双标FITC和PE激发波长都是488,荧光照射的时候会不会“串色”

myyuyu2022-10-04 11:39:541条回答

双标FITC和PE激发波长都是488,荧光照射的时候会不会“串色”
标记1：1抗用山羊抗大鼠---2抗用驴抗山羊FITC
标记2:1抗用小鼠抗大鼠---2抗用驴抗小鼠PE
用徕卡共聚焦显微镜TCS SPE扫描
纠结一：为什么无论绿色荧光或红色荧光激发,两种标记都能显示,而且一模一样
纠结二：两种标记为什么完全重叠?理论上是不会发生这样的情况

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gohome 共回答了17个问题 | 采纳率100%: 有几种可能：
1. 非特异性染色,你在做抗体染色前,是否用非特异性的山羊,小鼠还有驴的抗血清封闭了呢?如果没,非特异性的可能性很大.
2.2种染料的激发光相同,但是emission 不同.你选对了滤片没有?而且两个光的emission确实是有重叠的,要做消减; 1年前

请教免疫荧光双标中荧光二抗的选择是否合适? 请教免疫荧光双标中荧光二抗的选择是否合适? 最近要做免疫荧光双标实验,双标效果不理想,两种一抗分别是山羊多抗和小鼠单抗,荧光二抗选择了兔抗山羊和山羊抗小鼠,这两种荧光二抗可以一起用吗?因为单标两种效果挺好的跟文献一样,双标时有一种（山羊源性,标记胞浆蛋白）一直做不好. xgm09131年前1: mebest666 共回答了14个问题 | 采纳率100%

一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：
1.二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源;
2.二抗需与一抗的类别或亚类相匹配.这通常是针对单克隆抗体而言.多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体;
3.一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别.然而在一些特殊的实验里, 如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的.

1年前查看全部

荧光双标技术中制备二抗时是否需要两个不同的动物?用同一个动物可以吗? 荧光双标技术中制备二抗时是否需要两个不同的动物?用同一个动物可以吗? 两个不同的一抗去制备二抗时,是否需要免疫不同的动物制备二抗?如果两个一抗是兔抗鼠和兔抗羊,然后都去免疫马得到两个二抗,再标记不同颜色的荧光素,请问这样可以吗? 娃哈哈rev1年前1: wendetx 共回答了26个问题 | 采纳率80.8%

理论上是可以的
但是效果可能不好

1年前查看全部

英语翻译订房的时候,双标怎么说,大床房怎么说 飘逸风序1年前4: 岩浆英雄共回答了13个问题 | 采纳率84.6%

双人标准房 Standard Twin Room
大床房 Big-bed Room / Deluxe Kingsize / Deluxe Queen-bed Room

1年前查看全部

双标FITC和PE激发波长都是488,荧光照射的时候会不会“串色”

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