GelRed染色是否会对后续的TA克隆、测序、酶切产生影响?

什么是ll2022-10-04 11:39:542条回答

GelRed染色是否会对后续的TA克隆、测序、酶切产生影响?
因实验室限制使用EB,本人采用核酸染料GelRed染色后,切胶回收PCR产物,然后采用Takara pmd 19-T simple vector试剂盒连接,严格按照说明书操作,感受态细胞为JM109(商品化).蓝白斑筛选结果阴性对照没有菌落,阳性对照(试剂盒自带pUC19)均为白色菌落,但是实验平板上却全是蓝色菌落,不知道是否是由于采用GelRed染料原因,对TA克隆造成影响?求各位大侠赐教!GelRed染色是否会对后续的克隆、测序、酶切产生影响?

已提交,审核后显示!提交回复

共2条回复
天天4017 共回答了17个问题 | 采纳率94.1%
我们实验室就是用GelRed染色,对后续试验没有产生过影响.
切胶回收后,理论上是没有GelRed了,不会对后续试验产生影响.
1年前
dom3ksq 共回答了4个问题 | 采纳率
总之不是染料造成的。你的阴性对照是什么?还有你PCR用的是什么酶,高保真的酶不能加A,需要用普通taq额外添加A。
1年前

相关推荐