双抗夹心ELISa的步骤是什么?

taroman2022-10-04 11:39:541条回答

双抗夹心ELISa的步骤是什么?
有的原理上说是（1）单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色.但是我看论文上都是（2）单抗包被-抗原-二抗-酶标二抗-底物显色.请问到底是什么?本人对双抗夹心ELISA不太懂.

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飘满天共回答了18个问题 | 采纳率94.4%: （1）单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色.
本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品中有相应抗原存在,即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合,经保温孵育洗涤后,即可加入酶标记特异性抗体,再经孵育洗涤后,加底物显色进行测定,底物降解的量即为欲测抗原的量.
（2）单抗包被-抗原-二抗-酶标二抗-底物显色.(改良双抗体夹心法)
本法首先是将特异性抗体a包被于固相载体,经洗涤加入含有欲测抗原之待检样品.经孵育洗涤后再加一次未标记的特异性抗体b,而这次加入的抗体b于第一次包被于固相载体上的特异性抗体a对被测抗原来说都是特异性的,但不是用同种动物免疫制备的,否则可出现非特异性反应.经孵育洗涤后,再加酶标记抗b抗体,再经孵育洗涤后加底物显色进行测定.这种方法与双抗体夹心法不同之处是多加了一层抗体.因此,放大的倍数更高,故比双抗体夹心法更加灵敏.同时避免标记特异性抗体,而另一优点是只要标记一种抗抗体,即可达到多种应用.; 1年前

ELISA试剂盒分类?一般试剂盒不是都分人、小鼠、大鼠的吗,比如说ELISA双抗夹心试剂盒,如果检测人的抗原就要用人的试 ELISA试剂盒分类? 一般试剂盒不是都分人、小鼠、大鼠的吗,比如说ELISA双抗夹心试剂盒,如果检测人的抗原就要用人的试剂盒,我想问的是,这几种试剂盒本身区别在哪里,是包被的抗体与酶标抗体来源不同吗,也就是说人的试剂盒就要都用人的抗体?在临床上,不能用小鼠的单抗包被酶标制成的试剂盒吗?换句话说,检测人的ELISA试剂盒是怎么做出来的呢? amyco1年前3: 后智了共回答了35个问题 | 采纳率97.1%

你可能把抗原抗体弄错了.测人的试剂盒用的抗体是抗人的,比如测人乙肝病毒,可以用小鼠抗人乙肝病毒.这样这个抗体才能与人乙肝病毒抗原反应.
夹心法中,包被的抗体与酶标抗体,如果是单抗,理论是不能用一样的,不过商品化的单抗有可能是混合单抗（识别不同的表位的抗体混在一起）这样就又可以用一样的.而多抗用一样的自然没问题.

1年前查看全部