【DNA重组技术】不同的平末端可以用DNA连接酶连起来吗?

小五五子2022-10-04 11:39:545条回答

【DNA重组技术】不同的平末端可以用DNA连接酶连起来吗?
是用不同的限制酶切的DNA 平末端.
最好有链接,证据充足的

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一媛 共回答了26个问题 | 采纳率88.5%

既然是平末端 不是粘性末端 可以是不同酶切后的
平末端连接在分子的实验很常见的 目的基因和载体 不能有两种同种酶切位点 就要平末端连接了
我现在做的是 一端是粘性末端连接 而另一端要靠平末端随机碰撞的
但平末端连接的效率很低 连接条件需要摸索 一般加入更大量的连接酶还可以加入PEG作为凝聚剂
1年前
东洋小帅哥 共回答了2个问题 | 采纳率
可以的,这怎么说……
1年前
CHNEYONG3 共回答了1个问题 | 采纳率
碱基互相配对的 不同的应该是不能配对 不能连起来 催化酶 只是起到加快的作用
1年前
因为他是uu的 共回答了14个问题 | 采纳率
呃,不得不补充一下。
在竞赛中,我们把限制性核酸内切酶的特点之一,叫做 “特异切割:切口有平切与措切两种” 这里,特异的意思是有针对性。

补充说明一下(这也是你要问的):切割都是特异的,但DNA连接酶具有普遍性,可以连接任意切口,因为连接的是磷酸二酯键,没有特异性。也就是说只要碱基可以配对,粘性末端也可以任意链接,而平末端不牵扯这个问题,就更可以连接了...
1年前
青面 共回答了3个问题 | 采纳率
可以,只要两个末端能进行碱基互补配对就行了
1年前

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DNA重组技术工具酶
只有限制酶和连接酶吗?在目的基因的获取时,如果采用逆转录法,不是还要用到DNA聚合酶吗?
那题目中说工具酶是限制酶和DNA连接酶也算对吗?
beexsi1年前1
54龙儿 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%

DNA重组技术工具酶只有限制酶和DNA连接酶
获取目的基因采用逆转录法只是DNA重组技术四部曲之一的具体方法,DNA聚合酶不能算工具酶
转基因食是指利用DNA重组技术将供体基因植入受体生物后生产的食品原料、成品及其食品添加剂.
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下列有关转基因食品的叙述不正确的是( )
A、通过这种手段,人们可以按照自己的意愿得到所需食品
B、食品在营养品质上有所提高
C、消费品向人类需要的目标转变
D、转基因食品会影响人类健康
chikic1年前1
ftsam 共回答了12个问题 | 采纳率100%
D
题目中没有与“影响人类健康”有关的信息.
DNA重组技术是怎样的原理 ,
一粒尘埃_nn1年前2
honghuo777 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%
最基本的原理是核酸内切酶的特异切割活性(高中一般只提粘性末端)和连接酶的链接活性,以及碱基互补配对.通过使用特定的核酸内切酶,将目的片段和经改造后的特定载体(质粒、病毒核酸链,其上有特异的切割位点,转录启动、终止序列,以及用于筛选表达的序列)切割,形成能够互补的粘性末端,再通过连接酶进行聚合形成重组子.将重组质粒(以质粒为例)导入感受态细胞,培养,筛选,最后进行表达
请问选修三的dna重组技术的基本工具和基因工程的基本操作程序有什么联系,我有点弄混了
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求解释先什么在什么,有没有重复的地方呢,
可爱小胖猪1年前2
syydxz 共回答了19个问题 | 采纳率94.7%
DNA重组技术就是基因工程吧.需要的基本工具①限制性核酸内切酶②DNA连接酶③运载体 操作程序①获取目的基因②构建表达载体③将重组DNA分子导入受体细胞(转化)④目的基因的检测与鉴定
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已知某肽基因全长120bp.拟通过DNA重组技术构建含6×his标签的重组融合蛋白的基因工程大肠杆菌,得到具有细胞增值活性的蛋白产物最终纯度不小于98%,请根据相关原则设计具体的实验方案和技术路线
sckiki1年前2
WSK209 共回答了15个问题 | 采纳率100%
根据目的基因序列设计引物;PCR目的基因片段;跑胶,产物回收,纯化;连接T载体(如PMD18t);转化宿主菌;筛选单克隆;测序;大量培养,提取重组质粒;酶切,电泳,回收,纯化,连接表达载体(如pET系列),转化;筛选单克隆;酶切鉴定,测序;诱导表达;裂解细胞;过Ni亲和层析;注意:可溶蛋白和包涵体处理根据实验目的是不一样的.若对蛋白纯度不满意可以综合使用其他分离技术,如离子交换树脂等.如his标签影响蛋白活性可切除,此外如果目标蛋白活性较低或失活,可以共表达一些其他蛋白(如分子伴侣等).若蛋白活性需要糖基化则应该考虑真核表达系统.总之,没有一种表达体系能够完美表达每一种蛋白,根据目的蛋白的结构(是否有稀有密码子、二硫键、糖基化、膜蛋白、复杂折叠、其他翻译后修饰系统)来选择合适的系统,才能达到理想的目的.
关于基因工程——DNA重组技术的基本工具
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限制酶的识别序列和切点是—↓GATC—,在目的基因上的两侧各有一个这种限制酶的切点。
目的基因
— GATC—........— GATC—
—CTAG —........—CTAG —
注:“目的基因上的两侧各有一个这种限制酶的切点”这我不理解
lilyhopelo1年前8
有价值的认购 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
你首先要明确目的基因是一个基因片段,片段就有两个端.
要将目的基因从一条DNA上切出,必须两侧各有一个这种限制酶的切点
DNA分子杂交为什么不属于分子水平克隆技术?PCR为什么属于?转基因技术与DNA重组技术的区别?
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一、DNA分子杂交为什么不属于分子水平克隆技术?PCR为什么属于?二、转基因技术与DNA重组技术的区别是什么?三、杂交育种的原理是基因重组,基因工程的原理也是DNA重组,他俩是一个原理吗?学渣完全不理解塞~
huanxu10291年前1
redheart888 共回答了21个问题 | 采纳率76.2%
我在这里就不跟你用专业术语解释了,用专业术语解释你都能自己找到,我就用最简单的方式跟你说.
首先,你要搞清楚什么叫做克隆.克隆,在分子生物上其实就是“无性繁殖”,可能我这么说欠妥,但是你就可以这么理解.
DNA分子杂交为什么不属于分子水平的克隆,因为,杂交它只是互补配对,而不设计“繁殖”,即扩增,或者说有一个一变二,二变四.所以,他不属于克隆技术.但是PCR就不一样啦,PCR就是相当一个“繁殖”过程,把一个片段扩增成2^n个,所以PCR是克隆技术.
转基因技术和DNA重组技术的区别,光看名字我觉得其实就能看出来.
转基因技术,说一个极端的例子,比如说,把水母的荧光基因导入到小鼠身体内,使本来不会发光的小鼠可以自发光了,这个就是转基因技术.这期间要用的就是基因工程技术.原理当然是DNA重组.
其实杂交育种和基因工程的的区别很好理解,
杂交育种其实就是正常的繁殖,比如说黄种人和白种人的结合其实也是杂交育种的一种情况,只不过放在人身上没人这么说而已.
基因工程就不一样啦,基因工程会涉及“开刀”的,就好像上面那个例子.不同物种间的基因重组.
这么说还有什么不理解不?
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术.______.
shuaihuangying1年前1
willbetter 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
解题思路:此题可以从基因工程的概念方面来分析解答.

基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术. 这种技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物.通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向改造生物的遗传性状.
故答案为:√

点评:
本题考点: 转基因技术的应用.

考点点评: 解答此类题目的关键是知道基因工程的概念

如何进行一个完整的DNA重组技术,实现从DNA到蛋白质?要求设计一个完整的实验方案
玫心蓝1年前1
qzcxy3300 共回答了21个问题 | 采纳率100%
1.选择一个载体,如PBR322等质粒,然后用限制性内切酶和DNA合成酶进行体外重组载体的构建
2.把重组的DNA分子转到受体细胞(如大肠杆菌)
3.培养阳性克隆菌
4.分析蛋白质组成,发现新蛋白条带有无(SDS--PAGE)
简述DNA重组技术的技术路线
狼鹰天下1年前1
不正确 共回答了23个问题 | 采纳率78.3%
1.获得目的基因,并进行酶切 获得粘性末端
2.将载体也进行酶切 获得相同的粘性末端
3.将载体与目的基因相连
4.将重组好的载体导入宿主细胞中进行表达
基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,以分子遗传学为理论基础,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA
基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,以分子遗传学为理论基础,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,改变生物原有的遗传特性、获得新品种和生产新产品.回答以下问题:
(1)培育转基因植物过程中,基本操作需要的工具酶是______.基因表达载体中目的基因首端必须含有______,它是RNA聚合酶识别和结合位点.
(2)请写出一种将目的基因导入植物细胞的方法______;如果受体细胞是动物细胞,则该细胞一般是______;如果受体细胞是植物细胞可采用______技术获得转基因植物,该技术的原理是植物细胞的全能性.
(3)为获得大量的目的基因,可以用______技术进行扩增,其原理是______,该过程需要以______为模板,所用酶最大的特点是______.
8088pc1年前1
丁军珊 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
解题思路:1、基因工程必须的工具:限制酶、DNA连接酶和运载体.
2、基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定.

(1)基因工程的基本操作中所需的工具酶是限制酶和DNA连接酶.基因表达载体由启动子、目的基因、终止子和标记基因等组成,其中启动子是RNA聚合酶识别和结合位点.
(2)将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;由于受精卵的全能性最高,因此一般选用动物的受精卵作为受体细胞;将转基因细胞培育成转基因植物还需要采用植物组织培养技术,该技术的原理是植物细胞的全能性.
(3)PCR技术可以在体外大量扩增目的基因,其原理是DNA复制.PCR技术的条件:以目的基因为模板,以四种脱氧核苷酸为原料,还需要热稳定DNA聚合酶.
故答案为:
(1)限制酶和DNA连接酶 启动子
(2)农杆菌转化法或基因枪法或花粉管通道法 受精卵 植物组织培养
(3)PCR DNA复制 目的基因 耐高温

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查基因工程、植物组织培养和PCR技术等知识,要求考生识记基因工程的原理、操作步骤及应用,掌握各操作步骤中的方法及相关事项;识记植物组织培养技术的原理及应用;识记PCR技术的概念、原理及条件,能结合所学的知识答题,属于考纲识记层次的考查.

DNA重组技术为什么要用到DNA复制啊,还有,T-DNA是什么?标记基因是什么?
23656971年前1
猪的美人鱼 共回答了27个问题 | 采纳率85.2%
重组之后你需要复制重组的质粒或者DNA,所以需要DNA 的复制..一般作为载体的质粒都有原核或者真核的复制起点.
T-DNA是存在于农杆菌质粒上的一段DNA,这段DNA对于农杆菌自身非必需,由于这段序列在农杆菌侵染宿主时能整合到宿主基因组DNA中,人们利用这一特性,在转基因过程中使用农杆菌转化.即将农杆菌T-DNA序列替换为目的基因,利用农杆菌将其转入到宿主中(只对植物有用)..
标记基因,可想而知就是作为标记的一个基因..我们将重组DNA转入目的宿主中,如何检测其是否转入到宿主中?这就需要标记基因了,标记基因一般为抗性基因,或者一些必需营养因子等.植物中常用的如潮霉素抗性基因,卡那霉素抗性基因.微生物中常用安苄抗性.卡那霉素抗性,以及蓝白斑筛选,或者像酵母中用编码必需氨基酸的基因作标记基因..简言之,标记基因就是用作标记重组DNA是否转入目的宿主中.但是单纯的标记基因不能完全确定重组DNA是否转入宿主中.通常还需要其他一些检测手段配合使用,以确定标记基因是否转入宿主中.
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术.______.
赌坊889号1年前1
yelei85 共回答了20个问题 | 采纳率90%
解题思路:此题可以从基因工程的概念方面来分析解答.

基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术. 这种技术是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物.通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向改造生物的遗传性状.
故答案为:√

点评:
本题考点: 转基因技术的应用.

考点点评: 解答此类题目的关键是知道基因工程的概念

提高水稻产量--基因工程除了DNA重组技术以外通过( )( )等理论手段可以提高水稻产量
climpid1年前1
lulugege 共回答了13个问题 | 采纳率100%
杂交 诱变育种
DNA重组技术的基本工具
妮妮小笨笨1年前5
cola716 共回答了22个问题 | 采纳率95.5%
“分子手术刀”——限制酶.
“分子缝合针”——DNA连接酶.
“分子运输车”——基因进入受体细胞的载体.
基因工程(比如DNA重组技术)是否可以改变成年人的长相. 整形手术可以但不知道基因重组可以不
基因工程(比如DNA重组技术)是否可以改变成年人的长相. 整形手术可以但不知道基因重组可以不
对基因工程不了解望大家详细解答. 谢谢
zhuxinhao139211年前3
jiajoy6657 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
这个基本不可以了,对于一个成年人,它的细胞基本已经分化完全,虽还存在一些未分化细胞,只是为了填补衰老死亡的细胞的,所以基本已经定型了,...
对植物,因为单细胞有全能型,可以去单细胞加以改造,进而培养成植株,而改变形状等特性
对于微生物,由于常为单细胞,经基因工程改造,可以改变此细胞特性进而达到目的
而对于动物,由于细胞没有全能性,可以从胚胎时期进行基因改造,进而成体会体现这种性状,但是已经成年就无法改变了,试想一下,你面部有那么多细胞,又怎么通过基因工程的办法,是每个细胞都携带有你所想表达的基因呢?这基本是不可能完成的...就像你说的一样,整形术可以,因为他是经手术改变外形,而基因工程不行,以为他要让面部所有的细胞基因加以改变,所以是不可能的...希望对你有所帮助...
基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的四个必要条件是(  )
基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的四个必要条件是(  )
A. 目的基因、限制性核酸内切酶、运载体、体细胞
B. 重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶
C. 模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞
D. 工具酶、目的基因、运载体、受体细胞
liuyi7706151年前1
sasdfafs 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
解题思路:基因工程需要的工具有:限制酶、DNA连接酶、运载体.基因工程的实质是将一种生物的基因转移到另一种生物的细胞中,因此需要目的基因和受体细胞.

A、目的基因、限制性核酸内切酶、运载体是基因工程必需具备的条件,但体细胞不一定是受体细胞,A错误;
B、重组DNA是由目的基因和质粒重组形成的,RNA聚合酶是转录需要的酶,细胞中具有该种酶,因此不是基因工程必需的条件,B错误;
C、mRNA是基因转录的产物,基因工程中不需要提供该物质,质粒是运载体中的一种,除了质粒还有动植物病毒和噬菌体衍生物,因此质粒不是基因工程中必须的,C错误;
D、限制酶和DNA连接酶属于工具酶,另外运载体、目的基因和受体细胞是基因工程中的必需具备的条件,D正确.
故选:D.

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.

考点点评: 本题考查了基因工程的相关知识,意在考查考生的识记能力和理解判断能力,属于简单题.考生要能够理解基因工程的过程和实质,识记基因工程的实施必须具备的条件.

为什么基因工程又叫DNA重组技术?还有为什么基因工程中要有运载体,直接把需要的基因剪切下来然后放入受体细胞为什么不行,干
为什么基因工程又叫DNA重组技术?还有为什么基因工程中要有运载体,直接把需要的基因剪切下来然后放入受体细胞为什么不行,干嘛非要连在一个小型环状DNA上
张狂笑1年前1
浪的虚名 共回答了23个问题 | 采纳率78.3%
基因工程就是通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物.
重点是重组dna嘛.
质粒是运载体,必需的,就像mRNA要把遗传密码给tRNA一样啊,是个中间过程而已,这样才可以正常表达.
基因工程的原理(急)知道基因工程应用的原理是什么?不是指的(基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术.通俗的说,就是按照
基因工程的原理(急)
知道基因工程应用的原理是什么?不是指的(基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术.通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状.)这是基因工程的概念.我想了解的是他的应用原理,
sunny_forest1年前5
hamham01 共回答了12个问题 | 采纳率100%
基因工程是生物工程的一个重要分支,它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程. 所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作.它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达.
工具酶就是限制性内切酶,所以原理就是限制性内切酶能识别并切割特异的双链DNA序列,因此就可以将需要的DNA片段(这段DNA以后表达出的性状就是需要的)“放进”载体中,再导入细胞中,以后这段DNA不就可以表达出来了?
基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备四个必要的条件是
太过真实1年前1
秋月QT 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
步骤还是条件?
(2014•成都)基因工程就是利用DNA重组技术,将外源基因导入受体生物体内,当这种外源基因与受体生物基因整合后,外源基
(2014•成都)基因工程就是利用DNA重组技术,将外源基因导入受体生物体内,当这种外源基因与受体生物基因整合后,外源基因就能随受体生物细胞的分裂而增殖,并能表达出受体生物原本没有的性状.例如,将人的抗病菌干扰基因导入烟草DNA分子中,可使烟草获得抗病毒的能力,形成转基因烟草.试分析回答:
(1)不同生物间基因“嫁接”成功,这说明共享这一套______.
(2)从生物进化的角度看,这些生物具有______.
(3)转基因技术应用于实践,将给农业、医药等诸领域带来革命,目前已取得了许多成就,请你列举三个具体实例.
______.
mfq7209291年前1
jiexiaoz 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
解题思路:本题考查转基因技术的应用.解答时应熟知转基因技术的原理.转基因技术是指运用科学手段从某种生物中提取所需要的基因,将其转入另一种生物中,使与另一种生物的基因进行重组,从而培育出转基因生物.

(1)不同生物间基因“嫁接”成功,这说明共享这一套遗传密码,遗传密码包含在脱氧核糖核酸或核糖核酸核苷酸序列中的遗传信息.它决定蛋白质中的氨基酸排列顺序,因而决定蛋白质的化学构成和生物学功能.遗传密码决定蛋白质中氨基酸顺序的核苷酸顺序,由3个连续的核苷酸组成的密码子所构成.遗传密码决定蛋白质中氨基酸顺序的核苷酸顺序,由3个连续的核苷酸组成的密码子所构成.由于脱氧核糖核酸(DNA)双链中一般只有一条单链(称为有义链或编码链)被转录为信使核糖核酸(mRNA),而另一条单链(称为反义链)则不被转录,所以即使对于以双链 DNA作为遗传物质的生物来讲,密码也用核糖核酸(RNA)中的核苷酸顺序而不用DNA中的脱氧核苷酸顺序表示.
(2)说明生物共有一套遗传物质.从进化角度看,这些生物具有共同祖先,彼此之间存在一定的联系.
基因是指染色体上决定生物性状的DNA小片段;性状是指生物的形态特征,生理特性和行为方式.性状是由基因控制的.把人的抗病毒干扰素基因植入烟草细胞中的DNA分子上,使烟草获得了抗病毒的能力,表明,烟草体内产生了抵抗病毒的抗体.
(3)转基因技术的第一个浪潮是医药转基因技术,主要利用乳房生物反应器,生产药物,应用转基因技术生产重组疫苗、抑生长素、胰岛素、干扰素、人生长激素等.基因治疗是将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用,从而达到治疗疾病目的生物医学高技术.转基因技术的第二个浪潮发生在农业领域,包括农业转基因动物、植物及微生物的培育,特别是转基因作物发展速度最快,培育了一批具有抗虫、抗病、耐除草剂等性状的转基因作物,目前转基因技术正在朝着改善农艺性状如光合效率、肥料利用效率、抗旱耐盐和改善品质等方向发展.转基因技术还可用于环境保护,如污染物的生物降解;用于能源生产,如利用转基因生物发酵酒精;用于新材料领域,如利用转基因生物生产高价值的工业品.
故答案为:
(1)遗传密码;
(2)共同的原始祖先;
(3)将抗病毒基因嫁接到水稻中,形成抗病毒水道新品种;将人的血型基因嫁接到猪体内,培育人血的猪;将干扰素基因嫁接到细菌体内,培育出能产生干扰素的细菌.(其他答案合理也可得分).

点评:
本题考点: 转基因技术的应用;生物技术的发展对人类未来的影响.

考点点评: 转基因技术应用于实践,将给农业、医药等诸领域带来革命,目前已取得了许多成就.此部分也是经常考查的热点问题.