分离蛋白质的实验中 透析的作用是什么?

因为葡萄糖是小分子物质,蛋白质是大分子物质.葡萄糖分子量是180.16,而蛋白质的分子量可上千上万.在透析分离法中使用的透析袋是一种半透膜,它可以使小分子物质自由穿过而不能使大分子物质透过,就像一个筛子,正因为如此半透膜被用来作分子筛.
在透析分离时,袋内葡萄糖浓度比袋外高,因为渗透作用,高浓度葡萄糖可以自由穿过透析袋到达外边的清水中,而蛋白质不能透过,被留在袋内.当袋内外葡萄糖浓度一致时,将袋外液体（葡萄糖溶液）弃去再取清水,可使葡萄糖继续从袋内渗出,反复操作直到袋内葡萄糖几乎全部出来,而蛋白质最终会留在袋内.

解题思路：①从渗析法分离的对象分析，可用来分离胶体和溶液；
②盐析法是利用某些物质在盐溶液中的溶解度降低而分离；
③碘易升华；
④已烷和水互不相溶；
⑤二者的溶解度受温度的影响不同；
⑥酒精与苯酚钠的沸点不同．

①中蛋白质溶液是一种胶体，而葡萄糖溶液不是，可用渗析法进行分离，故①正确；
②中向混合液中加入食盐使高级脂肪酸钠的溶解度降低而析出从而达到分离的目的，故②正确；
③碘易升华，砂子受热稳定，可用升华法分离，故③正确；
④已烷和水互不相溶，可用分液法进行分离，故④正确；
⑤从硝酸钾和氯化钠的混合液中获得硝酸钾为可溶性固体之间的分离，且二者的溶解度受温度的影响不同，可利用结晶法分离，故⑤正确；
⑥酒精与苯酚钠的沸点不同，可用蒸馏分离，故⑥正确．
故选D．

点评：
本题考点： 物质的分离、提纯和除杂．

考点点评： 本题考查物质的分离和提纯，题目难度不大，注意根据物质的不同性质选取不同的分离方法．

需要.
加得慢,搅拌注意不要出气泡,缓冲容量要大一些,因为硫酸铵会降低pH,也有人是把硫酸铵先从需要的pH缓冲液里面重结晶出来再用的.

蛋白质较易吸附与气液界面,这有利于其结构的稳定.泡沫分离过程是:蛋白质从主体溶液...泡沫分离的目的,一方面提高酶蛋白的富集率(泡沫中蛋白质的浓度/最初溶液中蛋白质浓度),.

B.
A是亲和层析,
C是等电聚焦
D是盐析、盐溶
仅供参考.

D

①中蛋白质溶液是一种胶体，而葡萄糖溶液不是，可用渗析法进行分离；②中向混合液中加入食盐使高级脂肪酸钠的溶解度降低而析出从而达到分离的目的；③中乙醇和水的沸点不同，可用蒸馏法分离；④中溴乙烷密度比水大，难溶于水，可用分液法进行分离。

①中蛋白质溶液是一种胶体，而葡萄糖溶液不是，可用渗析法进行分离；②中向混合液中加入食盐使高级脂肪酸钠的溶解度降低而析出从而达到分离的目的；③中氧化钙可与水反应生成难挥发的氢氧化钙，可用加生石灰蒸馏的方法分离；④中溴乙烷密度比水大，难溶于水，可用分液法进行分离，以上操作都正确．
故选D．

两种方法原理不同,有差异是正常的.如果差距较大,要仔细分析.一般凝胶层析是非变性的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的,二硫键也被还原,所以是亚基（肽链）分子量.凝胶层析与分子形状有关,一般marker都是球状蛋白,所以...

因为蛋白质是两性物质 带电荷 所以在电场中 带正电荷的蛋白质向阴极移动 带负电荷的蛋白质向阳极移动

1）凝胶层析又称分子筛层析,主要根据混合物中分子的大小和形状不同,在通过凝胶时,分子的扩散速率各异而达到分离的目的.凝胶颗粒具有多孔性网状结构,小分子易进入凝胶网孔,流程长而移动速度慢,而大分子物质不能进入凝胶网孔,沿凝胶颗粒间隙流动,流程短移动快,从而最先被洗脱下来.补充一下B选项,分子量大的被洗脱下来,剩下的不就是分子量小的了么?
2）C和D涉及的是电荷性,这并非凝胶层析能解决的,所以无所谓洗脱的概念,而是大学微生物实验中经常用到的蛋白电泳.所谓蛋白电泳,在碱性环境里,血清蛋白皆带阴电荷,在电场中向阳极泳动,因各蛋白质等电点和分子量有差异,分子量小、阴电荷多泳动最快；分子量大、阴电荷较少者泳动较慢.
所以,我对LZ提个建议啊,很多时候,特别是高中的时候,我们总喜欢穷举所有题目的选项,认为不把选项完全搞清楚就不对,而其实里面的很多选项都是随机放入扰乱视线的,很多时候,特别是精力有限的情况下,我们只需要记得正确答案,而不是排除错误答案

控制蛋白质中离子的存在状态.因为蛋白质分子中很多氮元子的,也有羧基类基团,在不同的PH下,存在的离子形态不一样的.含离子多少不同,电泳时的移动速度肯定就不一样的.所以只有控制特定的PH值,才能得到相应的结果.也就是要用缓冲液来稳定PH值.
c

解题思路：1、原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体；原核细胞只有核糖体一种细胞器，但部分原核细胞也能进行光合作用和有氧呼吸，如蓝藻．
2、凝胶色谱法的原理：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢，而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程较长，移动速度较快．

A、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其有氧呼吸产生二氧化碳的场所是线粒体，无氧呼吸产生二氧化碳的场所是细胞质基质；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，属于原核生物，其有氧呼吸产生二氧化碳的场所是细胞质，A错误；...

点评：
本题考点： 酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；生态系统的结构；蛋白质的提取和分离．

考点点评： 本题考查果酒和果醋的制作、原核细胞和真核细胞的异同、蛋白质的提取和分离，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及代谢类型；识记原核细胞和真核细胞的异同；识记蛋白质的提取和分离的原理．

给你找了以前的文章,你可以看一下.如下.
层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素、多糖等的一项技术.
在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂.如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,DEAE)纤维素.在纤维素上结合了DEAE,含有带正电荷的阳离子纤维素—O—C6 H14N+H,它的反离子为阴离子(如Cl-等),可与带负电荷的蛋白质阴离子进行交换.当结合阴离子基团时,可置换阳离子,称为阳离子交换剂,如羧甲基(Carboxymethy,CM)纤维素.纤维素分子上带有负电荷的阴离子(纤维素－O－CH2－COO一),其反离子为阳离子(如Na+等),可与带正电荷蛋白质阳离子进行交换.
溶液的pH值与蛋白质等电点相同时,静电荷为0,当溶液pH值大于蛋白质等电点时,则羧基游离,蛋白质带负电荷.反之,溶液的pH值小于蛋白质等电点时,则氨基电离,蛋白质带正电荷.溶液的pH值距蛋白质等电点越远,蛋白质的电荷越多.反之则越少.血清蛋白质均带负电荷,但各种蛋白质带负电荷的程度有所差异,以白蛋白为最多,依次为 球蛋白,球蛋白和 球蛋白.
在适当的盐浓度下,溶液的pH值高于等电点时,蛋白质被阴离子交换剂所吸附；当溶液的pH值低于等电点时,蛋白质被阳离子交换剂所吸附.由于各种蛋白质所带的电荷不同.它们与交换剂的结合程度也不同,只要溶液pH值发生改变,就会直接影响到蛋白质与交换剂的吸附,从而可能把不同的蛋白质逐个分离开来.
交换剂对胶体离子(如蛋白质)和无机盐离子(如NaCl)都具有交换吸附的能力,当两者同时存在于一个层析过程中,则产生竞争性的交换吸附.当Cl一的浓度大时,蛋白质不容易被吸附,吸附后也易于被洗脱,当Cl一浓度小时,蛋白质易被吸附,吸附后也不容易被洗脱.因此,在离子交换层析中,一般采用两种方法达到分离蛋白质的目的.一种是增加洗脱液的离子强度,一种是改变洗脱液的pH值.pH值增高时,抑制蛋白质阳离子化,随之对阳离子交换剂的吸附力减弱.pH值降低时,抑制蛋白质阴离子化,随之降低了蛋白质对阴离子交换剂的吸附.当使用阴离子交换剂时,增加盐离子,则降低pH值.当使用阳离子交换剂时,增加盐离子浓度,则升高溶液pH值.

以大豆分离蛋白为原料,利用碱性丝氨酸蛋白酶和蛋白酶Ⅱ作为水解酶,采用二步酶解制备大豆寡肽.在双酶定向酶切工艺技术参数确定的前提下,采用两种技术路线：碱性丝氨酸蛋白酶酶解过程中维持其最适pH 的时间分别设定为3h(技术路线Ⅰ)和30min(技术路线Ⅱ) ,而蛋白酶Ⅱ分别在酸性及中性条件下继续酶解大豆分离蛋白水解液.研究表明,技术路线Ⅰ所得肽的蛋白质回收率为8 6 .5 % ,酸溶性氮得率为8 3 .2 % ,低聚肽占肽总量的8 1 .9 %,寡肽含量占6 1 .3 %,并且主要为四肽和五肽.但是,技术路线Ⅰ所得肽的灰分含量高.技术路线Ⅱ所得肽的蛋白质回收率为8 7 .8 %；酸溶性氮得率为8 6 .4 %；技术路线Ⅱ所得肽的相对分子质量分布范围为：分子量在1 0 0 0 以下的占7 1 .3 % ,且主要在700～900 之间,分子量在2000 左右的占5.7%,分子量在5 0 0 0 以上的占1 2 .8 % .此外,该技术路线不但简化了工艺,缩短了酶解时间而节约成本,而且减少了灰分含量而提高产品纯度.摘自《食品科学》2008年29期《两种双酶切大豆分离蛋白技术路线的比较》（大豆生物学教育部重点实验室,东北农业大学食品学院宋春丽,迟玉）一文：http://www.***.cn/data/upload//download/5_Q35y0i.pdf

这个步骤称为水封
目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直.
并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上.

你的目标蛋白是什么?五中蛋白中应该只有一种才是目的蛋白,其余是杂质啊例如阴离子交换介质吸附的是阳离子,即蛋白质处于一个PH比其自身等电点低的环境中.装柱 氢氧化钠处理 磷酸盐缓冲液平衡 上样 吸附目...

问题矛盾,酶本身就是一种蛋白质,
如果根据其不同的分子量和电荷数,可将其层析开来.
如果这个酶的参数你已经知道,那可以选用HPLC进行分离.

我有一个方法是利用基因工程的,不知道是不是房主需要的.
1.首先利用PCR进行基因扩增
2.将基因转移至表现载体上
3.将基因转移到大肠杆菌（或其他可用细胞内）的细胞中
4.培养,选择所要得菌株
5.诱导蛋白质表现
6.打破细胞并分离细胞中的所需成分.

您要这道其中的原理就理解了.凝胶过滤时小分子进入凝胶的孔隙,大分子则直接洗脱,所以大分子先出来.电泳是利用蛋白质带电荷受到电场力和凝胶阻滞的作用,大分子当然跑得慢了.这两种胶是完全不同的,虽然中文翻译都叫胶

所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同.
离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.
凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.

如果你问的使离子交换层析的话洗脱液就是由不同离子强度（PH）的缓冲液构成.
由于不同生物大分子的电荷密度分布不同,电荷量不等,等电点的差异及分子大小的区别,因而与离子交换剂的结合强弱也不同,当它们被结合到固定相交换基团上以后,主要依靠增加缓冲溶液的离子强度或改变酸碱度来进行洗脱.当缓冲液离子强度增加时,即增加了它与生物大分子对交换基团竞争吸附的能力,把生物大分子置换下来,改变酸碱度,使缓冲溶液的pH接近生物大分子的等电点,其净电荷为零,从而可被洗脱.

凝胶色谱法的原理是利用凝胶珠子内的孔隙.大分子蛋白进不去那些孔隙,只会从珠子之间迅速通过,优先出柱.而小分子蛋白会进入凝胶珠子内的孔隙,从而延长留柱时间,延后出柱.因此,只有蛋白质从上到下的流动速率才会影响到分离度,水平扩散不会影响分离度.所以,层析柱高会影响分离度,而层析柱直径无影响.缓冲溶液会影响蛋白质的三维结构,也就是蛋白质的直径大小,因此会影响分离度.样品的分布也会,因为分子量过于接近的蛋白混合样品,分离度肯定比较差.

缓冲液在电泳过程中的作用是维持合适的pH.电泳时的正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应,负极发生的是还原反应.长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱.一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变.
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢；太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化.

看你scx柱子的结合能力吧,建议你在合适的范围内选用一组不同浓度的标准蛋白混合物来上样,通过比较起结果来确定上样量

离子型去垢剂 非离子型去垢剂 两类.
如要膜蛋白保持原来的结构应采用：非离子型去垢剂.

根据蛋白质的等电点和分子量大小不同,每个蛋白质都有自己独有的等电点和分子量.对蛋白质进行分离.

其实HCL对蛋白质有两种作用,水解和变性,但是由于是分离,而变性是不可逆的过程,因此考虑水解.
蛋白质在酸、碱或酶的作用下发生水解反应,中间产物是多肽,最后得到多种α-氨基酸,它是溶于水的
如果考虑HCL对DNA的作用,它会作用于DNA的氢键,使双链打开,打开以后还是大分子,不溶于水的
然后静置,分层,就分开了
其实高中分离DNA的实验里面,主要用地是2mol/L的氯化钠溶液,利用蛋白质的盐析.单独的HCL不大好说