无菌操作用超净工作台需要小门操作口吗

主要怕污染到培养物.一,有可能直接进入到培养物中,二,污染到培养器具的表面,待转移培养物时,也有可能污染到培养物,甚至还会污染到洁净室或生物安全柜,破坏无菌环境.

干热湿热灼烧 物理化学

培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上,这个过程叫做无菌接种操作.在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作.
实验台面不论是什么材料,一律要求光滑、水平.光滑是便于用消毒剂擦洗；水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致.在实验台上方,空气流动应缓慢,杂菌应尽量减少,其周围杂菌也应越少越好.为此,必须清扫室内,关闭实验室的门窗,并用消毒剂进行空气消毒处理,尽可能地减少杂菌的数量.
空气中的杂菌在气流小的情况下,随着灰尘落下,所以接种时,打开培养皿的时间应尽量短.用于接种的器具必须经干热或火焰等灭菌.接种环的火焰灭菌方法：通常接种环在火焰上充分烧红（接种柄,一边转动一边慢慢地来回通过火焰三次）,冷却,先接触一下培养基,待接种环冷却到室温后,方可用它来挑取含菌材料或菌体,迅速地接种到新的培养基上.（图3－4）然后,将接种环从柄部至环端逐渐通过火焰灭菌,复原.不要直接烧环,以免残留在接种环上的菌体爆溅而污染空间.平板接种时,通常把平板的面倾斜,把培养皿的盖打开一小部分进行接种.在向培养皿内倒培养基或接种时,试管口或瓶壁外面不要接触底皿边,试管或瓶口应倾斜一下在火焰上通过.

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　　微生物检验操作中怎样保证无菌操作?安徽人和净化为您介绍微生物检测无菌操作要求：
　　微生物实验室工作人员,必须有严格的无菌观念,许多实验要求在无菌的条件下进行,主要原因,一是防止试验操作中人为污染样品,二是保证工作人员安全,防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染.要求如下：
　　1.1 接种细菌时必须穿工作服、带工作帽；
　　1.2 进行接种食品样品时,必须穿专用的工作服、帽及拖鞋,应放在无菌室缓冲间,工作前经紫外线消毒后使用；
　　1.3 接种食品样品时,应在进无菌室前用肥皂洗手,然后用酒精棉球将手擦干净；
　　1.4 进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开包装未使用完的器皿,不能放置后再使用,金属用具应高压灭菌或用酒精点燃烧灼三次后使用；
　　1.5 从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及试管或平皿边；
　　1.6 接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作,接种细菌活样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒；
　　1.7 接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝,必要时还要烧到针和环与杆的连接处,接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min,再经火焰烧灼；
　　1.8 吸管吸取菌液或样品时,应用相应的橡皮头吸取,不得直接用口吸.
　　以上由安徽人和净化为您整理,

无菌是指在环境中一切有生命活动的微生物的营养细胞及其芽孢或孢子都不存在的状态.在微生物实验中,操作的目的在于防止待接种细菌被杂菌污染.只有在培养基、实验器皿等处于无菌的前提下,才能保证菌种不被污染.
接种细菌时,应注意以下几项：
（1）在超净工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等
（2）应在酒精灯火焰前操作
（3) 取菌种前灼烧接种针或接种环（要烧红）
（4）烧红的接种针（环）稍事冷却再取菌种,以免烧死菌种
（5）接种后应尽快塞上棉塞
总之,一句话,尽可能防止杂菌污染!

解题思路：题图表示花药离体培养法，其中a→b表示脱分化过程，b→c表示再分化过程，d中形成的幼苗是由花粉直接发育而来的，属于单倍体幼苗．

A、a表示花粉细胞脱分化形成愈伤组织，故A正确．
B、花粉细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，细胞不断通过有丝分裂进行增殖，故B正确．
C、决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协调作用在组织培养过程中非常重要，故C错误．
D、试管苗需要光照合成叶绿素，也需要光照进行光合作用合成有机物，故D正确．
故选：C．

点评：
本题考点： 植物培养的条件及过程．

考点点评： 本题考查植物组织培养过程的相关内容，意在考查考生的识图能力、识记能力和理解能力．

一般情况下所有操作都是在照过紫外照射过的无菌操作台进行的 ,所用枪头,接种环和涂布棒等都是经过高压灭菌的,但是培养基如平板在空气中暴露一会一般也不会污染.希望可以帮到你.

DNA比较顽强,如果你的后续实验要求不是十分严格的话,通常都不需要无菌操作.

微生物的培养的过程都是是无菌操作,你如果不无菌操作,那培养的结果就不准确,就没有培养意义了.

解题思路：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，接种的方法一般有平板划线法和稀释涂布平板法．本实验还应该设置对照实验，应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养，还要对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基灭菌彻底．

（1）制备牛肉青蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．
（2）培养基一般含有水、无机盐、碳源、氮源．还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，培养基在分装前往往要进行高压蒸汽灭菌．
（3）因为此样品用固体培养基接种且培养一段时间后，培养基表面长出菌落，所以接种最好采用稀释涂布平板法．
（4）本实验设计中的一个明显错误是没有设置对照实验，应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养．
（5）参与果醋制作的是醋酸菌；参与酸奶生产的是乳酸杆菌．
故答案为：
（1）倒平板
（2）碳源 氮源 特殊营养物质 高压蒸气灭菌
（3）稀释涂布平板法
（4）没有设置对照实验
（5）醋酸菌 乳酸杆菌

点评：
本题考点： 微生物的分离和培养．

考点点评： 本题以中药牙膏为素材，考查微生物培养及实验设计的相关知识，要求考生识记培养基的制备步骤、培养基的成分及灭菌方法和接种方法；要求考生掌握实验设计的原则，特别是对照原则和单一变量原则，能对实验进行完善．

要看你是用于细胞培养,还是微生物培养.
细胞培养的培养基如果是买的液态的培养基可以直接用,基本是无菌的.如果是粉末的自己配好以后成为溶液后,在无菌操作台用过滤器过滤,装培养基的瓶子要高压灭菌.
微生物培养的话,皿（根据是玻璃的还是塑料的考虑是干热还是高压灭菌.）.培养基配好放入锥形瓶,瓶口用棉花轻微塞住,不能塞死了（防止液体沸腾冲出）,然后用报纸包住瓶口,绳子系好,高压灭菌.然后无菌操作分装铺满.
具体你还可以参考丁香园和小木虫.

在开无菌操作台上抽风器,点燃酒精灯,酒精擦手,杀菌；
将东西都放在距离自己最近处,防止因为远距离拿仪器而被细菌污染.
要用仪器时,仪器要用酒精浸泡燃烧杀菌,
在酒精灯旁进行.打开培养皿盖的角度要小.

空气中有很多我们看不见的细菌,实验中如果不注意,空气中细菌落入培养皿,杂菌会影响实验效果.我们有次实验没有注意无菌操作,结果长了一些毫不相干的菌落,造成实验误差.

植物外植体消毒和接种：
用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体.在组织培养中,外植体如果是带菌的,在接种前都必须进行表面消毒,这是取得培养成功的最基本的和重要的前提.常用消毒剂对外植体进行消毒.从室外取的材料,一般先用自来水冲洗数分钟,对表面不光滑或长有绒毛等结构不容易洗净的材料,自来水冲洗的时间要长,几个小时或过夜,并且用洗衣粉或洗洁精洗涤,必要时用毛刷刷洗.洗后的材料用滤纸擦干,然后浸泡在消毒溶液中.接种材料使用消毒剂后,要用无菌水洗涤3～5 遍,最后用无菌纸擦干净.使用消毒剂的原则是既要达到消毒目的,又不能损伤植物组织和细胞,还要符合就地取材的原则.对一些容易污染、较难灭菌的外植体进行表面消毒时,用单一消毒剂不能收到好的效果,所以常选用两种消毒剂交替浸泡法.一般,首先用75％乙醇浸泡外植体数秒钟至30s,然后置于0.1％氯化汞溶液5～10min 或含有2％活性氧的次氯酸钠溶液5～30min,然后用无菌水洗涤.有时在氯化汞或次氯酸钠灭菌后,用无菌水洗,进一步剥去几层组织或器官如叶片后,再用次氯酸钠灭菌3～5min,无菌水漂洗3 次后,切割、用于接种.
用消毒剂对接种材料进行灭菌处理时,可以在灭菌溶液中加入1～2 滴表面活性剂,如吐温80或吐温20,它们可以湿润外植体整个组织,促进灭菌液充分接触表面组织,达到较好的消毒效果.有时还可以用磁力搅拌、超声振动等方法使消毒杀菌剂进入外植体.消毒溶液对外植体消毒是在超净工作台上进行.完成表面消毒的接种材料要尽快放置于培养基中.
植物外植体消毒和接种(以胡萝卜为例)：
1 ．接种前,用75 ％乙醇棉球或用2％苯扎溴铵溶液擦拭超净工作台台面,将培养基及用具放入工作台,开超净工作台紫外灯照射至少20 min,然后开送风开关,之后关闭紫外灯,通风10 min后,再开日光灯进行无菌操作.
2 ．将胡萝卜块根在自来水下冲洗干净,用小刀切去外围组织,切成小块分别放100 mL 烧杯中,用75％乙醇溶液浸泡30s,然后用0.1%氯化汞溶液分别浸泡2 、5 、10 min ,用无菌水洗涤3 次,无菌纸吸干水分.取出培养皿,剪刀和镊子使用前插入90％乙醇溶液中,使用镊子时在酒精灯火焰上炽烧片刻,冷却后,切取髓部组织0.5cm .以上操作都要在试管口靠近火焰旁.
3 ．将培养容器斜面向上,并使它们拉于水平位置,也可将培养容器放在左手中.将塞盖用右手拧转松动,以便接种时拔出.用火焰灼烧管口,灼烧时应不断转动试管口（靠手腕的动作,使试管口沾染的少量菌得以烧死）.将烧过的接种针（环）触动培养基部分,使其冷却,以免烧死被接种的外植体,然后轻轻接触外植体,慢慢将接种针（环）抽出试管,打开培养容器盖,将外植体放在培养基上,每瓶放3 块.封口,贴标签,注明姓名,标明时间和材料名称.整理好接种室（箱）的台面,搞好清洁卫生.
4 ．用水洗干净非洲澎蜞菊叶片,用滤纸擦干后置于100 mL 烧杯中,在超净工作台上加入75％乙醇溶液浸泡30s,然后用0.1％氯化汞溶液浸泡3 、5 、7 min,用无菌水洗涤3 次,将叶片切成长1cm ,按照上述同样的步骤接种于培养基上.
5 ．绿豆种子用75％乙醇溶液浸泡30 s,然后用0.1％氯化汞溶液（加入吐温2 滴）浸泡3 、5 、10 min ,期间不断搅拌溶液,用无菌水洗涤5～6 遍,洗干种子外围水分,按照上述同样的步骤接种于培养基上.

首先,接种环是要完全灼烧灭菌的.我们一般做接种挑取菌落的操作,是在打开试管塞时,让试管塞和试管口过过火焰,不像接种环烧得那么仔细.然后,挑取时,把接种环靠在试管壁上冷却之后,保持试管口在无菌区,挑取目的菌.挑取结束,再次将试管塞和试管口过火灼烧,之后盖上试管塞.斜面接种时,没有需要灼烧的仪器,但是,要保持接种过程在无菌区内.并且,操作时间越短,暴露在空气中的时间越短,污染几率越小.这里,考虑到要缩短暴露在空气中的时间,所以,有的老师不会刻意去烧试管.所谓无菌区也只是相对而言的.
你说的两种做法其实都可行,只要结果是不染菌的,就是没错的.但是如果是笔考答题,硬要有个对错的话,还是灼烧试管的做法最妥当.

用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作.
1操作前将界面上的细菌和病毒等微生物杀灭
　2操作过程中是界面与外界隔离,避免微生物的侵入

怎么又一个无菌操作的...百度百科上有的:http://baike.baidu.com/view/726427.html?wtp=tt#2

一是防止试验操作中人为污染样品,二是保证工作人员安全,防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染

教科书里面的就不列举了,
- 使用前超净工作台开15分钟紫外线
- 注意开通风
- 使用的器皿注意消毒
- 操作时戴无菌手套或并用75%酒精消毒
- 操作时尽量靠近酒精灯火焰

在植物组织培养过程中,用到富含营养物质的培养基,这是培养物得以生长.但在培养过程中,由于外植体带菌、培养瓶和各种器械面均不彻底、操作人员操作不规范等原因,使得许多杂菌进入培养基中,并在上面迅速生长.杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养,从而使其失去营养；另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质,导致其不能正常生长甚至死亡.所以要强调所用器械的缅军和实验人员的无菌操作.

灭菌法是对物品进行灭菌的方法(灭菌就是杀灭一切微生物),多指对食品、药品、器皿的灭菌方法.无菌操作是在进行实验时,为保证物品不被杂菌污染而进行的一种实验操作方式,其中穿插着一些对试验台、实验仪器、手部的灭菌...

解题思路：植物组织培养要求非常严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，培养过程中存在污染，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败．原理有以下几种：
（1）与幼苗竞争培养基中的营养，由于细菌和真菌繁殖比植物快得多，导致植株得不到营养．
（2）寄生于植物体内，利用植物细胞中的原料合成菌类自身的物质，导致幼苗死亡．
（3）寄生菌可能导致植物内部的基因改变，当这个基因是对生长必要的基因时，就导致幼苗的死亡．此外，污染菌的基因可通过某种暂时未知细节的机制转入植物细胞内并表达，从而导致培养失败．

A、不进行严格的灭菌对葡萄酒制作的影响不大，因为多数微生物不能在缺氧、酸性和含糖较高的环境中生存，A错误；
B、不进行严格的灭菌对腐乳制作的影响不大，因为腐乳制作时还需在其中放入酒精、盐和香辛料等，这些都具有杀菌作用，B错误；
C、植物组织培养要求严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败，C正确．
D、选择培养基是根据要培养的微生物的代谢特点制备的，一般的杂菌在其上面也很难生存，D错误．
故选：C．

点评：
本题考点： 植物培养的条件及过程；酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；制作腐乳的科学原理及影响腐乳品质的条件．

考点点评： 本题考查植物组织培养、果酒的制作、腐乳的制作、微生物的培养和分离等知识，首先要求考生识记植物组织培养的条件，明确植物组织培养需要严格的无菌条件；识记果酒和腐乳制作的过程和条件；掌握选择培养基的特点及作用，然后再对选项作出正确的判断．

　　最重要的就是无菌观念 污染过的东西碰了后不能再碰无菌的东西
　　比如接巡回护士东西时 给一助递手术单时 注意不要碰到他们的手
　　1）手术开始前15～20分钟洗手、穿无菌手术衣及戴无菌手套,做好器械桌的整理准备工作,检查各种器械、敷料及其他用物是否完备.根据手术步骤、使用先后把各种器械、敷料等物品分类顺序排列.
　　2）术前、术中缝合伤口时,与巡回护士准确细致地清点器械、纱布、纱垫、缝针等,核实后登记.术毕再自行清点一次,确保无误,以防遗留在体腔或组织内.
　　3）手术开始后,按手术常规及术中情况,向术者、助手传递器械、纱垫等物.做到主动、敏捷、准确.
　　4）保持手术野、器械托盘及器械桌的整洁、干燥.器械用后,迅速取回,擦净血迹.器械及用物按次序排列整齐.用于不洁部位的器械,要区别分放,浸入药液中或递给台下护士处理.防止污染扩散.
　　5）随时注意术中的进展情况,若发现大出血、心跳骤停意外时,应沉着果断及时与巡回护士联系,尽早备好抢救器械及物品.
　　6）保留切出的任何组织,需送检部分用10％福尔马林固定,术毕写上病人姓名、病室、日期等并填好送留标本登记簿.
　　7）术毕协助擦净伤口及引流管周围的血迹,包扎伤口及固定好各种引流物.
　　8）处理术后器械及其他物品.精密、锐利手术器械分别处理,切勿损坏及遗失零件.并对手术间进行清理整顿.

实验器材需要按照要求严格消毒，实验环境需要消毒彻底。

火焰横着也没什么关系啊,烧什么还是照样烧啊!接菌什么的只有在火焰附近就没什么问题了的啊!都没有多大影响的!习惯就好了!没事的!不行你就要求换个超净工作台吧!双人的那种会好一点点!

对繁殖能力强的要用点接法,将接种针沿斜面点3之5点,
对繁殖能力不强的用“s形”划线法