不是不能用呢?难道只能用单酶切吗?SV40 late poly(A) signal 是说SV40的复制终点吗?我要插入的3'UTR区是不是只能插在SV40 late poly(A) signal 之前?

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共3条回复
豆浆娃娃 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
应该是吧.polyA是II型转录酶的转录终止信号,3’-UTR应该是在polyA之前.
一个酶切位点也不错,你正好可以考察一下3‘UTR正反向插入,mirna对其识别、作用的效果.
1年前
DMHONG 共回答了1个问题 | 采纳率
的撒发射点发
1年前
zilei10 共回答了3个问题 | 采纳率
这东西,在百度知道难以找到人回答。
1年前

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什么叫做靶标我在做论文,
ryo_nick1年前1
chunping999 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%
一般是做药学或者医学的会用到靶标这个概念
我们现在做的课题是材料化学方向的,应用在医学上面,就牵涉到靶标
靶标是指药物作用于体内并实现疗效的特定分子
看到你的补充了
底物这个概念是和酶配套存在的
正所谓酶的反应有特异性
就是说酶的活性位点能够结合的是一个特定的结构
而能够和酶进行结合反应的,拥有这样特定结构的东西就被称作底物
类似物就是指结构功能相似的东西
这里你应该问的是底物类似物吧
一般来说如果搞清楚酶的活性位点结构,就可以知道它的活性位点可以结合在底物的哪个特定结构上.而如果制备一种也拥有这样特定结构的物质,因为存在这样的结构因而也可以和酶进行结合,就被称作底物类似物.
当只有底物和酶在一起的时候两者是发生特异反应的.
但是当底物和酶的体系里面加入了同样具有特定结构的底物类似物,底物类似物也可以和酶进行结合,就会和底物产生竞争,减少了反应的程度.至于究竟减少到什么样的程度,还说完全取代,决定于这个类似物和酶结合的稳定程度.