福林试剂绿色一直不退怎么办?今天一整天在配福林试剂.回流10个小时以后,加了硫酸锂和液体溴后,绿色一直不退,如今邮过去2

pingan19772022-10-04 11:39:541条回答

福林试剂绿色一直不退怎么办?
今天一整天在配福林试剂.回流10个小时以后,加了硫酸锂和液体溴后,绿色一直不退,如今邮过去2个小时了,怎么破?

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戎712 共回答了16个问题 | 采纳率87.5%
溶液绿色一直不退,需再加数滴液溴,再蒸沸除去,冷却后定容至1000.1、原理:蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸,在碱性条件下,可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色(生成钼蓝和钨蓝化合物).蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用比色法测定.2、福林试剂的配制:于2000ml磨口回流装置内加入钨酸钠(Na2WO4?℉2O)100g,钼酸钠(NaMoO4?℉2O)25g.水700ml,85%的磷酸50ml,浓盐酸100ml,文火回流10h,加入硫酸锂(Li2SO4)150g,蒸馏水50ml,混匀取去冷凝器,加入几滴液体溴,再蒸沸15min,以驱逐残溴及除去颜色,溶液应呈黄色.若溶液有绿色,需再加数滴液溴,再蒸沸除去,冷却后定容至10003、测定方法将1ml标准蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸缓冲液加入试管中,在40℃保温10min,迅速加入1ml酶液,保温15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反应.取滤液1ml加入0.55M的碳酸钠溶液5ml和福林试剂0.5ml,40℃水浴10min显色,在OD680处比色.
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中文名称:福林试剂 英文名称:Folin reagent 定义:一种能与酚羟基呈色的磷钼酸-磷钨酸试剂.可与蛋白质分子中酪氨酸残基作用生成深蓝色化合物.在劳里法蛋白质定量中也使用该试剂.
用福林试剂测过蛋白酶活力的高手请进.我想用福林法测定蛋白酶活力,不太明白步骤,
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http://blog.sina.com.cn/s/blog_60aa3ed50100dhdh.html
这个可能有点参考价值.
主要就是配标准蛋白质溶液测定吸光度,做出标准曲线,然后将蛋白酶加入样品中,根据吸光度变化求得蛋白酶分解的蛋白质的量,然后就可以求出来了.