某发酵培养基含有葡萄糖,请问如何进行灭菌操作

蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌；琼脂是培养基的凝固剂.乳酸菌能发酵乳糖,可以替换.

镁元素是许多酶的活化剂,能促进碳水化合物的新陈代谢、核酸的合成、磷酸盐的转化等.

你提的问题是“如何判定发酵终点”以及如何测定产物浓度
判定发酵终点：当到达菌体衰亡期,你单位时间产出的产品的经济效益小于你单位时间内所产生的费用时即为发酵终点,在到达发酵终点前应控制发酵营养成分的含量降到最低,例如残糖、氨氮等,氨基酸类一般定在反酸10分钟左右开始灭活放罐.如若放罐时残糖等太大,则会影响下游工序的收率和提取速率,亦会影响产品色度等.
产物浓度：一般用色谱测定,亦可查阅国标测法

应该是培养基的重量,为了方便计算,我们都把液态的溶液状培养基的密度按水的密度算,比如1000ml的培养基,我们认为重量就是1000克,它如果含有0.5％葡萄糖,里面就有0.5％*1000=5克的葡萄糖.

发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用.它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物.因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等.但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足.
操作方法和注意事项如下
加水
打开灭菌锅盖,向锅内加水到水位线.立式消毒锅最好用已煮开过的水,以便减少水垢在锅内的积存.注意水要加够,防止灭菌过程中干锅.
装料、加盖
灭菌材料放好后,关闭灭菌器盖,采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋,使蒸汽锅密闭,勿使漏气.
排气
打开排气口(也叫放气阀).用电炉加热,待水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出,当有大量蒸汽排出时,维持5min,使锅内冷空气完全排净.
升压、保压和降压
当锅内冷空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升.当压力上升至所需压力时,控制电压以维持恒温,并开始计算灭菌时间,待时间达到要求（一般培养基和器皿灭菌控制在121℃,20min）后,停止加热,待压力降至接近“0”时,打开放气阀.注意不能过早过急地排气,否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内液体冲出容器之外.
灭菌后的培养基空白培养
灭菌后的培养基放于37℃培养箱中培养,经24h培养无菌生长,可保存备用；斜面培养基取出后,立即摆成斜面后空白培养；半固体的培养基垂直放置凝成半固体深层琼脂后,空白培养.

你是要在固体培养基上将其培养出来,还是要在液体培养基中大量增殖呢?
如果是在固体培养基,可选培养基有：改良TJA培养基、改良MC培养基、MRS培养基等等,实际上干酪乳杆菌是乳酸菌的一种,只要适用于乳酸菌的培养基都可适用.（但要注意：仅从培养基表面生长的菌落不能将该菌与其他乳杆菌分辨出来,还需要做生化鉴定.）
如果你只是需要在液体中增殖,那么使用普通的脱脂奶粉就可以了,甚至普通奶粉都可以,浓度15%左右,也可以用固体培养基删除琼脂成分后配置的液体.

乳糖胆盐发酵培养基
成份 (g/L)
蛋白胨 x0520.0
牛胆盐 x055.0
乳糖 x0510.0
溴甲酚紫 x050.01
pH 7.4 ± 0.1 25 ℃
称取本品 35g 加入 1000ml 蒸馏水,不停搅拌加热溶解,分装乳糖胆盐发酵管,分装每管 10mL ,并放入一个小倒管（杜氏小管）,115 ℃ 高压灭菌 15 min ,迅速冷却,备用.使用前,把制备好的平板放置室温 10-15 分钟.
乳糖复发酵培养基
配方：（g/L）
蛋白胨
乳糖
溴甲酚紫
pH值7.4 ± 0.1 x0520.0
10.0
0.01
25℃
原理：
蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色.
用法：
称取本品 30.0g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装到有倒立发酵管（杜氏小管）的 20mm ×150mm试管中,每管 10ml,115℃高压灭菌 15 分钟备用.
质量控制：在36±1℃培养24±2小时.

发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用.它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物.

就是100KG物料里面含有70KG水
一般干的秸秆本身含水在10%以下,就是1KG秸秆里含水0.1KG
要加水到70%的话,
40KG秸秆 + 60KG水 就是（绝干的秸秆36KG + 水 64KG）
它的含水量就是64%
70%的含水量是不是高了
一般我们做固体培养都是干物质：水=1：1

先从培养基的配置方面查找,不要进入杂菌,原料是否齐全,条件符合吗
引入菌种过程
后期培养条件,具体我也记不起来,你可以去查这方面的资料

design table of factors and levels of the fermentation medium Orthogonal optimization experiment
the quantity of cell changes with the fermentation time

蛋白胨为氮源、乳糖为碳源,胆酸盐为抑制剂（抑制革兰氏阳性细菌）,溴甲酚紫指示剂（变黄则细菌产酸）该培养基为选择性培养基,选择性生长利用乳糖为碳源的革兰氏阴性菌,根据是否产酸产气判断样品是否为大肠菌群.

YPD培养基又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YEPD）琼脂培养基 　　用于酵母菌的培养 .配方：1% 酵母膏 ,2% （蛋白胨） ,2% 葡萄糖）,若制固体培养基,加入2%琼脂粉.培养基的选择主要看你要培养什么.因为斜面培养基和种子培养基主要目的是让菌体张起来,扩大培养.但发酵培养基由于牵扯到目标产物的生产所以需要优化组分,提高效价.你所写的固体培养基基本没问题,不过最好把酵母粉换成酵母浸粉这样好利用,去掉琼脂就可以凑合者当种子培养基.但是发酵培养基就需要优化了,起码要有迟效碳源,迟效氮源,无机盐生产因子等.酵母发酵培养基可以在种子培养基的基础上参考加入0.1%的硫酸铵.
这个可以查到
种子培养基 葡萄糖100g/l,蛋白胨5.3g/l,酵母膏2g/l尿素2g/l硫酸镁0.5g/l ph自然
发酵培养基 葡萄糖100g/l,蛋白胨1.8g/l,酵母膏0.5g/l 磷酸二氢钾2g/l ph自然
参看http://www.***.com/p-173940813.html

呼吸生长
C12H22O11 + 5.84 O2 + 0.99 NH3 = 5.8 CH1.9O0.57N0.17 + 6.2 CO2 + 6.97 H2O
发酵生长
C12H22O11 + 0.12 NH3 + H2O = 0.66 CH1.9O0.57N0.17 + 3.8 C2H5OH + 3.8 CO2
酒精生长
C2H5OH + 1.84 O2 + 0.185 NH3 = 1.09 CH1.9O0.57N0.17 + 0.91 CO2 + 2.24 H2O
仅供参考.

没有专门针对木霉的培养基.木霉是一种适应能力很强的霉菌,如果你是在实验室里小规模培养的话,一般的霉菌培养基都能培养出来,比如PDA培养基、高盐察氏培养基、孟加拉红培养基等等,很多的.
推荐用PDA培养基,其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水煮烂（煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即 煮马铃薯块可）,用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管,加塞、包扎,（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或倒平板,冷却后贮存备用.对ph要求不高,一般不用调.

如果是偏酸（多数情况下是偏酸）,则用碳酸氢钠或者很稀的氢氧化钠调节.
如果是偏碱,则用稀盐酸调节.
要注意调节的时候一定要缓慢,不断搅拌摇晃,不然一不小心就调过头了.

要添加蛋白胨比较好,蛋白胨蛋白比豆粕,玉米高出很多.我做过这方面的实验.

后者比前者要灵敏得多
乳糖发酵培养基基本上不具备修复已损伤的细胞的作用,而月桂基硫酸盐胰蛋白胨则可以,因此,后者较前者检出的概率也会大很多.
另外,减少了人为的误差.03版需要挑选菌落,受人主观的影响很大,你没有挑对或挑取的不够多都会导致假阴性结果,而08版采取增菌液接种,会减少假阴性.

培养的细菌还是真菌

比胆盐稳定性好,抑制G阳性菌生长,易观察结果,对损伤菌有修复作用,检出率提高

乳糖胆盐培养基和乳糖胆盐发酵培养基应该是同一种培养基,不过一般都叫做乳糖胆盐发酵培养基.
乳糖胆盐发酵培养基和乳糖发酵培养基一起用于检测大肠菌群.前者是用于发酵试验,检测菌是否产气,后者用于证实试验.
乳糖胆盐发酵培养基：
20g蛋白胨、5g 猪胆盐及10g乳糖溶于1L水中,校正pH为7 .4,加25ml溴甲酚紫指示液(0.4 g/L),分装每管20 ml,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌20 min.
乳糖发酵培养基：
将20 g蛋白胨和10g乳糖溶于1L水中,校正pH至7.4,加入25mL溴甲酚紫指示液(0.4g/L),按检验要求分装,并放人一个小倒管,加热至115℃高压灭菌15 min
检测方法：
乳糖发酵实验
接种2mL待检样品于乳糖胆盐发酵管内.接种3个稀释度,每一稀释度接种3管,置（36土1)℃温箱内培养（24士2) h.如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠杆菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行.
3、分离培养
将产气的发酵管分别转接在伊红美蓝琼脂平板上,置（36士1)℃恒温箱内培养18一24 h.取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验.
4、证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置（36士1)℃恒温箱内培养（24士2) h,观察产气情况.凡乳糖产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽袍杆菌,即可报告为大肠菌群阳性.
会,这种要按照要求灭菌,因为这些培养基中含有乳糖,在121℃时肯定会焦化,从而不能给微生物提供必要的碳源来源.
不太清楚你说的乳糖胆盐培养基配方是什么?你能不能给出来.另外我坚持我的观点就是灭菌那个不行,糖会焦化
嗯,这两个培养基配方是一样的,所以它们是同一种培养基,你看看我的发酵培养基配方……
乳糖发酵培养基、乳糖胆盐发酵培养基必须做的,那个因为重复,所以可以不做的.如果不放心的话可以查一下国家标准,我给你粘贴的就是国标一部分

培养基 (1)高氏一号培养基(1 L).可溶性淀粉20 g,KNO31.0 g,KH2PO4 0.5 g,MgSO4
0.5 g,NaCl 0.5 g,FeSO40.01 g,琼脂15 g,pH=7.7.6.于121℃高压蒸汽下灭菌20 min.
(2)种子培养基(1 L).土豆200 g,胰蛋白胨5 g,酵母膏3.0 g,葡萄糖10 g,KH2PO42.0 g,MgSO40.8 g,CaCl20.3 g,pH=6.0.于115℃高压蒸汽下灭菌30 min.
(3)基础发酵培养基(1 L).土豆200 g,葡萄糖20 g,KH2PO43.0 g,MgSO41.5 g,胰蛋白胨5.0 g,
L-酪氨酸1.0 g,pH=5.9.于115℃高压蒸汽下灭菌30 min.

酵母中N源含量一般在10%左右,大多是9%多一点的.资料来源,《现代细菌学培养基和生化试验手册》

没什么影响