结晶紫系列物质可否用同种液相色谱法分析 能有结晶紫内酯的液相色谱分析更好

草酸铵结晶紫就是龙胆紫,染色之后的大肠杆菌是深紫色的

你的问题不全.
应该是氯化胆碱加入乙酸汞溶液,生成胆碱的乙酸盐,乙酸盐再用高氯酸标准溶液滴定.生成胆碱的高氯酸盐和醋酸.是酸碱滴定,价态不变.
2[(CH3)3NCH2CH2OH]Cl+Hg(CH3COO)2 === 2(CH3)3NCH2CH2OH(CH3COO)+HgCl2(s)
(CH3)3NCH2CH2OH(CH3COO)+HClO4===(CH3)3NCH2CH2OHClO4+CH3COOH

这两种琼脂虽然都和大肠菌群有关,但是不同的项目就应该选择国家标准上规定的琼脂来做,不可混用.如果你是做食品,那么应该根据GB4789.3-2010中的平板计数法来测定,此时用的就是VRBA如果你是做饮用水,那么应该根据GB/T5...

——染料分子的直径意义不大,因为染料分子的长度虽然是以“A”为计量单位的,大约就是十几A,也就是几分之一纳米.而单个染料分子的直径根据染料品种不同,大致也在A的数量级范围内,很多单链分子的直径应该还不足1A,酞菁结构的染料分子要稍稍大些,你所说这种罗丹明染料,属于氧杂蒽类的杂环染料,单分子直径要稍微大一些,也不过就是几A而已.
但是,实际应用中,染料分子很少以单分子形式溶解,而是以胶束团的形式溶解在水中的.这种胶束团跟表面活性剂分子在水中的聚集形式相似,亲水基朝向外部、亲油基朝向中心,形成一个球状胶束团.多数染料胶束聚集体的直径约为50纳米左右,长度约为300纳米左右—— 必需明白,这个不是染料分子的直径和长度、而是染料聚集体的长度和直径.
而且,这是在水中溶解的染料胶束团的尺寸,而不是固体颗粒染料的颗粒团直径.染料固体颗粒团的直径跟染料分子大小无关,只跟生产染料的研磨工艺有关.

结晶紫染色法测定细胞数
1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液）,37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时,让细胞帖壁.
2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3～5倍递次稀释待检样品,每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品,每个稀释度3个重复孔.对照孔6个,3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液,3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液.继续培养18～24小时.
3．甩去培养液,用PBS小心洗涤一次,每孔加0.1ml 10％甲醇溶液固定细胞30秒钟.
4．吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml结晶紫染液,室温中放置20分钟.
5．轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分.自然干燥或37℃烘干.此板可以在室温中长期保存.
6．测定前,每孔加0.1ml 33％醋酸脱色,充分振荡后在570nm处测定光吸收度.用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图,比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性
Giemsa染色
1．染液配制
　　I液的配制：
　　迈格染料 lg
　　甲醇 100ml
　　在研钵内用少量纯甲醇将染料充分研磨成均匀一致的悬液,倒人烧瓶中,加入其余的甲醇后置入37℃温箱4-6小时,每隔半小时研磨半小时,然后放入深棕色瓶内,在室温下保存,2周后使用.临用前取上液40ml,加纯甲醇20ml混合用作工作液.
　　Ⅱ液的配制：
　　姬氏染粉 0.6g
　　甘油 50ml
　　甲醇100ml
　　将姬氏染粉溶于甘油内,在研钵内研磨3-4小时,使之磨匀,加入纯甲醇后搅拌均匀,放入深棕色瓶内,室温下保存,2周后即可使用.
　　磷酸缓冲液配制：1％磷酸氢二钠20ml,l％磷酸二氢钠30ml,加蒸馏水至1000ml,调整pH 6.4-6.8(用蒸馏水代替缓冲液,效果亦佳).
2．染色步骤
　　(1)自然干燥的细胞涂片(预先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上.
　　(2)将I液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)滴盖涂片上,lO-30分钟.
　　(3)倒弃涂片上的I液,自来水漂洗干净.
　　(4)立即滴盖Ⅱ液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)在涂片上染色10-30分钟.
　　(5)倒弃涂片上的Ⅱ液,自来水漂洗干净.
　　(6)趁湿加盖片或待干后镜检.
3．染色结果
　　MGG染色将细胞核染成紫红色,细胞质和核仁染成蓝紫色.

用20 ％硫酸铜溶液中冲洗可能是为了能够充分洗去染料,使菌体和荚膜能够更好的区分开来

这是非水滴定,酸碱中和反应,方程式就是咖啡因加高氯酸=咖啡因高氯酸盐,加入冰醋酸是为了防止氢离子水和,降低高氯酸酸性,加醋酐有两个目的1是可以消除系统中微量水分,2是使原料药中伯胺和仲胺杂质乙酰化,使之失去碱性,单独滴定咖啡因,利用高氯酸非水滴定可以滴定产物中的伯胺、仲胺、叔胺.

你是想问怎么设计实验吗?
假设要做3个不同浓度梯度的染料,0,0.5,1.那么就倒三个培养基,培养基中分别含有三种菌.由于是和菌在一起倒平板,因此,注意倒培养基的温度.之后用打孔器在每个培养基上打9个孔,加入3种梯度的结晶紫溶液.每种浓度的结晶紫加入3个孔中,形成3个重复样本.或者使用圆形小滤纸片也可以,也要做3组重复.37度培养12h,之后量出抑菌圈的大小,求平均值,并比较不同浓度的结晶紫对菌的影响,以及相同浓度的结晶紫对不同菌的影响!
明白不?
不明白可以继续提问!

有可能的原因是 火焰固定的时间不够至使菌种没有很好的固定在玻璃片上 或者是 染色 脱色 复染的过程中所用试剂的流量过多把菌种冲掉了,切记要缓慢进行.

你是在做大肠菌群计数吧?
在已经倾注好并凝固了的平板上再倒一次琼脂,那是为了防止表面有迁徙性细菌生长,因为一旦有迁徙性菌落生长蔓延,如果没有超过半个平板,还可以用另一半计数乘以2来计算,如果超过一半,那这块平板就不能用于计数了.
再倒一次琼脂把可能存在的迁徙性菌落封在琼脂内,让其不能蔓延开来,这样就不会对结果观察造成影响了.
每个稀释度做两个平皿,所有使用琼脂进行微生物计数的方法都是这样.因为微生物很难分散得足够均匀,取平均值较为可靠.另外也可以在一定程度上预防污染,一块污染了还可以用另一块.

革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性,是由这两类细菌细胞壁的结构和组成不同决定的.实际上,当用结晶紫初染后,像简单染色法一样,所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色.碘作为媒染剂,它能与结晶紫结合成结晶紫一碘的复合物,从而增强了染料与细菌的结合力.当用脱色剂处理时,两类细菌的脱色效果是不同的.革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成,壁厚、类脂质含量低,用乙醇(或丙酮)脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色.革兰氏阴性菌则不同,由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高,所以当脱色处理时,类脂质被乙醇(或丙酮)溶解,细胞壁透性增大,使结晶紫-碘的复合物比较容易被洗脱出来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂的红色结晶紫PH属于碱性(7

使死细胞着色的大多是酸性染料,它们不容易穿透活细胞的质膜进入细胞内,却能渗进死亡的细胞,使之着色.
本题应该是选酸性的番红
鉴别细胞生命状况分为两种染色法
第一类：死细胞染色法
1. 台盼兰(Trypan Blue) ： 将台盼兰溶于被检测细胞所需的生理盐水中, 配成0.5—1.0%溶液,调PH7.0—7.2,每毫升细胞悬液约加0.1毫升染液,混合后约2分钟即可镜检.死细胞被染成蓝色.（因台盼兰有轻度的毒性,染色时间不宜太长.染色时间15分钟以上,活细胞也会因为受损而着色.台盼兰染液不宜久存,陈旧者有毒性.）
2. 苯胺黑(Aniline black) ：0.05%苯胺黑 Hanks溶液以 1：10量与细胞悬液混合1-2分钟后,镜检,死细胞着黑色.此染料毒性很小.
3. 赤显红B(Erythrosin B) ：细胞先用Hanks液或 PBS溶液洗,以除尽培养基中的或细胞周围的血清,取适量细胞与0.02%的赤显红 B混合,两小时之内镜检,死细胞着红色.
第二类：活细胞着色法
0.5%的结晶紫生理盐水溶液与细胞悬液1：2混合,立即镜检,活细胞染成兰色.此外使活细胞着色的染料还有亚甲基兰(Methylene blue) 、甲苯胺兰(Tolublue) .

样品号 指示剂名称 变色范围 指示剂法的终点体积(ml) 电位法的终点体积(ml) 终点误差(以电位法为准)
1 结晶紫 复杂(紫→蓝) 6.37 6.83 -6.7%
2 α-萘酚苯甲醇 8.9.8(绿→黄) 6.26 6.40 -2.0%
3 喹哪啶红 1.3.2(红→无色) 6.16 6.16 0
结晶紫的变色范围较复杂,颜色变化有紫、蓝、蓝绿、黄绿、黄,突跃点附近指示剂的 颜色变化不明显,而显著的变色点明显早于滴定终点.

紫色

细菌鞭毛直径只有10～30nm,远低于光学显微镜的分辨率.
用普通的结晶紫番红等方法染色,在显微镜下也是看不到的.
其实结晶紫可以用作鞭毛染色,不过方法和普通的不一样,会在鞭毛周围沉淀,使鞭毛变粗.

结晶紫番红是用来染细胞核的,鞭毛非常细不容易观察,如果不用银染等对比非常强的办法很难观察到