紫外分光光度法和比色法有什么区别,联系

光源不一样啦

很专业的问题,建议看书

COD不用紫外测,用可见光,具体见《水质化学需氧量的测定 快速消解分光光度法》（HJ ／ T 399 2007）

第一个问题说明：在双波长测定中,背景干扰在220nm（测定波长）处的A（吸光度）值是275nm处A（吸光度）值得2倍.

氢氧化钠没有紫外吸收,不可以用分光光度法

直接测定水中的铁离子含量,自己做一条曲线,资料网上都能找得到.用到邻菲啰呤,硫酸亚铁,盐酸等试剂.

当然要用空白了,不过不是为了画标准曲线,空白做参比是为了调节机器的吸光度为零的点.因为溶剂和比色皿都会有反光的作用.溶剂一定程度上也会吸光.

过大,基本难以测出准确的含量；需要重新测量,一般知道大概含量后在称取合适的量.过小一般问题不是很大,但太小则同样影响准确性.

空白吸光度小于0.030就行

可以用紫外分光光度法,氮的最低检出浓度为0.05 0m g/L,测定上限为4mg/L,虽然你的总氮含量在30左右,你做个稀释就可以了,比如10倍.建议测3个平行样.

相对UV而言,HPLC具有分离功能,通过将混合物分离后,再对目标物质进行定量分析,它比UV法更准确、灵敏度高、干扰较少等优点；而UV法测定时,只要在所选波长条件下有紫外吸收的物质均可测定,因此干扰较大,测定不准确,两者结果自然差别很大.

怎样才是精确的?
1.OD值在一定范围内是比较精确的,范围我忘了.
标准液在范围内作出的标准曲线才是比较精确.
2.如果待测样品的OD值在标准曲线大概中间的位置,可认为是相对标准的.
在边上甚至在曲线外（标准曲线外推得到）相对误差就比较大.
浓度过大或过小会使误差增大.

答：紫外分光光度法测定苯的特征吸收峰，有3个吸收带：
【1】185nm，强吸收带，E1带；
【2】204nm，强吸收带，E2带；
【3】230 - 270 nm，精细结构吸收带，B带。

紫外分光光度计可以测量吸收谱.
不同的溶液有不同的特征谱.
将待测得样品配成一定浓度的溶液,用分光光度计测吸收谱.
吸光度=I/I0 = k * l * c可以被测量出来.
k为吸收系数,对于一种溶液是一个可以按照标准标定的数值（当然它是波长的函数）；
l是测试时候石英比色皿的厚度,是已知的,一般都是一个厘米厚；
这样就可以计算出来c这一项,这是溶液浓度,结合你配置溶液的时候的比例就能定量算出来含量了.

在60℃以上的水溶液中过硫酸钾按如下反应式分解,生成氢离子和氧.
K2S2O8+H2O == 2KHSO4+1/2O2
KHSO4 == K++HSO4-
HSO4- == H++SO42-
加入氢氧化钠以中和氢离子,使过硫酸钾分解完全.
在120℃~124℃的碱性介质条件下,用过硫酸钾作氧化剂,不仅可将水样中的氨氮和亚硝酸盐氮氧化为硝酸盐,同时将水样中大部分有机氮化合物氧化为硝酸盐.

有机物的定性鉴定,即判断未知物是否是已知结构.
依据：利用紫外光谱定性分析应同时考虑吸收谱带的个数、位置、强度、以及形状.从吸收谱带位置可以估计被测物结构中共轭体系的大小；结合吸收强度可以判断吸收带的类型,以便推测生色团的种类.

该怎么做就怎么配么,是乙醇相的还是其它什么相的；不要做曲线,既麻烦误差又大不说,还浪费标准样品和时间.配两个标准样品溶液就可以了,并估计能把样品涵盖其中.比如说样品含量约在0.05%,则标准样品可以选择在0.01%-0.1%.

紫外-可见吸收光谱法广泛地用于无极和有机物质的定性和定量测定,灵敏度和选择性较好,可以用于定性和定量分析（计算最大吸收波长,单组份和多组分的定量分析）,以及配合物的自称和稳定常数的测定,研究有机化合物的异构体,测定相对分子质量等.希望对你有用.

可以,至于为什么就不清楚了,2000的药典貌似用的还是紫外分光光度法,到2010就成非水溶液滴定法

1.How do you prepare your blank?
2.what is the material of your 比色皿?
Answer:
这半年测总氮感觉挺有收获 基本把问题弄清楚了 所以也来分享一下
1、过硫酸钾提纯
我觉得这个方法测总氮的主要问题就是过硫酸钾含氮 去年我测试的时候,吸光度甚至达到了4 -_-|| 现在想想真是太恐怖了
听说国外的过硫酸钾没问题 但是实在太贵,另外我也不是完全确定肯定是过硫酸钾的问题,所以我选择重结晶提纯过硫酸钾
在1升广口瓶加入约800mL水,50摄氏度水浴锅加热,然后逐渐加入过硫酸钾,直至不能溶解为止,这个过程挺漫长-_-||
然后把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却（选用广口瓶有盖,重结晶过程避免引入其他污染）,再放进四度冰箱重结晶,建议同时用另一个广口瓶冰一瓶去离子水,重结晶一夜后,倒掉上清液然后用冰好的去离子水清洗几遍,我觉得这样效果更好（重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底,但其实结构很松散,用钢勺什么的弄两下就离散开了,然后再清洗）.我一般都重结晶两次.
洗净后倒掉上清液,然后放入50摄氏度烘箱烘干即可（用广口瓶烘干比较慢,可以转移到烧杯）.
上次结晶了约170克回收了约60克,还比较满意,比买国外的便宜多了!
2、其他药品
去年有大人说氢氧化钠以及盐酸都有影响,但是我都是用的一般分析纯药品,没有造成特别大的影响,应该没问题.
3、消解过程
我选择消解温度为124摄氏度左右,有大人说要避免跟生物实验室公用灭菌锅,会混入污染,不过遗憾的是我们实验室就是生物实验室-_-|| 但是我这半年做的基本没啥问题,消解的时候比色管盖严,用布和绳子把盖子扎严实,基本问题不大.
4、测试
测试的时候要加入1ml 1:9盐酸,我觉得盐酸跟过硫酸钾的反应可能需要一段时间,所以我都是加入盐酸后过几个小时再测试,结果很稳定.
5、结果
现在测试的空白220与275相减后基本都在0.01-0.02（220在0.04 275在0.01左右）,对于我的实验精度已经足够了,标准曲线r=0.9997,不算特别好,但是跟去年空白吸光度4相比,我已经非常非常满足了
6、其他
实验过程中加碱性过硫酸钾的时候一定要避免加在瓶口处,另外消解前混匀样品千万不要倒转比色管,否则消解后会导致比色管打不开,惨痛教训!建议使用50ml比色管,容易混匀!
另外,测试过程中发现比色管的质量影响实验结果!

目的测定氟吡汀的离解常数（pKa）.方法采用UV法进行测定.结果氟吡汀的pKa值为5.52.结论所用方法快速、简便,结果准确、可靠.

摆线针减速机的摆线轮材料

分析化学：仪器分析中的光学分析.

仪器内部将光信号转化为电信号,这个电信号是电流
这个电流经过一系列电路运算变成数字信号,这个数字信号在仪器内部CPU里进行计算就得到了吸光度值,这也就是用户看到的值.

紫外分光光度法简便，快捷，而且仪器已经相当普及，利用不同的物质在紫外光不同的波长处 的吸光度的差别，可以消除干扰测定某种物质的含量。饮用水中含有金融离子、卤素离子、有机物，阴离子表面活性剂、硝酸根、亚硝酸根等杂质，硝酸根在220nm处有较强吸收，在275nm处吸收接近于零，有机杂质在200nm-300nm都有吸收，金融离子、卤素离子、阴离子表面活性剂等杂质或因为吸收很少，或因为含量很低，不会对测定...

紫外—可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200 ~ 800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法.这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子 在电子能级间的跃迁,广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定.
与其他光谱分析方法相比,其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快；
灵敏度高；
选择性好；
精密度和准确度较高；
用途广泛；

紫外光谱的含量计算时,吸收值会叠加的,所以,你在实验时,只要做个扣除样品的对照溶液,然后测出俩吸收值,那就可以计算了

可以的
紫外分光光度法也是一种重要的检测蛋白质浓度的方法.
蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280 nm附近（不同的蛋白质吸收波长略有差别）.

这个问题我也遇到了,最后我只能重新又坐了一次,重新配了一次过硫酸钾 你做标线的时候可以尝试一下不定容到10ml,只加配好的氮的标准使用液和过硫酸钾

1.紫外光谱分析的是配位价电子,一般为特殊配位化合物,金属螯合物等.而有机化合物这个比较少.
2.红外光谱对一般非极性的共价键都有红外吸收.不同的共价键构成,都有不同的红外吸收,比如,羟基,羰基,羧基,甲基,亚甲基,苯环,酰胺基等等 都有特殊的红外吸收.
孰优孰劣,高下自分.
跃迁方面：
电子的跃迁可以分成三种类型：基态成键轨道上的电子跃迁到激发态的反键轨道称为N→V跃迁,如σ→σ*,π→π*的跃迁.杂原子的孤对电子向反键轨道的跃迁称为N→Q跃迁,如n→σ*,n→π*的跃迁.还有一种N→R跃迁,这是σ键电子逐步激发到各个高能级轨道上,最后变成分子离子的跃迁,发生在高真空紫外的远端.
显然,很少有有机物能在高能级跃迁变成分子离子的.你见过几个有机物是离子状态的?
而红外中电子跃迁是从σ→σ*,π→π*的跃迁,即一般的单键,双键电子跃迁,这是很常见的.
所以紫外不适合.

建议楼主用红外分光光度法进行测定,首先是红外的量程比较广,在你不确定水相中油含量的时候优先选择量程大的,虽然精确度差点,但比紫外的适用性广. 查看原帖

对样品的浓度进行稀释,使其吸光度在0.3-0.7abs之间

如果,未知液中有两种组分A和B,并且A、B两种组分在选定的体系下对特定波长吸收状况如下：
一、 波长1下A有吸收,B没有吸收,相当单独测定A
波长2下B有吸收,A没有吸收,相当单独测定B
即相当于在波长1下测定A,在波长2下测定B.同是测定了两种组分的含量.
　　　二、如果不能在同一波长下将A和B的吸收很好分开,可采用光度分析中的双波长、计算机标准谱图解析矛盾方程的方法.这方面应参考分析化学方面的专业书籍.
　　说明,未知液中的多组分的光度测定,方法很多.但也不是万能的.不是所有组分都能（在同一体系下）同时测定.

如果我没理接错的话,就是你需要分析的组分无色或者颜色很浅,而它存在于颜色很深的样品中!对吗?
光的吸收定律最关键的是最大吸收波长!
如果在待测组分最大或者次最大吸收处无干扰,可以正常分析测试的!
你的干扰能确定吗?
最好知道是什么干扰,或者你样品的大致组成呀!
对,应该用高效液相色谱仪法去分离,然后用紫外检测器测试!

1.购买VC标准品,配制一系列一定浓度（被测试浓度左右）的标准溶液,测试它们的吸光度/透光率；
2.将所得的数据计算得到一条标准曲线,可以通过EXCEL直接拟合；
3.测试仪待测VC样品,通过标准曲线计算样品VC浓度.

额,就应该是无色,或者说是肉眼看不到的.用分光光度计测量的是透光率或者说是吸光值,是指溶液中存在的不可透光的非溶解物或凝絮,它并不一定是有色的.影响总氮标曲的因素很多,建议你去各大论坛仔细看看该注意的事项.

验证内容?可否理解为能做什么?
一般来说,用紫外分光光度计来检测,都是测的微量或痕量离子的含量（一般是浓度）,一般其测定需要借助显色剂或退色剂.测定时首先需要配标准溶液,然后测待测样品,得到的吸光度值在标准曲线上查找得到对用的浓度.
要求?检测的要求还是被测物的要求?
监测的时候,一般需要先校正光度计,然后用空白走基线,然后才能开始测定.测定的时候需要有稳定的电压,所以很多时候需要稳压器.
被测物：一般要求被测物中离子的含量不要太高,一般到g/L就足够大了,据我所知,常被监测的浓度范围是ppm或ppb级的.被测物最好不要有太多杂质,不然会干扰测定的,所以测实际样品是一般需要预处理；最好不要有颜色,这样必定会干扰测定；一定不能有固体!

是不是 你没有用显色剂啊,感觉应该不会啊.
最好是找到 蔬菜中硝酸盐测定 的国标,然后根据国标来做,那就比较简单了.

紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法.操作简单、准确度高、重现性好.波长长（频率小）的光线能量小,波长短（频率大）的光线能量大.分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量.

溶剂选择：在所要测量的波段对光没有吸收
显色剂选择：灵敏,稳定,易于建立吸光度与待测物浓度间的关联

因为过硫酸钾将水样中的氨氮、亚硝酸盐氮及大部分有机氮化合物氧化为硝酸盐所以在275nm处也测定吸光度,用来校正硝酸盐氮值.在220nm 有最大

Preliminary study of carbon quality standards ginger
Abstract: Objective fried ginger slices carbon storage of carbon quality control. Methods In this study, UV spectrophotometry, pigment adsorption, conductivity and different levels of carbon products dried ginger (light carbon, the standard carbon, heavy carbon) were studied. Results ginger and different degrees of tannin content of carbon products, adhesive forces with the regularity of the conductivity law is not obvious. Conclusion Determination of tannin and pigment carbon adsorption Pieces of ginger can be used as carbon storage of fried measure of quality control.

OD280测DNA,OD320测蛋白质.
不过两个会互相影响.

紫外分光光度法和荧光分析法

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的光吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法.
1.基本原理
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比,即朗伯 - 比尔定律,这是吸收光谱法定量的理论依据,其关系式如式 3-1 ：
A = ECL 式 (3-1)
式中A 为吸收度 ； E 为吸收系数,即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值； C 为溶液浓度； L 为液层厚度.
紫外- 可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法.《中国药典》 (2005 年版 ) 有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价.其主要特点为：灵敏度高,可达 10 -4 g/ml 10 -7 g/ml ；准确度高,相对误差为 2 ％ 5 ％.中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分,在一定的浓度范围内,其溶液的吸收度与浓度符合朗伯 - 比尔定律,均可用此法进行分析.本法适于大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等.
2.定量测定法
测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用 1cm 的石英吸收池,在选（规）定的吸收峰波长 ±2nm 以内测试几个点的吸光度,或由仪器在选定波长附近自动扫描测定,以吸光度最大的波长作为测定波长.一般供试品溶液的吸光度读数,以在 0.3 0.7 之间的误差较小.当溶液的 pH 值对测得结果有影响时,应将供试品溶液和对照品溶液的 pH 值调成一致.
用于含量测定的方法一般有以下几种.
(1) 对照品比较法 凡溶液中待测物质吸收符合朗伯 - 比尔定律,则分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的 100 ％±10 ％,所用溶剂也应完全一致,在该物质的最大波长下测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后,按式 3-3 计算供试品中被测溶液的浓度：
C x ＝ ( A x ／ A R ) C R 式 (3-2)
含量＝ ( C x × D ) / W ×100 式 (3-3)
式中C x 为供试品溶液的浓度； A x 为供试品溶液的吸光度； C R 为对照品溶液的浓度； A R 为对照品溶液的吸光度； D 为稀释倍数； W 为供试品取样量.
（ 2 ）吸收系数法 先测出对照品在 λ max 下的吸光度,然后求得吸收系数；也可从有关手册或药典中查得有关化合物的吸收系数.采用与对照品相同的溶剂,配制供试品溶液,在相同的波长处测定其吸光度,求出吸收系数,计算含量.
含量％＝ [( ) x /( ) R ]×100% 式 (3-4)
式中,( ) x 为供试品的百分吸收系数； ( ) R 为对照品的百分吸收系数.
用本法测定时,应注意仪器的校正和检定.
（ 3 ）标准曲线法 从待测物质的吸收光谱图上选定某一最大吸收波长,用一系列不同浓度的标准溶液在该波长处分别测得它们的吸光度,用吸光度对浓度作图.若待测物质对光的吸收符合朗伯 - 比尔定律,应得到一条通过原点的直线,即标准曲线.在同样条件下测定样品溶液的吸光度,在标准曲线上可读出样品溶液的浓度.Z

光源不同,可见光用钨灯,紫外用氘灯;
测得溶液颜色不同,可见光的溶液是有色的；紫外的溶液是无色的

用吸收液吸收气体中的物质,要求气体中的物质能迅速和吸收液反应,否则吸收不完全,无法检测分析.我做过空气中微量HCl,要用NaOH溶液吸收.
苯好象没有合适的吸收液.
如果是这样,你可以考虑用活性炭吸附,然后溶剂洗脱然后测量.
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紫外光度法可测出核算的质量摩尔浓度：m B =M r A 260 /εL 对于纯核酸样品,DNA在A260nm的A值为0.020,RNA则为0.022~0.024即一个A值相当于50ug/mL双螺旋DNA,40ug/mL RNA或单链DNA.此法简便、快速、灵敏度高,DNA和RNA的产物均可测定,但色素及其他具有紫外吸收的物质对测定有影响.

主要是被测物质在哪个光区有吸收,一个是紫外区,一个是可见光区,两者没有明显的区分点,因为两个光区有重叠的部分