荧光定量PCR溶解曲线问题

五儿_pixy2022-10-04 11:39:541条回答

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烽火伊比利亚 共回答了23个问题 | 采纳率87%
通过你的描述目前还有很多信息不实很了目的片段长度?PCR反应条件?管家基因的溶解曲线怎么样?做的什么实验?是否将产物跑了电泳,条带怎么样?你可以将上述问题整理一下在一些专业性较强的生物论坛发帖子让其他大神帮你分析一下.比如丁香园、生物秀等等.
出现怪异的溶解曲线大部分都是机器设置或者反应体系的问题,建议:
1、将扩增产物跑一下电泳,看一下目的条带亮不亮
2、一般定量PCR扩增后目的片段的峰在80~90℃之间,反应条件确认一下设置是否有问题
3、适当增加模板量或者减少引物浓度.
4、用的是哪个公司的酶?问一下这个公司的技术支持
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爱你没距离1年前2
wofeizai 共回答了14个问题 | 采纳率85.7%
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品的初始模版.