流式细胞术测细胞表面抗原步骤是表面抗原,我想用荧光标记的抗体通过检测细胞表面的荧光强度来说明表面抗原的多少

1. 定量细胞浓度
2. 分为2组,一组为实验组,另一组为抗体对照组
3. 两组都先加入非特异性的IgG,封闭可能的Fc受体
4. 按照抗体生产厂家的推荐浓度加入抗体,对照组加入同样荧光标记的非特异性同型抗体.
5. 4°孵育半小时
6. 用含0.5% BSA的PBS洗2遍
7. 上机后先用抗体对照组设置阴性Gate.
8. 检测样本.

那你就先拿抗体和细胞孵育 然后拿去过流失就可以啦

1.贴壁细胞：用胰酶消化后，吸去胰酶，加PBS吹打下来，离心；悬浮细胞直接离心。
2.弃去上清，加入用PBS稀释好的抗体(已用FITC或PE等标记），旋涡振荡，使用细胞均匀悬浮，室温避光孵育0.5h。
3.孵育后加1mlPBS,1000rpm离心5min，弃去上清，再加入1mlPBS，1000rpm离心5min，弃去上清。
4.加入500ulPBS重悬细胞，4℃避光保存，尽...