易错PCR的问题在设计时会加明胶,MnCL2,dCTP,dTTP,这些普通PCR不会用到的底物,都有什么作用啊~可能前面

hvbcdy2022-10-04 11:39:542条回答

易错PCR的问题
在设计时会加明胶,MnCL2,dCTP,dTTP,这些普通PCR不会用到的底物,都有什么作用啊~
可能前面说的不清楚,在易错PCR中也加dNTP的~而又多加了前两者~

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ppshanghai 共回答了16个问题 | 采纳率93.8%
Mn2+ 代替Mg2+,降低PCR的保真性
dCTP,dTTP,改变四种dNTPs的平衡,降低扩增保真性.
1年前
520ilyxlx 共回答了18个问题 | 采纳率
MnCL2是很多缓冲液要用到的。控ph。
dCTP,dTTP 怎么用不到?当然要用到了~还有A和G也要。否则怎么PCR
1年前

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tracy_zzzz 共回答了13个问题 | 采纳率84.6%
将一次PCR扩增得到的有用突变基因作为下一次PCR扩增的模板,连续反复地进行随机诱变.
正常PCR与易错PCR条件比较的不同
可爱宝贝11年前1
zxcyzw 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
(1)易错PCR的4种dNTP浓度不相同,和(或)浓度过高
(2)易错PCR中Mg2+浓度很高
(3)易错PCR中反应时间过长
(4)易错PCR循环次数过多
(5)易错PCR在70度时体系的pH超过6.0
除此以外,引物设计不合理(比如GC比例过高或过低,与非特异序列同源性过高还有碱基的随机性不强等)模板长度不足或过长,buffer放置过久等等均可引起

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