紫外分光光度计和紫外可见分光光度计的区别

首先本质区别是：紫外分光光度计主要做定量分析,通常用作物质鉴定、纯度检查,有机分子结构的研究.
红外分光光度计主要做定性分析,推测化合物的类型和结构.
检测波长范围完全不一样.
红外分光光度计一般指的是指2.5-50微米（对应波数4000--200厘米-1）之间的中红外光谱,这是研究研究有机化合物最常用的光谱区域.红外光谱法的特点是：快速、样品量少（几微克-几毫克）,特征性强（各种物质有其特定的红外光谱图）、能分析各种状态（气、液、固）的试样以及不破坏样品.红外光谱仪是化学、物理、地质、生物、医学、纺织、环保及材料科学等的重要研究工具和测试手段,而远红光谱更是研究金属配位化合物的重要手段.

原因很多,一般有以下两点
（1）选用的参照吸光度比样品要大,特别是在做连续测定时,在使用同一参比的情况下,出现这种情况十分正常,此时需要针对每一分样品对应的条件配置参比.
（2）电压不稳.在调零的时候电压与测定时电压不同会出现偏差,当电压波动过大即会出现负值.

B 是对的,C有点擦边
紫外分光光度计检测的是分子在紫外-可见光范围的吸收光谱,其本质是分子受到紫外-可见波段的电磁辐射后,其电子态从基态激发到激发态.

光谱带宽越小理论上说输出的单色光纯度越纯,但是光谱带宽越小会导致单色器输出的光的能量以平方倍数减少,如果用2nm时能量为1 那么 1nm时能量只有1/4 0.1nm时能量只有1/400 这对于仪器的设计要求很高,信号小了,噪声不变,信噪比下降,所以测量数据准确性会有影响.所以做测试不要追求过小的带宽,够用就好.
还有你的液相色谱仪紫外检测器的光学器件有可能是CCD的,一般一个时刻同时能读出所有所有波长数据的都是CCD的,对于CCD这种结构的光学系统的光谱带宽不可能做的很小.原因是CCD一般最大不会超过512-1024线,190-1100nm的光带打到这1024个点上一般1个点上就是一个多nm的宽度,再保守些就是4-8nm了

1．调整 （1） 在接通电源前,应对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固,接地线通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源.（2） 将灵敏度旋钮调至“1”档（放大倍率最小）.调波长调节器至所需波长.（3） 开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右,预热20min .根据溶液浓度大小,选择液层厚度合适的吸收池.2．校正 （!）打开吸收池暗室盖（光门自动关闭）,调节[0% T]旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收池盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光率[100% T] 旋钮,使数学显示为“100.0”.（2）如果显示不到“100”,则可适当增加电流放大器灵敏度档数,但应尽可能使用低档数,这样仪器将有更高的稳定性.当改变灵敏度 后必须重新校正“0”和“100”.（3）按（1）连续几次调整“00.0”和“100.0”后,如将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使数字显示为“.000”,即可进行下面吸光度A的测量；如将选择开关置于“C”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值,即可进行下面浓度c的测量.3．测定 （１） 吸光度Ａ的测量.将要测Ａ的试样溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值Ａ.（２） 浓度c的测量.将要测c试样溶液推入光路,即可读出待测样品的浓度值c.4．结束 测量完毕,关闭电源,将各调节旋钮恢复至初始位置.取出吸收池洗净,晾干,存于专用盒内.注意事项：（１） 使用前,使用者应该首先了解本仪器的结构和原理,以及各个旋钮之功能.（２） 仪器接地要良好,否则显示数字不稳定.（３） 如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间）,当稳定后,重新调整“00.0”和“100”即可工作.（４） 仪器左侧下角有一只干燥剂筒,应保持其干燥,发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用.（５） 当仪器停止工作时,关掉电源,电源开关需同时切断,并罩好仪器 希望以上对你有所帮助.

是不是样品没摇匀.或者中间所用的试剂有问题,如果这些都没有问题,那就是分光光度计有问题啦

是属于室内环境空气质量检测报告
质检站的表格.

你没有说明检测时所用的波长,所以不能具体判定,但是如果用UV的话很有可能是比色皿的原因.石英玻璃可以完全透过紫外光和可见光（200～1000mn）,普通玻璃都不能透过紫外光（200～360mn）,但可以透过可见光（360～1000m...

只要换一个吸收池就可以,有专门的吸收池,1、2cm的都可以放.

这要看检测什么什么物质,每种物质都有一个最佳浓度.

可以这样放：
1、原吸（隔壁为气相）
2、气相,将来可把液相放这儿（如没有房间的话）
3、天平一起放吧（百分之一的可放在样品处理间）
4、分光光度计可与酸度计、浊度仪、离心机等一起.
5、微波最好放在通风柜里,或者与马富炉、烘箱一起放
6、纯水机如也用来制备洗涤用水的话放在洗涤室,否则放在常规理化检测室吧
7、气瓶最好一起放,要离原吸与气相最近.
反正原吸和气相最好不要放在一起,因为原吸的操作对环境温度有影响
如果想了解更多的实验室仪器,可以到专业的仪器网站看看,像维库仪器仪表网就不错

用的是那种提取方法?
有没有加RNase分解RNA?
我记得中间有几步很关键,再重复一遍,注意一下细节.
拖尾说明基因片段很多,可能在离心环节或是缓冲液有问题.

我觉得主要的两点区别是：
1)荧光分光光度计有两个单色器,而紫外只有一个单色器
2）荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的,而紫外是成一条直线的.
除了以上两点之外还有两点区别：3)荧光分光光度计是以氘灯做为光源,而紫外是以氢灯或氘灯作为紫外区光源,钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源
4）荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面,而紫外仅为两面为光学面.
（其实上面四点可以自己整合为两点的）

理论上讲最终测出来的数据应该相同,但前提条件是你的标准曲线和样品的测定使用的比色皿是同一个厚度的

3、操作过程
x053.1透过率、吸收度测量
a.暗电流调零：开启电源后,若试样室盖未打开,将显示提示符P.1（请做第一步骤操作）,打开试样室盖直到接触检测开关,提示符P.1消失,显示暗电流值.如果它的绝对值小于5.0,则两秒内自动归零,否则可调节面板上之0%T旋钮.
b.调整参比讯号（100T/OA）：微机所显示的提示符为P.2（请做第二步操作）.将T—A—C旋钮开关置T/A,参比溶液放进1号试样槽并移入光路,关闭试样室盖,显示参比讯号强度,调整狭缝和光楔（试样槽拉手左面之100%T旋钮）,使显示数在90.0—119.9%T或相应A值范围以内,2秒以内将自动调整为100%T/OA.
x05 c.比色皿误差校正：为校正比色皿的系统误差,要求在同一次测量过程中,比色皿与槽位编号一一照应.将使用的比色皿盛参比溶液放进试样槽,移入光路,所显示的T（或A值）就反映了该与1号槽中比色皿之间的配对误差.按一下ADJ（Adjust）校正键,则误差数据存入微机并自动校正为100%T/OA.这项操作在每次开机后只需作一次,若所用的比色皿配对性很好,可免去这一步骤.开机时,校正系数初始值为1,即相当于不校正.
d.用同比色皿盛被测溶液放进同一试样槽,则显示校正后的透过率或吸光率.
x053.2浓度测量
a.标准对照法
b.按3.1节（1）—（3）操作.
x05c.将标准浓度的样品放如光路.
x05 d.旋钮开关至C,分别按三个浓度置数键,使显示数与已知浓度值一致,浓度值仅取其三为有效数字,小数点位置自定义.
e.将被测式样移入光路,则显示样品的浓度（比色皿误差已校正）.
3.2标准曲线法（标准曲线为直线）
a.按3.1节（1）—（3）操作.
x05b.旋钮至A,调整光楔使A值变化至标准曲线高端某一点的坐标A0.
c.旋钮至C,按浓度置数键显示数与对应于A0的浓度值C0一致.
d.重新调整对比讯号后按（1）之（4）操作.
x053.3测试完毕,依次关闭主机电源开关,电气箱开关,拔下电源插头,盖上护罩.
x053.4认真填写使用操作记录.

如果是普通分光光度计,那就需要一个试剂盒,不过我不知道质粒应该用什么样的,可以去生物公司销售人员问一下.
具体操作步骤：1、按照试剂盒说明书配出待测液.2、常规分光光度计使用方法,很多人都会.主要步骤包括调零、调标准、检测三部

可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右,紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm.从这点区别上看就是波长的适用范围不一样,紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长.正式由于这段紫外光的区别,就决定了他们的仪器结构部件有一些不同了,他们的不同之处主要在于以下几个地方：
1、光源不同：可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯+氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件.这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端.也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了.
2、光学器件的不同：由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件.同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了.
3、接收器的不同：由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了.多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了.

可见分光光度计和紫外可见分光光度计与双光束紫外分光光度计吸收波长范围不同,可见波长范围400-800nm,紫外200-400nm,紫外-可见200-800nm.
原子吸收分光光度计和紫外-可见分光光度计的原理不同,原子吸收分光光度法是根据蒸汽中被测元素的基态原子对特征辐射的吸收来测定试样中该元素含量的方法

一般叶绿体浓度可调制在每毫升0.1mg叶绿素为宜.
测定方法如下:
取50ul叶绿体悬浮液.溶于20ml 80%丙酮,离心除去沉淀,清液在分光光度计652nm比色(光径1cm),测出的光密度值乘以100/g即为叶绿体悬浮液中叶绿素含量(mg/ml)
之前需分离和制备叶绿体悬浮液,这个就不用多说了吧.方法有多种,常用分步差速离心的方法.

去仪器网问吧,那里高手多
instrument.com.cn

使用前仪器要调零、调百校准,参比溶液又称空白溶液.测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液.通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线.有时,基体中虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试.经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去.否则将影响测定结果.在色谱分析中,有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰,计算机在数据处理中不会计入它们,不影响测定.
以所含铁离子是多少为例：
参比溶液与测量溶液就相差铁离子含量,在测量之前要用不含铁离子的参比溶液扫描,调整仪器后（调100的过程）,然后再测量含铁离子溶液的比色皿,这样测量溶液中的铁离子会形成自己特定的峰值,次峰值与数据库里基准峰值对比就可以得出溶液所含量了.如果数据库中没有铁离子的曲线,你还要自己先用不同铁离子浓度的溶液做工作曲线,然后进行测量.

紫外分光光度计要求被测物分子结构里边有共轭体系,因此肯定不行的哈.

在原子吸收光谱中 单色器的作用是把特征谱线与邻近谱线分开.所以得在进入检测前 火焰之后
而在紫外分光中是把光源的光在通过试样之前使其转变成特征光
然后检测

都是分光光度计 紫外的偏向短波分光 红外的偏向长波分光 根据需要测的光的偏向选用不同的分光

可以的,520在可见光的光谱范围内

OD260是测核酸,1个OD260值相当于40μg/mLRNA或50μg/mLDNA.
OD280 是测蛋白的,芳香族氨基酸在280nm处有紫外吸收,在0.1-1mg/ml范围内,蛋白含量与吸光度成正比（这样测出的为估计值）.
OD230测盐浓度,小分子等
各种比值反应纯度,纯的DNA OD260/OD280≈1.8,小的话有蛋白污染,大的话有RNA污染；纯的RNA OD260/OD280≈2.0；OD260/OD230应大于2,OD260/OD230

不同的物质方法是不同的
如果是紫外吸收(波长小于350nm)经过稀释可以直接测量吸收度经过回归曲线计算再乘以稀释倍数,除以取样量就得到含量了
如果是可见光（波长大于350nm）经过一定方法显色后测量吸收度经过回归曲线计算再乘以稀释倍数,除以取样量就得到含量了

两种仪器的原理完全不同.
荧光分光光度计由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来.
紫外分光光度计是根据朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)光吸收的基本定律,即物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量.
通俗的说,荧光分光光度计是测样品中物质被激发出了光能量,紫外分光光度计是测样品中物质吸收了光能量,原理完全不同.

参比溶液又叫空白溶液,可用于校正仪器透光率100%或吸光度为零.由于测量吸光度,必须将溶液装在有透明材料制成的吸收池内,测量师必将发生与池壁的相互作用,在每个界面上因反射或可能的吸收而使投射光强度减弱.此外,当光束通过溶液时由于大分子或不均匀性而引起的散射及溶剂和试剂的吸收都会使光强减弱,吸光度升高.因此为了使光的强度减弱仅与溶液中待测物质的浓度有关,必须读一这些影响进行校正.为此,采用光学性质相同、厚度相同的吸收池装入空白溶液作为参比,调解仪器.使透过参比池的吸光度为0或透光率为100%.然后将装有待测溶液的吸收池移入光路中测量,得到被测物质的吸光度.这就是说,通过参比池的光强作为测量溶液的入射光强度,这样测得溶液的吸光度比较真实地反映了被测物质对光的吸收,即比较真实地反映了被测物质的浓度.
简而言之,由于溶剂也会产生一定的吸光度（虽然很小,但毕竟是有）,用溶剂做参比就是为了消除溶剂对吸光度结果的影响.用什么样的试剂溶解待测样品,就要用什么试剂作为参比.
用石油醚做参比的具体操作方法是：待测样品应是石油醚溶液.首先选择透光率相同,即吸光度相同的参比池.将仪器调零.将参比池之中装入石油醚,放入紫外分光光度计之中,测得吸光度后将仪器调零；然后取出参比池,将待测样品的石油醚溶液装入另一个吸收池,放入一其中测定其吸光度,得到的就是待测样品的吸光度了.

铬可以用紫外测，农业部的标准，NY/T1121.12-2006
其他的用原子吸收

1.工作曲线的绘制：分别取0、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL、铁标准溶液（Fe0.01mg/mL）于7个50mL容量瓶中,加水至约20mL,加入0.5mL硫酸溶液（1：35）,加入3mL抗坏血酸溶液（20g/L）、5mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液（pH4.5）、2mL邻菲啰啉溶液,用水稀释至刻度,摇匀,于室温下放置15min,在分光光度计510nm处,用1cm比色皿,以空白调零测得吸光度,以测得的吸光度为纵坐标,相对应的Fe 质量（ug）为横坐标绘制工作曲线.
2.测定：称取样品1-10ml于250mL高型烧杯中,加入硝酸-高氯酸（4：1）20-30mL盖上表面皿,置于电热板上加热消化至溶液无色透明为止,取下冷却至室温,用（1:3）氨水或（1：35）硫酸调pH值接近2,转移至50mL容量瓶中,加入3mL抗坏血酸溶液（20g/L）、5mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液（pH4.5）、2mL邻菲啰啉溶液,用水稀释至刻度,摇匀,于室温下放置15min,在分光光度计510nm处,用1cm比色皿,以空白调零测得吸光度.

首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些.它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器.
核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能.可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA.核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm.每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同.定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数.如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig.测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度.测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液.然而,实验并非一帆风顺.读数不稳定可能是实验者最头痛的问题.灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大.
事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度.如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%（1A）.这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的.另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等：在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大稳定读数.样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品.这些小颗粒的存在干扰测试效果.为了最大程度减少颗粒对测试结果的影响,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值最好在0.1-1.5A.在此范围内,颗粒的干扰相对较小,结果稳定.从而意味着样品的浓度不能过低,或者过高（超过光度计的测试范围）.最后是操作因素,如混合要充分,否则吸光值太低,甚至出现负值；混合液不能存在气泡,空白液无悬浮物,否则读数漂移剧烈；必须使用相同的比色杯测试空白液和样品,否则浓度差异太大；换算系数和样品浓度单位选择一致；不能采用窗口磨损的比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项.
除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）.如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A320一般是0.
分光光度计的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯.根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等.一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定.因为反应中的染料（如考马斯亮兰）能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯.而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品.
由于另外测试的样品量不同,所以一般分光光度计厂家提供不同容积的比色杯以满足用户不同的需求.目前市场已经存在一种既可用于核酸、紫外蛋白质定量,亦可用于蛋白比色法测定的塑料杯,样品用量仅需50μl,比色杯单个无菌包装,可以回收样品.如Eppendorf UVette®塑料比色杯,是目前比色杯市场上一个革新.随着生命科学以及相关学科发展,对此类科学的实验研究提出更高的要求,分光光度计将是分子生物学实验室不可缺少的仪器,也成为微生物、食品、制药等相关实验室的必备设备之一.
当然,随着科技的发展,现在比色杯已经不是使用分光光度计时的必备物品.目前国外Nanodrop公司（现已被Thermo Fisher公司收购）生产的ND1000分光光度计与旧式分光光度计相比,已经可以做到无需稀释样品,无需使用比色杯,每次测量仅需1-2μl样品即可完成测量.

不能直接测,因氯离子在190nm以上无紫外吸收.
最好用摩尔法滴定.

做一个梯度浓度的硫酸铜溶液,制作标准曲线,然后测样,计算就可以了.

一般紫外好像不行,因为一般紫外都是测定共轭体系价电子的跃迁,所以甲醇好像不行

DNA的碳环结构使它在OD260处有特异吸收,对标准样品来说,浓度为1μg / ml时,当OD260＝1时,dsDNA浓度约为50μg / ml
ssDNA浓度约为37μg / ml
RNA浓度约为40μg / ml
经验值：
纯DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9,表明有RNA污染；＜1.6,表明有蛋白质、酚等污染）
纯RNA：1.7 ＜OD260/OD280＜2.0（＜1.7时表明有蛋白质或酚污染；＞2.0时表明可能有异硫氰酸残存）

可以.DNA的碱基在260nm处有吸收.用紫外分光光度计测260nm处DNA分子的OD值,就能通过朗伯-比尔定律OD=εlc换算出浓度.式子里l是吸收光路的长度；c是浓度,单位一般用μg/ml；ε是吸光系数,双链DNA一般取0.02ml/(μg·cm),单链DNA因为增色效应,ε要大一些,取0.05ml/(μg·cm).
如果知道一个DNA片段的碱基数,还可以换算出DNA片段的物质的量浓度.

可以,不过需要配置标准溶液进行标准曲线的确定 用水作参比溶液

254nm

用比色法

测的东西不一样么,紫外主要用紫外和可见两个区域,原子需要用到红外

准确的来说,不是仪器的结构有何不同,而是仪器的工作原理有本质上的不同,激发源不同,特征谱线不同,采集分析的检测器也有区别

OD是optical density（光密度）的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,OD=lg（1/trans）,其中trans为检测物的透光值.
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系.

紫外吸收光谱曲线本是物质的特征之一,但不同紫外分光光度计的精度、狭缝宽度有所不同,故得到的吸收光谱曲线精细轮廓略有不同,最大吸收波长也因波长精度不同而略有差异.

在一组100ml容量瓶中,加入 0、1.00、2.00、4.00、7.00、10.00ml铬标准溶液（2mg/L).
分别加入1ml硫酸溶液(1+1),加水至约90ml,加3ml二苯碳酰二肼乙醇溶液,用水稀释至刻度,摇匀.
使用分光光度计,在540nm波长下,用3cm吸收池,以水为参比测量其吸光度.
以铬含量为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制工作曲线.

在pH=2～9的溶液,Fe2+与邻二氮菲(Phen)生成一种稳定的橘红色螯合物Fe(Phen)32+,其稳定常数为2.0×1021,εmax=1.1×104 mol×L-1×cm-1.邻二氮菲与Fe3+也能生成配位比为3:1的淡蓝色螯合物,在显色前要用盐酸羟氨将Fe3+全部还原为Fe2+.
用邻二氮菲法测定铁时,在测定前要加入盐酸羟氨溶液,目的是将溶液中所有的铁全部转化成二价铁,以防止三价铁干扰测定.若盐酸羟氨溶液若不是新配制的,则三价铁不能全部转化成二价铁,所测铁的含量偏小.
测定方法,先用以上方法作出不通浓度含量的标准曲线,然后取待测液在用光度法对比,在曲线上找到待测液的浓度.

我是学生物技术的,所以在实验中常用于测核酸和蛋白质浓度,因为核酸中含有共轭的碱基,蛋白质中含有一些芳香族氨基酸（含有共轭双键）,蛋白质与核酸的浓度在260 nm处与紫外吸收波长成正比,蛋白质在280nm处有吸收峰,有公式计算：DNA浓度（ng /µL）=OD260×50×稀释倍数
当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高
当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高
当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯

2ml 到100ml 稀释50倍
25ml到 50ml 稀释2倍
加在一起就是50*2=100倍

是紫外区(190-339nm)不稳定,还是可见区（340-1100nm）不稳定?
紫外区不稳定的话,不放样品是否稳定,不放样品也不稳定需要换氘灯.
可见区不稳定的话可能是钨灯坏了.
如果你的仪器使用好几年了,首先需要确定的是否是灯坏了.
你还可以选择“校刻系统”一次,看自检过程中是否有提示.
最好可以和厂家联系获得帮助.