基因敲除实际上是删除某个基因,从而达到使该基因沉默的目的 .利用基因敲除技术,不能修复细胞中的病变基因.请问这两句话错在

不一定敲除的是性腺细胞,常染色体无法遗传

I once had the laboratory for around a year to experience,although was all some small items,was subjected to a benefit to me what to do not- shallow,I mainly once did gene to knock in addition to(gene deletion) and the experiment of the fluorescence metered pcr(real-time pcr).
我有过一年左右的实验室经历,虽然所做的都是一些小项目,但对我受益非浅,我主要做过基因敲除(gene deletion)和荧光定量pcr(real-time pcr)的实验.

明确告诉你是同源重组

看你准备用什么系统来做敲除了.
原则上,不同系统对于同源臂长度要求不同,根据这个来设计引物.
做敲除一般启动子等元件无需考虑

解题思路：1．常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．作为运载体必须具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存．②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．
2、目的基因导入到受体细胞中，不同细胞方法不同，如植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法．动物细胞：显微注射技术．微生物细胞：用Ca2+处理细胞．

（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．
（2）基因工程中最理想的受体细胞是受精卵．将目的基因导入动物细胞的方法是显微注射技术，操作程序：目的基因表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的子宫或输卵管内发育→新性状动物．
（3）利用上述途径获得的动物，其后代不是每个后代都含有目的基因的，因为在形成生殖细胞时，等位基因会发生分离，产生的生殖细胞中由部分没有其目的基因．
故答案为：
（1）运载体
（2）受精卵；显微注射法
（3）否，在形成生殖细胞时等位基因会发生分离．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题着重考查了基因工程等方面的知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．

（1）胚胎干细胞可以从早期胚胎或原始性腺中分离得到．
（2）基因工程用到的工具酶包括限制酶和DNA连接酶；基因是控制生物性状的基本单位，当neo^R基因插入靶基因后将导致靶基因的结构被破坏，失去原有的结构和功能．所以靶基因失活”的含义是 　　靶基因中的脱氧核苷酸序列发生改变，不能表达．
（3）从图解中可以看出，失活靶基因与正常靶基因是同源互换，故两者互换片段属于基因重组；因为neo^R基因是新霉素抗性基因，经处理后的胚胎干细胞获得了neo^R基因，所以能在含新霉素的培养基上生存，而未经处理的胚胎干细胞在此培养基上无法生存，故“特定培养基”需加入新霉素才能起到选择作用．
（4）培养图示中胚胎干细胞所获得的“基因敲除”小白鼠不能直接用于研究基因功能，因为该小白鼠体内仍有一个正常的靶基因，也可能表达性状．
故答案为：
（1）早期胚胎或原始性腺
（2）限制性核酸内切酶（或限制酶）　　DNA连接酶 　　靶基因中的脱氧核苷酸序列发生改变，不能表达
（3）基因重组 　　新霉素
（4）不能 因为该小白鼠体内仍有一个正常的靶基因，也可能表达性状

如果你的目的是让目的基因不表达,抗性基因自带启动子不需要考虑移码突变
你的抗性基因表达是从启动子开始的,与之前乱七八糟的无关.
部分代替,效果不一定一样,因为部分表达的基因有些是有可以保留部分生理功能的.