异戊醇结构式,和系统命名法

苯酚是很强的蛋白变性剂,PCR酶也是蛋白,会因此而变性.另外加氯仿的作用就是去除可能在抽提的的DNA中残存的苯酚.

酚是强烈的蛋白质变性剂,能有效使蛋白质变性而除去,氯仿有强烈的脂溶性,去除脂类杂质,本身酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的主要作用是抽提蛋白质
刚期末考完居然有人问……要再过一星期我就回答不出来了5555

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来.
使用苯酚抽提细胞 DNA 时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了 DNase 的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与 DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶.蛋白分子溶于酚相,而 DNA 溶于水相.
氯仿的作用是克服酚的缺点；加速有机相与液相分层.最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的迹量酚.（酚易溶于氯仿中）
用酚-氯仿抽提细胞基因组 DNA 时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡.异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡 产生.另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定.

乙酸可与小苏打反应生成离子化合物后蒸馏即可,操作方便简单,效果显著,而除异戊醇操作则较为复杂且效果不是很好

多加点TE,然后加入等体积的酚:氯仿:异戊醇,反复颠倒或者在漩涡振荡器上振荡,然后离心
一般使用酚之后,还要用氯仿：异戊醇再抽提一到二次,除去酚

我记得我用的Tris饱和酚

因为乙酸可与小苏打反应生成离子化合物后蒸馏即可,操作方便简单,效果显著,而除异戊醇操作则较为复杂且效果不是很好.
希望对你有帮助!

氯仿／异戊醇用来变性和沉淀蛋白质.可称为变性液.
CTAB才是提取液.
冰冻的异丙醇或乙醇是沉淀液.

酚是在 常温下是固体,微溶于水,在60度左右 能与水互溶,具有还原性,从以上那个的酚的性质就可以 知道提取RNA时候,先加酚是不可行的.

楼主：这是我收藏的别人的实验心得,你看一下,希望对你有帮助.
抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?酚与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性.经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开.而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层.作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水相有一定程度的互溶,大约10％～15％的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA.所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好.经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走.也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合（1:1）使用.
为什么用酚与氯仿抽提DNA时,还要加少量的异戊酵?在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用.加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生.一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比.也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24:1（不必先配制,可在临用前把一份酚加一份24：1的氯仿与异戊醇即成）,同时异戊醇有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定.

酚、氯仿是变性蛋白质的（由于苯酚能溶进少量水损失DNA,因此与氯仿一起使用,减少DNA损失）
异戊醇是消泡剂（蛋白质变性中常常产生气泡,会损失DNA,因此需消泡）

上层是水.
氯仿：使有机相和水相易分层,增加核酸得率,同时可除去脂类.
1. 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25 : 24 : 1).氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡.
2. 配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24 : 1）混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存.
再用酚:氯仿:异戊醇抽提二次,每次回收上层水相.