20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少

PCR扩增时,25微升体系一般加引物多少?

the19791年前5

qyren999 共回答了12个问题 | 采纳率83.3%

The important is not the volume of the primers, but the final primer concentration. The concentrations of both primers in the amplification reaction should be between 0.1 and 0.5 μM.

1年前查看全部

为什么用2微升的移液器点样时枪头会有残留

就在凉山州1年前1

BIZ小馒头 共回答了23个问题 | 采纳率82.6%

会有残留要么是吸头质量不好,要么是密封性不好.

1年前查看全部

1克等于多少微升?

catherine7771年前4

szsxm 共回答了22个问题 | 采纳率95.5%

如果是水,其比重为1克/毫升,那么 1克水=1毫升水=1000微升水

1年前查看全部

25微升PCR体系中,两种引物分别加0.5微升,那么所添加的引物的浓度是多少?几摩尔每升?

25微升PCR体系中,两种引物分别加0.5微升,那么所添加的引物的浓度是多少?几摩尔每升?
不问终浓度,问的是加入体系之前那0.5微升的引物其浓度几何?

eish0831年前1

sweet棒棒糖 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%

标准程序和对应的浓度是：
引物合成公司——干粉——33μg/OD
引物合成单上根据引物的分子量,会有一个建议的稀释体积,会将引物统一稀释到一个储液的浓度即——100μM
通常我们做PCR时会将储液再进行10倍稀释,这时的引物浓度即——10 μM
通常情况下,你问题中的引物浓度就是3的浓度,10 μM=10 μm/L,也就是10 微摩尔每升

1年前查看全部

PCR 50ngDNA 与多少微升 怎么换算

ckcy20021年前1

lcamo2 共回答了22个问题 | 采纳率100%

那不得看你DNA的浓度是多少嘛

1年前查看全部

关于细胞培养的MTT法,查了文献是加100微升的细胞悬液培养一段时间,再加药物100微升,一段时间后加20微升的MTT（

关于细胞培养的MTT法,
查了文献是加100微升的细胞悬液培养一段时间,再加药物100微升,一段时间后加20微升的MTT（总体积1/10）,我想问,加了100微升药物进去后,药物的浓度没有被原来那100微升培养基稀释么?那药物的浓度对实验影响还准确么?如果真的影响了,我要怎么做去避免影响呢?
另外我还想问,测得的OD值怎么算抑制率（求权威算法）.抑制率又怎么算IC50?

tjtim1年前4

zyling32 共回答了24个问题 | 采纳率91.7%

抑制率=（实验组-空白组）/(对照组-空白组)×100%,IC50有软件可以算出...想要的话留邮箱

1年前查看全部

高效液相色谱进样量 做高效液相色谱,待测样品（植物提取液）浓度太稀.增加样品注射量（如从5微升提高到20微升）,即增加进

高效液相色谱进样量
做高效液相色谱,待测样品（植物提取液）浓度太稀.增加样品注射量（如从5微升提高到20微升）,即增加进样量以得到理想的峰?可行吗?

cqwincqwin1年前1

青涩的味道 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%

可以.
增加进样量和增加浓度是一样的意思.
你可以看一下自己实验条件的定量限（信噪比为10时候的浓度）是多少,只要比这个高就好.当然了,最好是吸收大一点,看着漂亮.
不过有一个过载量,这个要通过线性才能看出来.只要是线性试验的中间浓度其实都是可以的.

1年前查看全部

微升、微克的符号怎么打?“微”就是像u的但是一个希腊或者罗马字母来写的,比如ul,ug,我打不出,麻烦帮我打一个或者告诉

微升、微克的符号怎么打?
“微”就是像u的但是一个希腊或者罗马字母来写的,比如ul,ug,我打不出,麻烦帮我打一个或者告诉我怎么打..

youshangdeyezi1年前1

boge21 共回答了10个问题 | 采纳率100%

随便一个输入法 鼠标放到输入法框框最后一格右键点击下你会看到好多什么什么符号 然后就有个希腊字母
点击下就看到了
找其他的以此类推 一般的符号都有的

1年前查看全部

一个关于生化的问题.在10 微升反应体系中进行DNA 的限制性酶切反应,发现酶切效率极低.将反应体积增加到20 微升（D

一个关于生化的问题.
在10 微升反应体系中进行DNA 的限制性酶切反应,发现酶切效率极低.将反应体积增加到20 微升（DNA 和酶的用量按比例增加）,发现尽管每微升中的组成没有发生变化,但酶切效率大大改善.是什么原因导致这种现象,如想改善10 微升体系的酶切效率应该加些什么.

目偶天野1年前2

心底爱娜莫深 共回答了19个问题 | 采纳率84.2%

酶的保存液里面有50%的甘油,10微升反映体系里面甘油浓度太大,影响酶切效率.想做10微升反映体系,可以减少酶的用量,使甘油浓度小于5%.

1年前查看全部

提出的质粒浓度为0.1微克每微升,OD值为2.11是怎么回事?

真的闰七月1年前1

fjw19821001 共回答了27个问题 | 采纳率92.6%

OD260=2.11

1年前查看全部

1纳克每微升相当于多少克每毫升?

xthnype1年前2

lds1000 共回答了25个问题 | 采纳率80%

1ng=10^-9g
1μl=10^-3ml
所以
1ng/μl=10^-9g/10^-3ml=10^-6g/ml

1年前查看全部

20摄氏度时气体的相对湿度与含水量（微升/升）之间的关系?请大侠们多帮帮忙,

黎明的小竹1年前1

稻草人卢 共回答了19个问题 | 采纳率84.2%

首先是概念：【相对湿度】空气中实际所含水蒸汽密度和同温度下饱和水蒸汽密度的百分比值,叫做空气的“相对湿度”.含水量就不说了.
20 ℃ 时 相对湿度95% 注意还有个条件是在干湿示差为1时,空气的干湿程度和空气中所含有的水汽量接近饱和的程度有关,而和空气中含有水汽的绝对量却无直接关系.我们把空气中实际所含有的水汽的密度ρ1与同温度时饱和水汽密度ρ2的百分比ρ1/ρ2×100％叫做相对湿度.也可以用水汽压强的比来表示：例如,空气中含有水汽的压强为1606.24Pa（12.79毫米汞柱）,在35℃时,饱和蒸汽压为5938.52Pa（44.55毫米汞柱）,空气的相对湿度 而在15℃时,饱和蒸汽压是1606.24Pa（12.79毫米汞柱）,相对湿度是100％.
绝对湿度与相对湿度这两个物理量之间并无函数关系.
若不够详尽,敬请查阅相关文献.

1年前查看全部

一般PCR产物浓度能达到多少ng每微升

一般PCR产物浓度能达到多少ng每微升
我只测了一下纯化回收后的,才10+ng每微升,不知道是不是试剂盒回收效率太低
我的片段500bp,PCR程序33个循环,50体系

waitlan1年前1

walihoso 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%

PCR产物浓度主要取决于模版的量和引物的量.如果模版属于稀有基因,那么产物浓度就不会高.而且你不要回收后才测浓度,PCR结束后就可以跑电泳或者测OD值都很快的.
另外,计算PCR的产物不要光看浓度,因为你回收后可以用100ulTE去溶解产物,也可以用50.

1年前查看全部

普通PCR25微升体系TAQ酶 (5 U/μl)加入多少,终浓度应该多少比较合适?

橙米1年前3

湖海一刀 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%

5u/ul的加0.5ul即可.

1年前查看全部

我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,

我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,
我的marker是含有1*loading buffer,标准使用量6ul,其中4000bp条带约为100ng/5ul,其余条带浓度约为50ng/ul
参照片段：1000bp,2000bp,3000bp,4000bp,5000bp,6000bp,8000bp,10000bp
如果想要估算我的质粒的浓度的话,我按照这个marker,我应该怎么加样,怎么估算呢?

元成1年前2

简和简单 共回答了23个问题 | 采纳率82.6%

点5ulMARKer（其实最好用超螺旋Marker）,1ul 质粒（松弛型,如果是严谨性质粒浓度比较低要多点几ul）.电泳后比较条带亮度,如果和4kb条带一样亮则为100ng/ul,如果和其他条带一样亮为50ng/ul

1年前查看全部

还是有点疑惑 那30ML的LB培养液 要加入多少微升的细菌 这个怎么算的

zerjmk1年前1

波波宝贝波 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%

不同的细菌不同的状态加入量是不一样的.
你可以先加入300ul、100ul、30ul菌液到培养基里面,（这样是一个梯度,没经验的话,过夜摇菌不至于摇过头）,有时间的话,可以实时监控摇菌瓶中的OD值.一开始可能会比较麻烦,建立好摇菌的过程以后,就方便了.
当然,你可以直接去问做过的师兄师姐,获取他们的经验,可以少走很多弯路.
（一般LB培养细菌要抽质粒的话,30ml氨苄抗性LB培养基中加入300ul较为浑浊的大肠杆菌,过夜摇菌,约12h,即可提取质粒.摇菌时间也与菌种、氧气量有关.）

1年前查看全部

4,试着写出 a,20微升PCR反应体系; b,初步的PCR反应程序(引物的退火温度55℃); c,操作过程中的2点注意

4,试着写出 a,20微升PCR反应体系; b,初步的PCR反应程序(引物的退火温度55℃); c,操作过程中的2点注意事项
4、试着写出
a、20微升PCR反应体系；
b、初步的PCR反应程序（引物的退火温度55℃）；
c、操作过程中的2点注意事项.

aliu06111年前1

jack006 共回答了21个问题 | 采纳率95.2%

0.5 µLtaq酶
0.5µL上游引物
0.5µL下游引物
0.5µLdNTP
2µL10×buffer
1µL模板
15ddH20µL
95度5min
95度30秒 55度30秒 72度30秒 25到35个循环

最后72度10min
注意事项：模板浓度高可适当减少加入量,buffer量不能调整,其他成分可适当调整.PCR体系在冰盒上配制可有效减少非特异性扩增.

1年前查看全部