定 的BAMH1 的酶切试剂不能进行酶切是什么原因 ?

（1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因限制酶；二是将目的基因与运载体拼接的DNA连接酶；三是作为运载体的质粒．
（2）用同一种限制酶将有目的基因的DNA与运载体（质粒）切割，形成相同的黏性末端，经DNA连接酶进行拼接形成重组DNA，可能有“目的-目的基因”、“目的基因-运载体”、“运载体-运载体”三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是目的基因-运载体．
（3）图（一）所示的质粒中含有tct^R为四环素（抗生素）抗性基因，拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物必需含有四环素抗性基因，即运载体-运载体、目的基因-运载体．
（4）据图分析，P为启动子，是RNA聚合酶识别和结合的位点；将重组DNA导入动物受体细胞的常用方法是显微注射法．
（5）在基因工程中，限制酶（限制性内切酶）能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，即作用于图（二）的a位置；DNA解旋酶作用于氢键，即b位置．
故答案为：
（1）限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶
（2）目的基因-目的基因 目的基因-运载体 运载体-运载体 目的基因-动载体
（3）运载体-运载体 目的基因-运载体
（4）P（启动子） 显微注射法
（5）限制酶（限制性内切酶） DNA解旋酶

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图和解决问题的能力，属于中档题．

A、h基因时H基因突变形成的，因此h基因特定序列中Bcl1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果，A正确；
B、由以上分析可知该病是伴X染色体隐性遗传病，所以II-1的基因型为X^hY，其中X^h来自母亲，B错误；
C、II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，说明其同时具有H基因和h基因，即基因型为X^HX^h，C正确；
D、II-3基因型及概率为[1/2]X^HX^H或[1/2]X^HX^h，其儿子中出现X^h的概率为[1/4]，D错误．
故选：AC．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题结合酶切结果图和系谱图，考查伴性遗传、基因工程的原理和技术等相关知识，首先要求考生认真审题，结合题干信息“某致病基因h位于X染色体上”和图示信息判断该病的遗传方式；其次根据伴性遗传的特点，判断图中各个体的基因型，计算相关概率．

A、等位基因是位于同源染色体相同位置上控制相对性状的基因，所以基因amp和tet不是一对等位基因，故A错误；
B、重组质粒1的复制原点被破坏，虽然含有氨苄青霉素抗性基因，但仍然不能在含有含氨苄青霉素培养基上生长，故B错误；
C、若要确定目的基因是否表达，可选重组质粒2、3或4导入受体细胞，再进行筛选和检测，故C错误；
D、重组质粒4的四环素抗性基因被破坏，因此导入重组质粒4的大肠杆菌不能在含有四环素的培养基上生存，故D正确．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的应用．

考点点评： 本题考查基因表达载体的构建，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识作出准确的判断和得出正确的结论．

A、等位基因是位于同源染色体相同位置上控制相对性状的基因，所以基因amp和tet不是一对等位基因，故A错误；
B、重组质粒1的复制原点被破坏，虽然含有氨苄青霉素抗性基因，但仍然不能在含有含氨苄青霉素培养基上生长，故B错误；
C、若要确定目的基因是否表达，可选重组质粒2、3或4导入受体细胞，再进行筛选和检测，故C错误；
D、重组质粒4的四环素抗性基因被破坏，因此导入重组质粒4的大肠杆菌不能在含有四环素的培养基上生存，故D正确．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的应用．

考点点评： 本题考查基因表达载体的构建，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识作出准确的判断和得出正确的结论．