克隆载体与表达载体有哪区别?它们分别都有哪些常见的类型?

gxiao6225112022-10-04 11:39:541条回答

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雪候鸟3 共回答了24个问题 | 采纳率87.5%
克隆载体:大多是高拷贝的载体,一般是原核细菌,将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接,再导入原核细菌内,质粒会在原核细菌内大量复制,形成大量的基因克隆,被克隆的基因不一定会表达,但一定被大量复制.表达载体就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),是目的基因能够表达的载体.克隆载体目的在于复制足够多的目标质粒,所以常带有较强的自我复制元件,如复制起始位点等,往往在菌体内存在多拷贝,所以抽质粒会抽出一大堆.但不具备表达元件.而表达质粒有复杂的构成,为的是控制目标蛋白的表达,如各种启动子(T7),调节子(LacZ)等,而且以pET为代表的表达载体在菌体内都是低拷贝的,防止渗漏表达.是否含有表达系统元件,即启动子--核糖体结合位点--克隆位点--转录终止信号,这是用来区别克隆载体和表达载体的标志.…………………… …………………… 表达载体 http://product.bio1000.com/100019/
1年前

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基因工程为何要先构建克隆载体然后后构建表达载体能否在获得cDNA后直接连到表达载体上
joiceQ1年前1
茶壶颠倒梦想 共回答了20个问题 | 采纳率85%
你得到的cDNA的量是很少的,先放在克隆载体上是为了获得更多的你所需要的cDNA,这样做的话不至于在做完实验后突然发现你要的那个cDNA被你用完了,然后你又要重新再去很复杂的提取
简述用T-克隆载体进行PCR产物克隆的原理
童影1年前3
aa463490 共回答了20个问题 | 采纳率80%
T克隆的原理是基于常规PCR反应中所使用Taq聚合酶能够在PCR产物的3‘末端非特异性添加一个A,这样实际上常规PCR产物都含有3端突出一个A的粘性末端.基于这个原理,常规的线性T-克隆载体(PUC18和PUC19等)在其3’末端添加一个T,这样的载体能够和任何PCR产物进行连接克隆,并不需要添加任何特异性的粘性末端位点.这个就是T克隆的原理了.
克隆载体与表达载体的区别如题
从头发开始1年前1
feitian49709046 共回答了15个问题 | 采纳率86.7%
克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达 但一定被大量复制
而表达载体是一些用于工程生产的细菌 他们被导入目标基因 这些目标基因会在此类细菌中得到表达 生产出我们需要的产物 导入的基因是有克隆载体产出的
请以质粒为例,简单图示你所认为理想的克隆载体和表达载体所需的基本元件
沈必醉1年前1
小伙嘎嘎黑 共回答了23个问题 | 采纳率87%
质粒作为载体在高中一般是用于基因工程,构建一个导入受体细胞的重组质粒必须是标记基因(比如抗四环素基因等等)用于检测重组质粒是否进入受体细胞,还有启动子和终止子,用于开启转录和结束转录,最关键的是目的基因,一进入细胞,要检测它是否表达,要用三种方法:DNA分子杂交,分子杂交,抗原抗体杂交
为什么pcr扩增后不直接进入表达载体,而要经过克隆载体呢?关键原因是什么呢?
ziling80131年前2
dickenson 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%
克隆载体可以使目的基因在宿主中低成本便捷的扩增
克隆载体便于稳定保存目的基因
克隆载体上有很多合适的酶切位点供选用
克隆载体提供验证,如测序,的方法
在基因工程实验中采用puc18质粒作为克隆载体的优点是什么?
在基因工程实验中采用puc18质粒作为克隆载体的优点是什么?
请分点简要一点回答~
65184881年前2
打仗的兵 共回答了15个问题 | 采纳率93.3%
1 松弛质粒,可在宿主菌中大量存在,有利于增加克隆数量.
2 具有多克隆位点,便于插入外源基因
3 具有抗生素抗性基因,便于筛选转化子.
4 具有lacZ基因,可进行蓝白斑筛选,便于筛选重组子.
怎么构建克隆载体和表达载体?
love_TonyT1年前1
我头大了 共回答了20个问题 | 采纳率90%
首先根据你的实验需要选择相应的载体
其次分析你的基因序列以及载体序列上的酶切位点,切记在载体上所选择的酶切位点要和你的基因序列上相一致,并且这两个酶切位点在你的基因序列中并不存在,否则会将基因切断
再次就是对基因和载体进行酶切了,基因要是直接用带有酶切位点的引物进行PCR的话就不用再酶切了.酶切之后进行连接,一般都有连接试剂盒的.
最后的重组质粒要转化至大肠杆菌中进行扩增,然后提取这个质粒进行酶切鉴定.
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急
加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了
ruorantian1年前1
lyjuan暖暖 共回答了17个问题 | 采纳率88.2%
不管酶切还是PCR,都是间接的结果.要确定克隆的正确,一定要测序的啊.
你测个序,问题就迎刃而解了.到底是什么问题也就清楚了.
简述克隆载体及基本元件
宇欢1年前1
kily8789 共回答了14个问题 | 采纳率92.9%
在细菌或酵母等中的复制起始点
多克隆位点(切割用)
抗性或其他特殊基因(筛选用)
克隆的目的基因
可能主要是这些,凭记忆写的.
克隆载体与基因片段重组,与表达载体与基因片段重组,最后导入动物体内,哪个更好呢?
克隆载体与基因片段重组,与表达载体与基因片段重组,最后导入动物体内,哪个更好呢?
克隆载体表达蛋白量很小,为什么很多实验还是采用,克隆载体与基因片段重组呢?它与表达载体与基因片段重组区别在哪呢,或是有什么优势么?
杨长春1年前2
nocer 共回答了22个问题 | 采纳率100%
克隆载体主要是用来进行DNA的重组、目的基因的分离和纯化等等.
而表达载体主要是进行目标基因的真核或者原核表达.
两种载体的用途不同各有优势,如果你想要做蛋白的表达,那么就选用表达载体比较好.
pUC克隆载体相邻酶切位点PstI,SalI,XbaI酶切效率如何?
AndyDufresnee1年前1
zz夕阳 共回答了10个问题 | 采纳率100%
先用PstI酶切,再用SalI酶切,酶切效果很差
先用SalI酶切,再用PstI酶切,酶切效果较好
用PstI和SalI分步酶切:酶切效果很差
克隆载体在生物体内的表达蛋白的量小,为什么有的实验,还将含有目的基因的克隆载体,直接打入生物体内
可爱的CAE1年前1
zhangyi870830 共回答了18个问题 | 采纳率77.8%
克隆载体,顾名思义,主要是用来做克隆或者亚克隆的,也可以用于测序目的,很少用于表达
它与表达载体的主要区别,在于缺少强启动子
请问plem415是表达载体还是克隆载体?
知已何求1年前1
gdxx 共回答了18个问题 | 采纳率88.9%
是克隆载体
哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大
mmdd1年前1
冰兮 共回答了19个问题 | 采纳率89.5%
我知道的就是腺病毒,它的导入整合能力较强,容量也比较大,不知道说的对不对,因为我们做实验用的就是这个,大肠杆菌的质粒应该也可以
表达载体和克隆载体一样吗?有什么区别?实验室常用有哪些?
神葱教十三香主1年前2
sukyu 共回答了22个问题 | 采纳率90.9%
1.不一样
2.载体的分类
按功能分成:
(1)克隆载体:都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增.它是用来克隆和扩增DNA片段(基因)的载体.
(2)表达载体 :具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译所必需的DNA顺序的载体.
3各自特点
克隆载体:大多是高拷贝的载体,一般是原核细菌,将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接,再导入原核细菌内,质粒会在原核细菌内大量复制,形成大量的基因克隆,被克隆的基因不一定会表达,但一定被大量复制.克隆载体只是为了保存基因片段,这样细胞内不会有很多表达的蛋白质而影响别的工作.
表达载体:有的是高拷贝的,有的是低拷贝的,各有各的用处,是一些用于工程生产的细菌,被导入的目标基因会在此类细菌中得到表达,生产出我们需要的产物,导入的基因是由克隆载体产出的.表达载体具有较高的蛋白质表达效率,一般因为具有强的启动子.
4.区别标识
是否含有表达系统元件,即启动子--核糖体结合位点--克隆位点--转录终止信号,这是用来区别克隆载体和表达载体的标志.
在遗传学上,克隆载体、表达载体、克隆宿主、表达宿主如何准确定义?
在遗传学上,克隆载体、表达载体、克隆宿主、表达宿主如何准确定义?
克隆载体:
表达载体:
克隆宿主:
表达宿主:
tochenshen1年前1
行者无绪 共回答了23个问题 | 采纳率78.3%
1.就是能够通过限制性内切酶,将目的DNA片段整合进去,并且能够转入宿主细胞进行表达的生物DNA.
常见的有质粒,病毒,噬菌体等
2..就是用来连接植入基因的DNA链.
3.人工克隆的受精卵所在发育的那个母体.
4.就是用来表达植入基因的个体.
以E.coli为例,表达载体比克隆载体多了那些功能原件,各有什么生物学功能
tanyazh1年前2
83149241 共回答了18个问题 | 采纳率94.4%
克隆载体主要是用于目的基因的拷贝,是用以复制扩大目的基因的工具,含有复制起点(ori)、多克隆位点(MCS)以及抗性基因位点.典型的如pUC19
而表达载体主要用以目的基因的转录,使目的基因编码的蛋白得以表达,除含有ori、MCS和抗性基因外,另有启动子(转录因子结合位点)、增强子、RBS(核糖体结合位点)等.典型的如pBR322