巢式PCR,阴性对照出现非特异性扩增问题
![](images/u2507.png)
巢式PCR,阴性对照出现非特异性扩增问题
第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照
第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照
第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照产物做的模板,按理说不应该有那个100bp的抹带.如果是非特那4、5泳道却没有.引物二聚体也不应该有100bp大吧~
这个是什么,应该怎么消除
第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照
第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照
第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照产物做的模板,按理说不应该有那个100bp的抹带.如果是非特那4、5泳道却没有.引物二聚体也不应该有100bp大吧~
这个是什么,应该怎么消除
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共2条回复
漂流的孤独心 共回答了21个问题
|采纳率76.2%- 第六道的条带并不是扩增产物.
在进行第二轮扩增的时候,需要把第一轮的产物稀释至少100倍在扩增. - 1年前
lily0602 共回答了3个问题
|采纳率- 那应该就是引物。那么下面又有弥散,位置不准了
- 1年前
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巢式PCR通过两轮PCR反应,使用两套引物扩增特异性的DNA片断.第二对引物的功能是特异性的扩增位于首轮PCR产物内的一段DNA片断. 第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在内引物的存在下进行第二轮扩增.从而提高反应的特异性.1年前查看全部
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