pulldown

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pulldown空载洗不掉

是指当洗涤机只有少量或没有衣物时使用洗涤剂或清洁剂,导致清洁剂不能完全分解和清洗掉,仍残留在机器内。Pulldown在洗涤机中是一种能够在水中完全溶解的清洁剂,用于清洁洗涤机的内胆和管道。洗涤机的自清洗功能可以在缺乏衣物时运行并完全清除洗涤剂或清洁剂。

rnapulldown体外合成探针的序列是相同还是互补

RNA 结合蛋白 ( RBPs ) 是一类功能强大且分布广泛的调节因子,约占细胞中编码的所有蛋白质的 5% 至 10%。目前,大多数 RNA 通过与蛋白质结合形成 RNA-蛋白质复合物而发挥作用。随着基因时代的到来,RNA 相关研究已成为生物学的重要组成部分,在肿瘤、糖尿病、肠炎等慢性疾病等领域已被广泛研究,但对 RNA 的作用机制仍知之甚少,各种新发现的 lncRNA、circRNA 与蛋白质相互作用有待进一步研究和发现。蛋白质与 RNA 的相互作用是许多细胞功能的核心,如蛋白质合成、mRNA 组装、病毒复制、细胞发育调控等,了解它们之间相互作用的分子机制对理解这些生物学过程非常重要。目前研究 RNA-蛋白质相互作用的方法主要分为两大类:一类是寻找与感兴趣的 RNA 结合的蛋白质,如 RNA pulldown、RAP、ChIRP 等;另一类是找到与感兴趣的蛋白结合的 RNA,如 RIP、CLIP 等。其中 RNA pulldown 是检测 RNA 结合蛋白与其靶 RNA 相互作用的主要技术之一,是近年来研究 lncRNA、circRNA 与蛋白质相互作用的主要手段。1.RNA pulldown 原理与应用1.1 RNA pulldown 的技术原理:RNA pulldown 技术为研究 RNA 和蛋白质相互作用的核心技术,该技术利用生物素标记的 RNA 和链霉亲和素标记的磁珠高效富集及鉴定 RNA 结合蛋白质( RBPs )。针对目标区域设计生物素标记的特异性 RNA 探针,并与细胞蛋白提取物孵育,形成 RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,经洗脱,得到目的 RNA 探针-蛋白质复合物,最后采用 Western Blot 或质谱鉴定蛋白质类型。1.2 RNA pulldown 的实验流程:RNA pulldown 适用于所有的组织或细胞样本,实验操作相对比较简单,其大概实验操作流程如下所示:1.3 RNA pulldown 的技术应用:RNA pulldown 可用于研究 lncRNA、circRNA 和 mRNA 等与蛋白质的相互作用,分析与目的 RNA 结合的蛋白种类。RBPs 调控 mRNA 稳定性、lncRNA 活性等生物学过程,调节转录和翻译、基因表达和 RNA 的加工,介导细胞的发育、分化和代谢等生命过程,在健康与疾病中发挥重要的作用。在很多疾病(如癌症)的发生机制、预测和治疗中,RBPs 发挥了重要作用。因此,RPBs 逐渐成为研究的热点,而 RNA pulldown 以其优势也被应用到众多的研究中。

letpulldown怎么调

letpulldown怎么调,坐姿,大腿抵住圆垫,双手抓住横杆两端,背部挺直,此为起始姿势呼气,利用背部的力量有控制的将横杆向下拉,往颈后放下拉直到差不多耳朵的高度停住夹紧肩胛骨,感受背部肌肉的紧缩,停顿1s左右有控制的回放直到手臂完全伸展

有谁用过gst pulldown试剂盒

不需要试剂盒,只需要一种结合GST蛋白的琼脂糖珠,其他BUFFER自己配,我们一直用的是PIERCE的Immobilized Glutathione只需要1ml可以结合8mg蛋白,用六孔板培养细胞,每个孔用300ul左右裂解液裂解,取70ul的Immobilized Glutathione于EP管中,结合适量GST如何蛋白,纯化后与细胞裂解液结合孵育过夜。见附件是我的试验结果,每3条LANE一组,每组依次设定OFFER、GST空白对照、PULLDOWN,具体的可以去药智网查询回答满意请您采纳,谢谢。

怎么看pulldown图谱

个人理解,供参考:顶上横排是固定的蛋白,旁边竖排是互作的蛋白种类+/-代表有哪种互助蛋白,底下就是pull down后的杂交图,用相应不同的探针希望对你有帮助

微信小程序:关于下拉刷新PullDownRefresh

初略看了下文档,发现小程序js中有onPullDownRefresh回调,果断重写之... 然而,却发现不管怎么下拉,始终触发不了js回调。 只好继续看文档,发现,需要在json中配置支持下拉刷新,即: 这个可以在app.json中进行全局配置,使所有页面都带有下拉刷新功能;也可以在需要下拉刷新功能的page对应的json中配置。 这下好了,下拉刷新功能完成了。 但是,还有一点点不完美的地方,别人的小程序,下拉刷新时,可以看到顶部有三个点闪烁的动画;而我的小程序顶部一片空白。 原来,还有一个配置,"backgroundTextStyle": "",支持 dark/light;因为我的背景是白色的,此时,不进行这个配置,因为颜色的缘故,三个点闪烁的动画就看不到了,因此,白色背景需要进行以下配置: 此外,微信小程序还提供了停止下拉刷新效果的api,如果发现进入刷新状态,无法停止,可以使用这个api

gst-pulldown有杂带

gst-pulldown有杂带可以在平衡缓冲液里加一些盐。可以在平衡缓冲液里加一些盐,0点2至0点5MNaCl,这样可降低一些因离子作用带来的非特异吸附。同时在平衡液里加百分之零点五吐温等表面活性剂,可以改善。此外也可以用阶段洗脱的方法,用5毫米和10毫米还原谷胱甘肽去分别去洗脱,两者会有区别。还要注意的问题是超声破碎时注意功率和时间,避免过强时间过长,降解蛋白。可以GST抗体做WB看是降解或造成这样的结果。可以加点酶的抑制剂。

RNA pulldown实验需要注意些什么?

RNA pulldown实验是用于研究RNA与蛋白质相互作用的技术。在进行RNA pulldown实验时,需注意以下几点:1、rna的选择:需要根据研究对象的需要,选择适合的RNA探针(如siRNA、shRNA、miRNA、lncRNA等)。2、rna标记:为了方便后续检测和定位RNA分子,可以使用荧光标记、生物素标记或其他标记化方法对RNA分子进行标记化处理。3、交联反应:可使用复性反应或特定交联反应(如UV激光-crosslinking),将RNA分子与目标蛋白固定在一起。4、免疫沉淀:使用抗体结合抗原的方法,将RNA与靶向蛋白质一同沉淀下来。5、后续检测:通过Western blot、质谱、RNA-Seq等技术,检测RNA与蛋白质的相互作用,并鉴定结合的位置和强度。rnapulldown实验还需要注重实验过程中对质量和污染的控制,例如:对RNA Probe、anti、实验器具等进行无菌处理,避免杂质干扰实验结果。此外,实验过程中的各项条件和步骤也需精准控制,以确保实验结果的可重复性和准确性。

pulldown实验原理

GST pull-down:是利用重组技术将探针蛋白与GST谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的GSH谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。 扩展资料 Pull down实验方案设计 1、构建含His或GST标签的诱饵蛋白原核表达载体; 2、原核表达诱饵蛋白(我们采用自诱导培养基培养细菌,能有效降低包涵体的"形成); 3、细菌裂解液过柱,带标签的诱饵蛋白被固相化亲和配基捕获,产生“次级亲和支持物”; 4、待测样品裂解液过柱孵育,与诱饵蛋白互作的蛋白被“次级亲和支持物”吸附; 5、清洗,离心,去除未结合的杂蛋白; 6、洗脱,得到诱饵蛋白及其互作蛋白的复合物; 7、如要验证某蛋白X与诱饵蛋白互作,则将6.所得的蛋白复合物与X蛋白的抗体孵育,做Western blot验证即可; 8、如要寻找诱饵蛋白可能的互作蛋白,则需将6.所得的蛋白复合物做LC-MS/MS鉴定。

为什么要做gst-pulldown实验

因为此方法简单易行,操作方便。GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶)融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白,“诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。

AE 解释素材里的pulldown干啥的?

改变帧率,比如说可以吧23.976(24)的改成29.97的如果你指的得解释里面得话可能就是显示更多解释,不确定你指的时哪儿得

电泳中的input和pulldown是什么意思

inputwithinternalpull-down:带内部下拉(电阻)的输入outputwithinternalpull-up:带内部上拉(电阻)的输出上拉就是将不确定的信号通过一个电阻嵌位在高电平,电阻同时起限流作用,下拉同理。

如何看pulldown跑胶图

观察曲线特征。pulldown跑胶图通常包括两个特征曲线,分别是载荷-位移曲线和应力-应变曲线,其中,载荷-位移曲线表示施加载荷时位移的变化情况,应力-应变曲线表示所受应力与应变之间的关系,观察这两条曲线的变化趋势和特点,可以了解样品受力时的性能和特性。

USB口pulldown是什么意思USB

电路下拉。如果是input,那么需要看具体应用的默认输入值是0还是1,如果默认是输入0,则最好配置为pulldown,反之则配置为pullup,这样做主要是为了外部电路在没有上下拉的情况下,出现不确定情况。PULLUP和PULLDOWN针对输入模式,比如我们一个单片机的I/O脚接一个按键的左端,按键的右端接正电源,那么我们就要设置I/O脚为下拉模式,如果按键另一端接地,我们就要设置为上拉模式了。

pulldown实验的inpull是什么

是通过蛋白相互作用来研究细胞通路的有力工具。由pulldown实验内容得知:inpull是是通过蛋白相互作用来研究细胞通路的有力工具,也是确定两种或更多蛋白之间相互作用的体外方法。Pulldown实验也叫做蛋白质体外结合实验,是一种在体外研究蛋白质与蛋白质相互作用的简单而灵敏的技术。

pulldown有拉垮的意思吗

没有。它的意思有摧毁,推翻,拉下,使什么什么下跌,没有拉跨的意思,一般在句子里的意思就是引申为拆除,脱下裤子衣服什么的,或者下拉菜单等等。拉跨的意思有别的单词使用。这个词的pull是一个动词,英语动词是一类词性,一般用来表示动作或状态的词汇。在英语中,动词按作用和功能主要分为两大类,一类是谓语动词,另一类是非谓语动词。

pulldown实验结果条带怎么看?

在pulldown实验中,通过检测实验结果中的条带bands来确定蛋白质与染色质交互作用的情况。在进行pulldown实验后,会经过电泳分离蛋白质-染色质复合物和未结合的蛋白质。然后,使用抗体检测特定蛋白质是否结合到染色质上,如果有,则抗体会与结合的复合物发生反应,并在凝胶上形成明显的条带。这些条带代表蛋白质与染色质结合的情况。因此,要观察pulldown实验结果中的条带,需要对电泳分离后的凝胶进行染色并观察。一般来说,采用Coomassie Blue染色法或银染法都可以使条带更加清晰可见。条带的位置越靠近凝胶顶部,则表示分子量较大;条带的位置越靠近凝胶底部,则表示分子量较小。此外,条带的强度也可以反映出蛋白质与染色质之间相互作用的强度。pulldown实验结果中出现条带并不一定意味着蛋白质与染色质之间存在的特定相互作用,因此需要进行更进一步的实验验证来确认。

电泳中的input和pulldown是什么意思

input英-["u026anpu028at]美-["u026an"pu028at]释义n. 投入;输入电路vt. [自][电子] 输入;将…输入电脑pulldown英-["pu028al,dau028an]美-["pu028al,dau028an]释义adj. 折叠式的

十万火急!!!!十万火急!!谁能告诉我GST-PULLDOWN的原理以及酵母杂交技术的原理哈??????

GST亲和层析和GST Pull-down方法此方法的基本原理是:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。在病毒受体研究中,融合蛋白通常设计为病毒吸附蛋白(VAP)。这方面成功的例子有HBV[28]。具体做法如下:将GST-融合探针蛋白(VAP)和GTH-Sepharose制成亲和层析柱,然后待分析的蛋白质混合液流经亲和层析柱,梯度洗脱,分离、收集各蛋白组分,这称为GST亲和柱层析(GST affinity column chromatography)。如果一开始待检蛋白就和GST- 融合探针蛋白与GTH-Sepharose一起共同孵育,经离心收集洗脱复合物和洗涤后,再加入过量GTH获得相互作用蛋白的复合物,那么这种方法则称为GST pull down。GST亲和层析及相应的GST Pull-down方法的优点是敏感,对混合物中的所有蛋白均“一视同仁”,也可用于受体功能的鉴定。缺点是GST有可能影响融合蛋白的空间结构,另外,蛋白质浓度对实验也有一定影响。3.6 酵母双杂交技术许多真核生物的转录激活因子通常具有两个可独立存在的结构域,即DNA结合域(BD)与转录激活域(AD)。这两个结构域各具功能,互不影响。但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域。不同来源的激活因子的BD区与AD结合后则可特异地激活被BD结合的基因表达。基于这个原理,人们将两个待测蛋白分别与这两个结构域建成融合蛋白,并共表达于同一个酵母细胞内。如果两个待测蛋白间能发生相互作用就会使AD与BD形成完整的转录激活因子并激活相应的报告基因表达。通过对报告基因表型的测定可以很容易地知道待测蛋白分子间是否发生了相互作用.酵母双杂交系统由三个部分组成:①与BD融合的蛋白表达载体,被表达的蛋白称诱饵蛋白(bait);②AD融合的蛋白表达载体,其表达的蛋白称靶蛋白(prey);③带有一个或多个报告基因的宿主菌株。常用的报告基因有HIS3、URA3、LacZ和ADE2等。而菌株则具有相应的营养缺陷型。双杂交质粒上分别带有不同的抗性基因和营养标记基因,有利于杂交质粒的鉴定与分离。根据目前通用系统中BD来源主要分为GAL4系统和LexA系统。后者因BD来源于原核生物,在真核生物内缺少同源性,因此可以减少假阳性的出现。近年来,开始出现了应用酵母双杂交技术进行病毒受体研究的成功报告,如麻疹病毒的绒猴细胞受体[30]。李凌云等构建了表达“猎物”(prey)蛋白的质粒和表达病毒VAP“诱饵”(bait)蛋白的质粒,然后共转染同一酵母细胞,利用已建立的易感细胞cDNA文库,筛到了阳性克隆。酵母双杂交技术的优点是灵敏度高,特异性较好,缺点是容易出现假阳性和假阴性,而且对蛋白质在细胞中的定位有要求。为了克服上述缺点,人们进一步优化出所谓“双筛选系统”,即蛋白质相互作用必须同时激活两个以上报道基因,具有两种以上的相应表型才算是真的阳性结果。另外,人们也改造了酵母双杂交系统所用的载体系统,将在细胞浆内发生的蛋白质相互作用转移到细胞膜上进行,以此来更容易地筛选膜蛋白受体,如Ras recruitment system(RRS)。

verilog HDL 里pullup.pulldown怎么用的

关键字pullup和pulldown用法。有用例如下:wirescl;wiresda;/*实例化各子模块*/pullupp1(scl);//pullupscllinepullupp2(sda);//pullupsdaline所谓上下拉应该是对当前无驱动的线才会有作用。

gst pulldown 能证明两蛋白间是直接相互作用的吗

可以证明,因为体系中只有纯化的两种蛋白,不直接相互作用的话,就不会被pulldown下来。前面的回答就是复制粘贴,p用没有。