试述革兰染色法的步骤,结果及其临床意义

kk_蓝鸟2022-10-04 11:39:541条回答

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katzeMM 共回答了21个问题 | 采纳率100%
一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定.2)草酸铵结晶紫染1分钟.3)自来水冲洗.4)加碘液覆盖涂面染约1分钟.5)水洗,用吸水纸吸去水分.6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
具体试验 流程
1、 取载玻片用纱布擦干,载玻片的一面用marker笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置).涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂. 2、 涂片:液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀. 3、 晾干:让涂片在空气中自然干燥. 4、 固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜). 5、 染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1min. 6、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干.简单染色结束可观察细胞形态. 7、 媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗. 8、 脱色:吸去残留水,连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立即水洗. 9、 复染:滴加蕃红复染3-5min,水洗.至此,革兰氏染色结束.


结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色.


其重要的临床意义在于:1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关:革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素;而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖,两者的致病作用不同.
1年前

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