tricine蛋白电泳(超低分子)染色后怎么没有条带呢?连Marker都看不到?实验好几次了,都以失败告终.

zlighter2022-10-04 11:39:541条回答

tricine蛋白电泳(超低分子)染色后怎么没有条带呢?连Marker都看不到?实验好几次了,都以失败告终.
样品是脱脂乳酶解后的水解液,之后冻干所得.

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胶的配方改进了么?
浓缩胶:1ml 含0.4% SDS的3M Tris-HCl,pH8.45
0.5ml 甲叉/双甲叉 (29:1)
2.5 ml ddH2O
4ul 40% AP
16ul TEMED
分离胶:2.4 ml 聚乙二醇
2ml 含0.4% SDS的3M Tris-HCl,pH8.45
3.6 ml 甲叉/双甲叉 (19:1)
4ul 40% AP
16ul TEMED
染色前必须固定:
先用ddH2O洗胶,然后用50ml 新鲜配的5%戊二醛去固定30min,再用水洗3X5min,再染色.固定后,小分子蛋白会染的比较好.
如果连Marker正常分子量大小的条带都看不到的话,你也得考虑染液的问题,因为即使没有固定,正常分子量大小的条带也应该能够染出来的.
1年前

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