HPLC法 测黄酮类化合物 波长选择问题

四毛五2022-10-04 11:39:544条回答

HPLC法 测黄酮类化合物 波长选择问题
紫外在200-800nm 扫描后 对照品和供试品在254nm 和355nm 均有吸收 请问该如何选择波长 选择254nm 是不是会有末端吸收呢 或者是很多类成分在254下均有吸收代表性不强,还是选355nm 好一点?选择波长的原则是什么呢?

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共4条回复
爽_歪歪 共回答了20个问题 | 采纳率90%
如果是定量,看你所测含量的化合物在哪个波长有最大吸收波长,一般是选最大吸收波长的那个.但是如果是定性,最好选有很多峰的.
末端吸收是看什么流动相,甲醇末端吸收在210nm,乙腈的在190nm.
1年前
mtv_ff 共回答了27个问题 | 采纳率
为什么不都测…… 我们提纯核酸或者蛋白的时候260nm和280nm都要测的。
1年前
championwinner 共回答了2个问题 | 采纳率
代表性这个没什么问题,因为HPLC主要是测含量,个人觉得254的较好
1年前
zz领头羊 共回答了1个问题 | 采纳率
从你的全波长来看,254应该是碳氧双键吸收波长。而355nm是你的黄酮类化合物特征基团的吸收波长。所以选择后者比较好。并且你可以做双波长定量。
1年前

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zhangruijun_1981 共回答了20个问题 | 采纳率90%
色谱纯的纯度更高一些,分析纯一般是化学合成中所应用的,HPLC里一般都用色谱纯,这样对仪器和柱子的伤害小些,同时分析也更准确些,如果分析纯有可能引入酸碱或其他小杂质什么的.