原位杂交与 southern 杂交的区别～

随便叫什么名字2022-10-04 11:39:541条回答

原位杂交与 southern 杂交的区别～
如题

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zzrzzr 共回答了18个问题 | 采纳率72.2%: 将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交.
Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法.一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量.
即前者是在组织中直接杂交,后者是提取出来再杂交; 1年前

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原位杂交是检测基因的,如DNA或者RNA,不过这个技术有些落后,误差比较大,是比较老的技术了.而免疫组化是进行蛋白定位的,这两种技术可靠性都比较差,但因为操作简单,成本也不太高,在以前是比较常用的,免疫组化只能进行半定量.ELISA可以精确定量,但对抗体要求高,临床的试剂盒可信,但科研用的,质量差别太大,成本也很高.检测表达用western blotting可靠性高一些,因为有分子量大小指标,难以做假.

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不能说等同.
只是能作为表达量的一种表现形式,实际上是转录水平的表达量
狭义的表达量应该是成熟蛋白的量
原位杂交和pcr都不准确,研究的目的不同,原位杂交是看形态学上（非细胞学）的各个部位表达量（转录水平）,这个实验挺难做的.qpcr是对某一组织的表达量（转录水平）,和northern blot的目的几乎一样,却别在于pcr快捷,容易量化,但没有northern直接,也就没有northern准确.
免疫组化就是蛋白水平了.对于表达量来说这个比较直接,是针对蛋白的.其实如果有合适手段的话,最直接的是检测蛋白活力,蛋白活力对于表达量这个概念是最接近的的.

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