用fermentas的Kpn1和bamH1做双酶切,用的buffer是Buffer bamH1,做了几次都是质粒自连,怎

银耳糖水2022-10-04 11:39:541条回答

用fermentas的Kpn1和bamH1做双酶切,用的buffer是Buffer bamH1,做了几次都是质粒自连,怎么办

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liupinjinshi 共回答了20个问题 | 采纳率85%
质粒自连说明双酶切没有切开.
不知道你的buffer是怎么选的,如果两种酶在buffer中的活性不同的话,活性较低的那个可以加大酶量,同时延长酶切时间,或者更换buffer.
条件需要自己摸索.
1年前

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我在做实验的过程中要用到Fermentas的Not 1 和Apa 1两种内切酶,我想知道这两种酶公用的Buffer是哪一种,特急!请知道的人马上告诉在下,在下感激不尽!
紫风铃1234561年前1
jielawyer 共回答了16个问题 | 采纳率81.3%
NOT1 用O 橙色buffer
APA1 用B 蓝色buffe